王玉丽
- 作品数：15 被引量：129H指数：6
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技支撑计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用生物发光技术研究甲基硒酸对L9981-Luc肺癌细胞株移植瘤模型生长转移的影响被引量：3
- 2013年
- 背景与目的甲基硒酸是一种新型的人工合成的硒化合物。研究发现甲基硒酸对肿瘤细胞的生长转移有抑制作用。本研究的目的是探讨甲基硒酸对L9981-Luc裸鼠异体移植瘤生长和转移能力的抑制作用及机制。方法建立L9981-Luc肺癌细胞株移植瘤模型,用精诺真活体动物可见光成像系统观察肺癌移植瘤肿瘤生长转移情况。实验将6周龄裸鼠15只,随机分为3组,每组5只,对照组每日腹腔注射生理盐水0.2mL;甲基硒酸组每日腹腔注射甲基硒酸溶液50μg(0.2mL);顺铂组每周腹腔注射顺铂4mg/kg。结果接种第21天,不同组间原发瘤发光值比较差异有统计学意义(P=0.002);顺铂组发光值明显低于对照组(P=0.001),甲基硒酸组发光值明显低于对照组(P=0.031)。不同药物处理组胸部转移信号发光值差异无统计学意义(P>0.05)。结论甲基硒酸能明显抑制L9981-Luc裸鼠异体移植瘤生长,并有抑制L9981-Luc原发瘤肺转移的趋势。
- 任苑蓉王玉丽刘红雨闫惠琴陈军侯梅李为民范亚光周清华
- 关键词：甲基硒酸生物发光成像
- HIF1A/VEGFA/KDR在软组织肉瘤中表达及其与患者预后的关系
- 2022年
- 目的探讨HIF1A/VEGFA/KDR在软组织肉瘤中表达及其与患者预后的关系。方法从cBioPortal网站和Xenabrowser网站获得TCGA 265例软组织肉瘤样本相关基因突变和表达量数据,通过OncoPrinter软件进行基因突变互斥和共表达分析,Spearman非参数相关进行基因相关性分析,Xenabrowser获得基因相关性热图,Kaplan-Meier法和Log-Rank检验进行生存分析。结果软组织肉瘤中HIF1A/VEGFA/KDR的拷贝数变化和基因突变存在互斥趋势(P>0.01),HIF1A/VEGFA/KDR表达量存在正相关(P<0.01),HIF1A/VEGFA/KDR的拷贝数扩增的患者总生存期和无病生存期显著低于无扩增患者(P<0.05)。结论靶向HIF1A/VEGFA/KDR可作为软组织肉瘤的治疗手段之一。
- 王玉丽郭志涛
- 关键词：血管生成软组织肉瘤基因组学
- Vegfr2-luc转基因子代小鼠的鉴定
- 2011年
- 背景与目的 Vegfr2-luc转基因小鼠体内血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor recep- tor 2,VEGFR2)的表达可以驱动荧光素酶报告基因(luciferase,luc)的表达,是活体动物水平实时监测血管生成情况的有利工具。本研究旨在对子代Vegfr2-luc转基因小鼠进行鉴定,以确定能否用于血管生成研究。方法 PCR检测新生小鼠基因组内luc基因;利用活体成像技术观察新生Vegfr2-luc转基因小鼠生长发育过程中以及皮肤伤口修复过程中 luc基因表达水平的变化情况;荧光素酶报告基因检测试剂盒检测成年(8周龄)转基因小鼠各脏器荧光素酶的活性和Real-time PCR检测各器官VEGFR2 mRNA的表达水平。结果 PCR结果显示50%(56/112)的新生小鼠携带luc基因。活体成像结果显示随着Vegfr2-luc转基因小鼠发育成熟,luc表达量逐渐降低(P<0.001);在皮肤伤口修复过程中, 伤口处luc表达水平先增强后降低(P<0.001)。雌性成年转基因小鼠各脏器VEGFR2 mRNA的表达水平与荧光素酶活性呈正相关(r=0.948,P<0.001)。将睾丸组织除外,雄性成年转基因小鼠各脏器VEGFR2mRNA的表达水平与荧光素酶活性同样呈正相关(r=0.836,P<0.001)。结论 Vegfr2-luc转基因子代小鼠体内luc表达水平的变化可以反映VEGFR2 的表达情况。
- 王伟强刘红雨宋志涛王玉丽王竞李颖李永文王岷陈军周清华
- 关键词：动物模型血管新生荧光素酶报告基因
- 尼古丁诱导肺癌细胞上皮间质转化促进其侵袭转移被引量：6
- 2016年
