王春芳
- 作品数:4 被引量:14H指数:2
- 供职机构:山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 体外软骨细胞凋亡诱导及检测方法的研究进展被引量:7
- 2014年
- 软骨细胞凋亡在骨关节炎的病理进程中起着重要的作用,对软骨细胞凋亡的研究近年来也成为研究的热点。在实验研究中,往往需要通过一定的途径来诱导软骨细胞的凋亡,以此建立体外软骨细胞凋亡模型,并进行凋亡检测。本文综述了常用的细胞形态学、流式细胞术、DNA断裂的分子生物学检测以及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase-3)检测方法的原理,并阐述各方法的灵敏性、特异性以及局限性。软骨细胞凋亡受多方面因素的影响,体外常用于诱导软骨细胞凋亡的方法有多种,原理各异,实验研究中应结合各自的实验目的、实验设计及实验条件等综合考虑。在凋亡检测中,由于各种检测方法作用机制的不同及各自的灵敏性、特异性和局限性,需结合多项定量、定性的指标反复加以验证才能得出更为客观、可靠。
- 王世东王宇泽曾令员贺冬冬王春芳卫小春
- 关键词:软骨细胞凋亡骨关节炎
- Ⅰ/Ⅲ型胶原膜联合自体骨髓间充质干细胞修复兔膝关节软骨缺损被引量:3
- 2012年
- 背景:研究表明Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原都有利于骨髓间充质干细胞的黏附、增殖和分化。目的:观察Ⅰ/Ⅲ型胶原膜联合自体骨髓间充质干细胞修复兔膝关节软骨缺损的可行性。方法:取24只新西兰大白兔制作双膝股骨滑车直径3.8mm、深2mm关节软骨缺损模型,分为2组:实验组缺损区植入Ⅰ/Ⅲ型胶原膜-自体骨髓间充质干细胞复合物,对照组缺损区植入单纯Ⅰ/Ⅲ型胶原膜。结果与结论:膝关节股骨标本组织学染色显示,实验组植入8周时为类透明软骨修复,12周时接近于正常软骨;对照组植入8周时以纤维样组织修复为主,12周时为纤维软骨修复。实验组植入后8,12周组织学评分均明显高于对照组(P<0.001)。表明运用Ⅰ/Ⅲ型胶原膜-自体骨髓间充质干细胞复合物可修复关节软骨缺损。
- 贺冬冬曾令员向川王宇泽王世东段王平吕嘉王春芳卫小春
- 关键词:骨髓间充质干细胞关节软骨缺损生物材料
- 基质细胞衍生因子-1对兔膝关节软骨细胞增殖和凋亡的影响被引量:2
- 2013年
- 目的观察基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对兔膝关节软骨细胞体外增殖的影响,探讨SDF—l在软骨细胞凋亡过程中的作用。方法体外分离培养兔膝关节软骨细胞并随机分为4组:对照组、50μg/LSDF.1组、50μ/LSDF-1+5mg/LCXC趋化因子受体4特异性拮抗剂(AMD3100)作用组、5mg/LAMD3100处理组,采用噻唑蓝(MTT)比色法和测定细胞周期观察各组软骨细胞增殖。同时将各组置于250μmol/L过氧化氢条件下作用2h,锥虫蓝染色计数软骨细胞存活率;测定各组中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase.3)的活力;流式细胞仪观察各组软骨细胞凋亡率的变化;原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测凋亡的软骨细胞。结果增殖实验中SDF-1组吸光度(A)值(0.504±0.024)均高于其他各组,且该组S+G2/M期细胞比例高于其他各组,差异有统计学意义(p〈0.05)、在凋亡方面,锥虫蓝拒染实验结果显示SDF-1组中细胞存活率高于其他3组(P〈0.01):而SDF-1组膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(AnnexinV—FITC)标记的细胞比例[(4.00±0.92),低于其他各组(P〈0.05);SDF-1组Caspase-3活力(40.03±2.56)nmolpNA/(h·rag)蛋白也较其他组低(p〈0.01):TUNEL实验中SDF-1组细胞核呈棕黄色的软骨细胞数低于其他各组(P〈0.05).但各实验中SDF—l+AMD3100组和AMD3100处理组与对照组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论SDF-1可促进兔膝关节软骨细胞体外增殖,且在50μg/L时软骨细胞增殖活性好,同时SDF-1在过氧化氯诱导的细胞凋亡条件下可保护软骨细胞免于凋亡。
- 王世东王宇泽曾令员贺冬冬王春芳卫小春
- 关键词:基质细胞衍生因子-1脱噬作用增殖软骨细胞
- 生物体液特异性代谢标志物应用于骨关节炎诊断的进展被引量:2
- 2011年
- 骨关节炎是一种慢性多发疾病,起病缓慢,病程长,如何早期诊断是治疗本病的关键。以往研究关注于寻找反映疾病变化的生物标志物,但由于个体间存在较大差异,至今尚未发现能用于诊断骨关节炎的特异蛋白或生物标志物。代谢组学是后基因时代的一门新兴学科,目前通过对骨关节炎患者尿液进行代谢组学研究,发现特异性生物学标志物,进而早期诊断骨关节炎已有报道。本文对代谢组学应用于骨关节炎诊断做一综述。
- 孙剑向川王春芳卫小春侯志超
- 关键词:骨关节炎代谢组学生物标志物