王玲燕
- 作品数:5 被引量:24H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 以炎症相关细胞因子受体为靶位的受体拮抗剂筛选模型构建及受体拮抗剂的研究
- 李元吴剑波王玲燕陈晶张洋郭连宏姜蓉李宝义
- 1994年7月-2004年9月,由国家自然科学基金6项、国家高技术研究发展计划“863”1项、科技部科研院所开发研究专项资金1项、国家重点科技项目计划专题基金等9项资助,进行了研究。炎症反应和免疫应答密切交织,参与炎症反...
- 关键词:
- 关键词:炎症细胞因子受体拮抗剂白细胞介素
- 微生物胞外多糖生物合成研究进展被引量:15
- 2002年
- 微生物胞多外糖 (EPSs)在食品和医药等方面具有很大的应用价值 ,近年来 ,有关EPSs生物合成研究 ,以及参与EPSs生物合成的基因蔟的不断发现 。
- 王玲燕李元
- 关键词:生物合成基因簇
- 链霉菌胞外多糖139A生物合成中引导糖基转移酶基因的克隆和鉴定被引量:8
- 2003年
- 链霉菌 139能够产生一种新的胞外多糖 139A ,该多糖具有抗类风湿性关节炎的活性。为研究多糖 139A的生物合成基因簇 ,首要策略是克隆到在多糖 139A的生物合成中起关键作用的引导糖基转移酶基因。根据其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序列的两个保守区域设计简并引物 ,通过PCR方法扩增出相应的DNA片段作为探针 ,从链霉菌 139基因组文库中分离到引导糖基转移酶基因ste5 ,并定位于约 32kb的基因簇上。序列分析发现其蛋白序列与引导糖基转移酶具有较高的同源性 ,其C 端含有A ,B和C 3个保守区 ,N 端具有 5个跨膜区。引导糖基转移酶基因阻断突变株不能够产生多糖 139A表明其参与多糖 139A的生物合成。
- 王玲燕李师弢郭连宏姜蓉李元
- 关键词:生物合成糖基转移酶基因阻断链霉菌
- 链霉菌UDP-葡萄糖脱氢酸编码基因Ste6的克隆表达和性质研究(英文)
- 2005年
- 链霉菌139能够产生一种全新的胞外多糖--依博素(139A),该多糖体内具有显著抗类风湿性关节炎活性.其生物合成基因簇 (GenBank Accession Number:AY131229)已被鉴定约31.3 kb,包含22个开放阅读框 (ste1~ste22).以pET-30a为载体,克隆并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了ste6基因的表达,对该基因的克隆、表达与性质进行了研究.亲和层析法证实,纯化后重组蛋白具有催化UDP-葡萄糖脱氢变成UDP-葡萄糖醛酸的活性.这表明ste6编码产物是葡萄糖脱氢酶.为了证实ste6基因与依博素生物合成的关系,采用单交换基因破坏策略构建了ste6基因阻断突变株.结果初步显示ste6和依博素生物合成相关.
- 李颢王玲燕徐桂云陈阳姜蓉李元
- 关键词:基因阻断
- 链霉菌来源的UDP-葡萄糖-4-差向异构酶基因的克隆表达及酶性质研究被引量:2
- 2005年
- 经同源性比较,链霉菌139(Streptomycessp.139)产生胞外多糖依博素的生物合成基因簇中ste19基因编码的蛋白Ste19与UDP_葡萄糖_4_差向异构酶有较高同源性。将ste19基因克隆至质粒pET30a,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了异源表达。产生的可溶性Ste19重组蛋白,占细胞总蛋白的26%,说明该基因高GC含量(73.8%)及第三位碱基偏向使用GC(96.2%)并未影响其高效表达。SDS_PAGE结果显示重组蛋白的分子量约37kD,与理论推测值基本相同。经亲和层析纯化后得到了较高纯度的重组蛋白,经HPLC分析纯度为92.9%。酶活性分析表明:Ste19蛋白可将UDP_葡萄糖转化为UDP_半乳糖,因此,Ste19蛋白是UDP_葡萄糖_4_差向异构酶,它可能参与了依博素的生物合成。
- 张天宇王玲燕姜蓉李元
- 关键词:链霉菌