- 背景与目的我们的前期研究发现尼古丁能诱导肺癌细胞上皮间质转化。本研究的目的是探讨尼古丁诱导的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肺癌侵袭之间的关系。方法应用不同浓度尼古丁处理肺腺癌A549细胞,应用Real-time PCR和Western blot方法检测EMT相关分子标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)m RNA和蛋白表达水平,应用免疫荧光技术检测β-链蛋白(β-catenin)蛋白表达位置的变化,应用划痕实验和Transwell小室侵袭实验检测尼古丁对肺癌细胞迁移侵袭能力的影响。结果尼古丁明显下调肺癌细胞株A549 E-cadherin m RNA和蛋白水平表达(P<0.01,P<0.01),并具有浓度和时间依赖性;尼古丁明显上调肺癌细胞株A549 Vimentin m RNA和蛋白水平表达(P<0.01,P<0.01);尼古丁诱导肺癌细胞株A549细胞β-catenin蛋白发生核转移;划痕实验和侵袭实验观察到尼古丁处理的肺癌细胞株A549细胞的迁移和侵袭能力明显增强(P<0.01,P<0.01)。结论尼古丁能够诱导肺癌细胞发生EMT,并且促进肺癌细胞株A549细胞的体外侵袭潜能。
- 侯艳须李雪冰潘振华祖玲玲范亚光尤嘉琮王玉丽王岷陈沛锐沈旺周清华
- 关键词：肺肿瘤尼古丁上皮间质转化
- MiR-192靶向负调控Bim表达诱导肺癌顺铂耐药被引量：12
- 2014年
- 背景与目的顺铂是非小细胞肺癌化疗的一线药物,但获得性耐药限制了其疗效的发挥。本研究的目的是筛选鉴定与肺癌顺铂耐药相关的microRNAs,探讨其与肺癌顺铂耐药的影响及分子机制。方法应用miRNA芯片及RT-PCR筛选鉴定A549与A549/DDP肺癌细胞间的差异表达miRNAs,将差异表达miR-192转染A549和A549/DDP细胞株,CCK-8检测miR-192对半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)的影响,流式细胞术检测细胞凋亡,生物软件预测及双荧光素酶报告基因法寻找miR-192的靶基因,RT-PCR及Western blot检测靶基因表达水平在转染前后的变化。结果 MiR-192在A549/DDP中显著高表达,表达量是A549细胞表达量的37.59±0.35倍。在低表达miR-192的A549细胞中过表达miR-192,细胞对顺铂的IC50显著增高,顺铂引起的细胞凋亡率显著降低;反之,在高表达miR-192的A549/DDP中抑制miR-192的表达,顺铂的IC50显著降低,顺铂引起的细胞凋亡率显著增加。miR-192可靶向作用促凋亡基因Bim的3’-UTR,并在转录后水平负向调控Bim的表达。结论 MiR-192通过靶向负调控促凋亡基因Bim表达,诱导肺腺癌细胞株A549产生顺铂耐药,并减少顺铂引起的细胞凋亡。
- 张芳李洋吴蘅齐康尤嘉琮李雪冰祖玲玲潘振华王玉丽李永文李颖王珉沈旺周清华
- 关键词：肺肿瘤MIRNA芯片RT-PCRBIM
- 非小细胞肺癌中EGFR基因状态的检测对EGFR-TKIs疗效的预测价值被引量：9
- 2010年
- 近几年,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是肿瘤学药物研发的一个重要靶点。EGFR的小分子抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)成为目前非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗的热点。临床研究表明,EGFR-TKIs的临床疗效存在明显的个体差异,EGFR分子的存在状态影响TKI的疗效。EGFR外显子突变、EGFR拷贝数增加的患者对TKI的疗效较好,而存在KRAS突变患者提示对TKI耐药。
- 王玉丽刘红雨陈军
- 关键词：EGFR-TKISERLOTINIBGEFITINIBFISHIHC
- 实时荧光定量PCR和测序法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的比较被引量：11
- 2009年
- 背景与目的以厄洛替尼(Erlotinib)为代表的小分子表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂在治疗非小细胞肺癌已经取得很好的疗效。许多研究发现表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变与酪氨酸激酶抑制剂的疗效密切相关。本研究目的是通过比较荧光定量PCR(Real-time PCR)和DNA测序法检测EGFR基因突变的一致性,建立适用于临床的EGFR基因突变检测方法。方法应用荧光定量PCR(Real-time PCR)及DNA测序法检测103例非小细胞肺癌标本的EGFR外显子19和21的基因突变,结果比较采用卡方检验。结果两种方法对EGFR外显子19和21的基因突变的检测结果无统计学差异,且荧光定量PCR法比测序法更快捷和灵敏。结论与测序法相比,荧光定量PCR更适用于临床检测。
