王毅君
- 作品数：9 被引量：9H指数：1
- 供职机构：兰州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：甘肃省中青年科技研究基金中央高校基本科研业务费专项资金甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 大肠癌中TIP30基因的表达及其与VEGF,survivin,cyclinD1的相关性
- 闫琨车团结王小虎李琳王毅君陈卫
- FABP7超表达与RNAi真核表达载体对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响
- 目的：观察FABP7超表达与RNAi真核表达载体对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响，从而为进一步研究FABP7基因的功能奠定基础。
方法：以FABP7的cDNA为模板，采用PCR方法获得FABP7基因的N端、C...
- 王毅君
- 关键词：乳腺癌MCF-7细胞增殖
- 文献传递
- FABP7基因真核表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的构建脑脂肪酸结合蛋白(BLBP/B-FABP,FABP7)基因的真核表达载体,并检测其对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响。方法采用逆转录方法从星型细胞瘤组织中扩增FABP7基因,双酶切后插入线性化的pcDNA3.1载体真核启动子下游,构建重组真核表达载体,转染人乳腺癌细胞MCF-7后,采用半定量RT-PCR检测FABP7基因mRNA的表达,MTT法检测细胞的增殖活性、流式细胞术检测细胞的周期变化情况,并对细胞进行计数。结果FABP7基因重组真核表达质粒经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染MCF-7细胞后48、72和96h,pcDNA3.1-FABP7组的细胞数和细胞的A490值均比pcDNA3.1空质粒组明显降低,G1期细胞百分含量均明显升高。结论已成功构建了FABP7基因的真核表达载体,该载体可抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖。
- 王毅君车团结张萍闫琨李琳王勤陈卫
- 关键词：真核表达乳腺癌MCF-7细胞增殖
- 课程思政建设助力医学形态学实验教学改革的探索
- 2023年
- 开设综合设计性实验是基础医学实践教学的改革方向之一,通过将课程思政与学科知识相融合推进医学形态学实验教学改革,探索培养合格新医科创新人才的有效途径。
- 谷弘王敏王毅君于红娟马岚
- 关键词：医学形态学实验实验教学
- 基于虚拟仿真+CBL+TBL的混合式教学在“医学形态学实验”中的应用被引量：8
- 2021年
- 目的探讨虚拟仿真实验项目与CBL及TBL相结合的混合式教学方法在“医学形态学实验”教学中的应用效果。方法以2016级和2017级选课学生为研究对象,随机分为对照组和实验组,对照组采用传统教学方法,实验组采用混合式教学方法,分别进行“医学形态学实验”教学;课程结束后,对学生进行问卷调查及综合考核,比较两种方法的教学效果。结果实验组学生的综合考核成绩显著高于对照组(P<0.05);问卷调查显示,实验组学生对混合式教学方法满意度较高(P<0.05)。结论在“医学形态学实验”教学中,混合式教学的教学效果明显优于传统教学方法。
- 王敏任银祥谷弘王毅君于红娟马岚
- 关键词：混合式教学虚拟仿真实验CBL教学
- 以尼龙膜为载体的基因芯片探针及样品合理浓度筛选
- 2008年
- 背景:目前多数芯片采用玻璃片基,以Cy3和Cy5标记,价格高,主要用于科研,但不能在临床上大规模推广应用。课题组采用尼龙膜为载体制作基因芯片,以期获得一种具有高灵敏度和准确性、快速简便、可同时检测多种疾病且成本低的芯片。目的:对以尼龙膜为载体基因芯片的可行性进行检测,同时对所用探针及目的基因的量进行优化。设计、时间及地点:基因工程探针设计,于2005-10/2006-09在兰大科技园百源基因公司实验室完成。材料:甘肃省肿瘤医院2005-10/2006-04切除的新鲜大肠癌标本,取距肿瘤边缘5～10cm以上的正常组织作为对照,病理证实无癌细胞浸润。尼龙膜带正电荷,购自Amersco公司。方法:从液氮中取出冻存的新鲜组织200mg,采用Trizol法提取组织总RNA,并用Oligo dT纤维素层析法纯化mRNA。使用TaKaRa的M-MLV Rtase cDNA synthesis Kit(code D6130)反转录合成cDNA的第1,2链,产物分为两部分,一部分作为模板进行地高辛标记PCR,所得产物作为目的基因,另一部分作为制备探针的模板。对获得的GAPDH,Actin,Cyclin D1三种基因片段PCR产物进行纯化。以带正电荷的尼龙膜为载体,将不同浓度的三种基因片段作为探针点于其上,所得芯片分别与不同浓度的地高辛标记目的基因进行杂交。结果:目的基因取2.5μL,1.25μL时,加入杂交液后因目的基因的浓度太小,造成各点探针密度相对较高,而无法反映出正确的显色趋势。目的基因取5μL时,探针密度为10～20μL情况下3种探针显色深度较恰当的反映了由强到弱的趋势,ACTIN>CyclinD1>GAPDH。目的基因取10μL时,探针取15μL,20μL的量能较为合理的反映由强到弱的趋势。目的基因取20μL时,此时杂交液中目的基因的浓度对于ACTIN和CyclinD1过高,不能明显反映二者着色深浅变化。结论:以尼龙膜为载体的基因芯片本底清晰,合理目的基因用量为5μL,与其相匹配的优化探针用量
- 闫琨车团结王毅君陈卫李琳王小虎
- 关键词：基因芯片
- FABP7基因真核表达载体的构建及其对人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用
- 2009年
- 王毅君车团结张萍闫琨李琳王勤陈卫
- 关键词：乳腺癌细胞
- Survivin-siRNA真核表达载体的构建及其对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响
- 2009年
- 目的构建Survivin-siRNA真核表达载体,并探讨其对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法化学合成4条能转录出siRNA的模板DNA,各75个碱基,退火形成2条双链DNA,双酶切后插入pSUPER.basic载体。将阳性重组质粒转染SGC-7901细胞,进行细胞计数,并用MTT法检测细胞的增殖活性;半定量RT-PCR检测细胞Survivin基因mRNA的转录水平;流式细胞术检测细胞周期的变化。结果PCR和酶切鉴定表明Survivin-siRNA真核表达载体构建正确,其能下调SGC-7901细胞Survivin基因mRNA的转录水平,抑制SGC-7901细胞生长和增殖,并促进细胞凋亡,使G0/G1和亚G1期细胞增多,S期细胞减少。结论已成功构建了Survivin-siRNA真核表达载体,其能下调SGC-7901细胞中Survivin基因mRNA的转录水平,使细胞增殖减弱,凋亡增加,为RNA干扰技术应用于胃癌的基因治疗提供了一定的实验依据。
- 陈卫王玉平庞春艳王毅君
- 关键词：SURVIVIN小干扰RNA真核表达载体胃癌增殖凋亡
