王敬文
- 作品数：21 被引量：107H指数：6
- 供职机构：复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金上海市科技兴农重点攻关项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 水稻ω-3脂肪酸脱氢酶的基因克隆和功能研究
- 水稻是我国最主要的粮食作物之一，水稻的播种主要分布于热带和亚热带地区，其地理分布主要受温度的影响。不饱和脂肪酸是植物膜系统的重要组份之一，它的含量的变化是植物缓解外界温度压力的一种重要手段。本论文中用RT-PCR的方法从...
- 王敬文
- 关键词：脂肪酸原位杂交水稻转基因烟草
- 蝴蝶兰快速繁殖、周年催花和花质的遗传改良研究
- 明凤董玉光叶鸣明陈龙英沈大棱韩颖颖郭滨王敬文梁斌
- 该任务确定了蝴蝶兰快速、高效繁殖的方法和技术手段。以腋芽为外植体，建立了高效、简便的诱导原球茎的方法。筛选出适用于工厂化生产的原球茎诱导培养基；原球茎增殖培养；原球茎分化与生根培养基。利用筛选到的25个特异引物对蝴蝶兰不...
- 关键词：
- 关键词：快速繁殖
- 利用RAPD推测宝山香柚与其他柑橘属品种间的亲缘关系被引量：6
- 2004年
- 香柚(香橼)(Citrus aurantium L.)(当地农民称谓)是上海市宝山区长兴岛和横沙岛上一种属柑橘类(芸香科,柑橘属)的优良树种,适宜作行道果树、公园装饰树种、城市小区绿化或生态林优势种群.其园艺性状优势:(1)树干挺拔,四季翠绿,易与其他树种混种,形成森林生态系统;(2)每年五一节前后是盛花季节,满树白花,香气怡人,树叶散发的气体具有净化空气的作用;(3)成年树金色硕果,由于果酸,枝条有刺,不易失窃,总挂果时间长达半年(从国庆节可持续到春节,满树金黄色果子),每个果实直径达10～12cm,沿道路两旁形成一条美丽的风景线;(4)果实虽有酸味,加工后仍可食用,干果为中药材;(5)树种抗病性强,无致命病虫害.故该品种具有一定的绿化树种与商业开发的应用价值.
- 明凤任志军王敬文梁斌郭滨沈大棱
- 关键词：柑橘属品种间亲缘关系RAPD地方种质资源
- 云南滇西高原粳稻区白叶枯病菌遗传多样性初探被引量：8
- 2003年
- 用IS-PCR和rep-PCR法分析了17个采自云南滇西高原粳稻区的水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzaepv.O-ryzae)和7个其他地区的水稻白叶枯病菌的群体遗传多样性。用2个适合中国水稻白叶枯病菌的引物J3和ERIC对这24个菌系基因组DNA进行PCR扩增反应,J3引物有14条条带,ERIC引物有13条条带,2个引物呈现18种谱型。用PHYLIPVersion3.6软件UPGMA聚类分析法分析白叶枯病菌系之间的遗传距离,可将24个病原菌分为4簇,3个来自菲律宾的白叶枯病菌与中国的菌系距离较远,云南高原粳稻区分离的菌系十分复杂,4个簇中都有,但主要集中在2个簇中,共有14个菌系。
- 梁斌王敬文明风戴陆园叶鸣明沈大棱
- 关键词：白叶枯病菌水稻
- 蝴蝶兰快速经济有效繁殖技术的研究(英文)被引量：3
- 2004年
- 以蝴蝶兰 (Phalaenopsis)花梗腋芽为外植体 ,研究出一种高效、简便的诱导原球茎 (Protocorm)的方法 .在不含其他有机添加物 ,只添加BA (3mg/L) +NAA (0 .1mg/L)的MS培养基中 ,原球茎诱导效率达 80 % .相同培养基继代 ,4周内即可发育成幼苗 .在含有IAA(0 .1mg/L)的MS培养基中 ,4 0 %的幼苗可以诱导生根 ,并移植成功 .由于此方法简便、经济有效 ,可应用于工厂化生产 ,而且获得的优质原球茎也为进一步的遗传改良提供材料 .
- 王敬文明凤叶鸣明董玉光梁斌陈龙英沈大棱
- 关键词：花梗腋芽原球茎
- 蝴蝶兰查尔酮合酶基因cDNA的克隆、鉴定及其原核表达被引量：16
- 2004年
- 利用逆转录 聚合酶链式反应 (RT PCR)得到在蝴蝶兰花瓣中特异性表达的查尔酮合酶cDNA(pchs 1) .DNA序列分析表明 ,该序列与已发表的查尔酮合酶基因有很高的同源性 .将此cDNA序列不改变阅读框架克隆到pET 2 4α(+)原核表达载体上 ,经IPTG诱导后 ,SDS PAGE的结果表明有预测大小的蛋白受诱导表达 ,该基因在植物中的功能验证工作正在进行中 .
- 韩颖颖明凤王敬文梁斌郭滨叶鸣明沈大棱
- 关键词：查尔酮合酶反转录PCR
- 水稻Osfad8编码序列及其应用
- 本发明属分子生物学、基因工程技术领域，具体提供了一种在水稻中表达的ω－3脂肪酸脱氢酶(fad8)的编码序列及其在提高植物18碳三烯酸(α－亚麻酸)含量的应用。本发明涉及包含上述基因的重组表达载体。还涉及所说的表达载体转化...