- 李永文刘红雨李颖王玉丽王竞陈军周清华
- 关键词：表皮生长因子受体基因突变荧光定量PCRDNA测序法
- 姜黄素对人甲状腺癌TPC-1细胞增殖、周期和凋亡的影响
- 2023年
- 目的探讨姜黄素对人甲状腺癌TPC-1细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法取对数生长期TPC-1细胞,加入0.0、7.5、15.0、22.5μmol/L姜黄素培养48 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖水平;流式细胞仪测定细胞周期和凋亡水平;蛋白质印迹(Western blot)法测定B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平。结果7.5、15.0、22.5μmol/L姜黄素组细胞增殖抑制率均高于0.0μmol/L姜黄素组(均P<0.05);G0/G1期比例均高于0.0μmol/L姜黄素组,而G2/M和S期比例均低于0.0μmol/L姜黄素组(均P<0.05);细胞凋亡率均高于0.0μmol/L姜黄素组[(14.13±0.57)%、(25.27±0.62)%、(36.01±0.84)%比(8.48±0.43)%,均P<0.05];Bcl-2蛋白表达水平均低于0.0μmol/L姜黄素组,而Bax蛋白表达水平均高于0.0μmol/L姜黄素组(均P<0.05)。结论姜黄素可抑制TPC-1细胞增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期,通过下调Bcl-2表达及上调Bax表达促进细胞凋亡。
- 王玉丽郭志涛范亚光
- 关键词：姜黄素甲状腺癌增殖细胞周期凋亡
- 槐定碱对肺癌A549细胞体外增殖和侵袭抑制作用及机制的研究被引量：31
- 2015年
- 目的探讨天然产物槐定碱对人肺癌A549细胞系体外增殖和侵袭的抑制作用及其机制。方法应用噻唑盐(MTS)法检测槐定碱对肿瘤细胞生长的作用,流式细胞术检测槐定碱对肿瘤细胞凋亡、细胞周期和细胞内活性氧(ROS)生成的变化,Transwell试验检测肿瘤细胞体外侵袭能力的变化,黏附实验检测肿瘤细胞体外黏附能力的变化,Realtime PCR法和Western blotting法检测细胞凋亡相关基因Survivin、Bcl-2和caspase-3/8、细胞周期相关基因CDK-2、黏附分子CD44和基质金属蛋白酶MMP-2/9的表达以及AKT磷酸化的变化;报告基因技术检测NF-κB转录活性和细胞内泛素化蛋白酶体的活性的变化。结果槐定碱对肺癌A549细胞具有明显的抑制作用,经过槐定碱作用后,肿瘤细胞内活性氧水平和凋亡率上调,细胞周期阻滞在G2/M期,细胞体外侵袭和黏附能力降低,Realtime PCR和Western blotting结果显示,促凋亡蛋白caspase-3/8表达上调,抑制凋亡蛋白Survivin和Bcl-2,细胞周期相关蛋白CDK-2、黏附分子CD44以及基质金属蛋白酶MMP-2/9表达下调,AKT磷酸化水平下调,NF-κB转录活性和细胞内泛素化蛋白酶体的活性降低。结论槐定碱可抑制肺癌A549细胞体外增殖和侵袭能力,可能与槐定碱提升肿瘤细胞内的活性氧水平、促进其凋亡、阻滞细胞周期、抑制泛素化蛋白酶体的活性和调节肿瘤相关基因表达有关。
- 李明潺王玉丽董林易
- 关键词：槐定碱肺癌增殖
- UPLC-Q-TOF-MS法同时测定平消片中7种成分被引量：10
- 2015年
- 目的建立同时测定平消片中7种成分（柚皮苷、橙皮苷、士的宁、马钱子碱、仙鹤草酚B、汉黄芩素和原儿茶酸）的超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS）的检测方法。方法采用Waters Acquity BEH C18（100mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱,流动相为乙腈-甲酸-水体系梯度洗脱,体积流量0.45 m L/min,质谱负离子模式扫描,进样量2.0μL。结果 7种成分在一定范围内均呈现良好线性关系,r均大于0.999 6;精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率在99%~101%。结论所建立的方法简便、准确、快速,重复性好,可用于平消片中柚皮苷、橙皮苷、士的宁、马钱子碱、仙鹤草酚B、汉黄芩素和原儿茶酸7种有效成分的定量测定。
- 李明潺王玉丽郭春宏董林毅李博乐段宏泉刘昌孝
- 关键词：平消片柚皮苷橙皮苷马钱子碱汉黄芩素原儿茶酸