- 明凤王敬文沈大稜
- 文献传递
- 蚊龄对斯氏按蚊感染伯氏疟原虫能力的影响被引量：2
- 2016年
- 目的 研究不同日龄斯氏按蚊（Anopheles stephensi）传播伯氏疟原虫（Plasmodium berghei）能力的变化以及可能机制。 方法 选取4日龄和25日龄雌性斯氏按蚊，用原虫血疟为4%～8%的伯氏疟原虫感染BALB/c小鼠饲喂蚊虫，感染后8 d解剖蚊虫肠道，镜检计数蚊虫肠道中疟原虫卵囊数，比较4日龄和25日龄蚊虫对疟原虫易感性的变化。选取感染前4日龄和25日龄雌性斯氏按蚊，采用LB平板培养法检测其体内可培养共生菌的量，用实时定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）方法检测其体内的共生菌总量。选取感染前4日龄和25日龄雌性斯氏按蚊，采用qPCR检测其体内天蚕抗菌肽1（cecropin，CEC1）、CEC3、防御素（defensin，DEF；gambicin，GAM）、攻击素（attacin，ATT）以及一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）、双氧化酶（dual oxidase，DUOX）和含硫酯蛋白1（thioester protein 1，TEP1）等主要免疫效应因子的表达水平。 结果 感染伯氏疟原虫后8 d，4日龄斯氏按蚊中肠道疟原虫卵囊中位数是139，25日龄按蚊卵囊数中位数是3，4日龄按蚊伯氏疟原虫的感染密度是25日龄的46倍（P〈0.01）。qPCR结果显示，25日龄蚊虫体内共生菌总量为4日龄蚊虫的1.5倍，差异有统计学意义（P〈0.05 ）；LB平板培养法结果显示，25日龄肠道可培养共生菌平均为28 889个菌落形成单位（colony forming units，cfu），是4日龄（3 200 cfu）的9倍，差异有统计学意义（P〈0.01）。25日龄斯氏按蚊体内NOS基因表达量是4日龄的2.4倍（P〈0.01），抗菌肽ATT、DEF、CEC3、CEC1的表达量分别为4日龄的27%、48%、14%、61%，差异均有统计学意义（P〈0.05）；4日龄与25日龄斯氏按蚊体内GAM、DUOX、TEP1的表达量均未发生显著变化。 结论 随斯氏按蚊日龄增加，斯氏按蚊抗菌肽水平发生显著下调，体内共生菌增多，NOS表达量上调，按蚊抵抗疟原虫的能�
- 宋秀梅王敬文
- 关键词：年龄免疫反应共生菌伯氏疟原虫
- 斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白S2调节共生菌稳态的功能分析
- 2023年
- 目的研究斯氏按蚊肽聚糖识别蛋白S2(PGRP‑S2)的功能及其对按蚊体内共生菌稳态的影响。方法将羽化后2~4日龄雌性斯氏按蚊分为对照组(喂食10%蔗糖溶液)、感染血组(叮咬原虫血症为4%~8%的伯氏疟原虫ANKA感染小鼠)和健康血组(叮咬健康小鼠),每组60只,饱血24 h后分离中肠和其余组织,用Trizol法提取RNA,实时荧光定量PCR(RT‑qPCR)检测pgrp⁃s2基因的相对转录水平。将羽化后0~1日龄雌性斯氏按蚊分为对照组(喂食10%蔗糖溶液)与抗生素处理组(喂食含有青霉素、链霉素和庆大霉素的10%蔗糖溶液),每组30只,喂养5 d后分离中肠和其余组织,RT‑qPCR检测pgrp⁃s2基因的相对转录水平。将雌性斯氏按蚊分为pgrp⁃s2敲低组和绿色荧光蛋白基因(gfp)对照组,每组60只,分别注射pgrp⁃s2的双链RNA(dsRNA)和gfp基因dsRNA(69 nl/只),2 d后每组取蚊虫提取RNA,RT‑qPCR检测pgrp⁃s2的相对转录水平,提取DNA并使用16S rRNA特异性引物PCR检测蚊虫体内共生菌总量。分别取30只pgrp⁃s2敲低组和gfp对照组按蚊,用107个/ml摩氏摩根氏菌液浸湿棉球喂养5 d后,提取RNA,RT‑qPCR检测获得共生菌16S rRNA相对总量和摩氏摩根氏菌的相对数量;提取pgrp⁃s2敲低组和gfp对照组按蚊中肠组织RNA,转录组测序后进行聚类分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能注释和富集分析。使用SMART网站预测分析PGRP‑S2氨基酸序列后利用CLC Main Workbench软件进行比对。克隆按蚊pgrp⁃s2基因,利用昆虫杆状病毒表达系统(pFastbacⅠ)在SF9细胞中表达PGRP‑S2重组蛋白,Western blotting检测蛋白表达情况。取10、20、40μg/ml纯化后的PGRP‑S2重组蛋白溶液(以蛋白缓冲液为对照)分别与40μg赖氨酸(Lys)型肽聚糖和二氨基庚氨酸(DAP)型肽聚糖孵育,每间隔12 h测定相对吸光度(A540值)以判定肽聚糖的降解情况,验证PGRP‑S2的酰胺酶活性。结果RT‑qPCR结果显示,吸血后24 h,感染血组�
- 王之谦王敬文宋秀梅
- 关键词：斯氏按蚊共生菌真核表达
- 检测锥虫属原虫的特异性引物及检测方法和应用
- 本发明公开一组检测锥虫属原虫的特异性引物，其序列为：上游引物为：5’‑CCTGATGAAAGGTGCAATG(SEQ ID NO:1)或其互补序列；下游引物为：5’‑CGTTTTCGCCTTCTTGTGGA(SEQ ID...
- 胡薇殷明波刘骁洪清华王韵丞张瑞祥李健李鸿雁陈木新蔡玉春徐斌刘秀凤陈家旭王敬文
- 文献传递
