王加峰
- 作品数：65 被引量：90H指数：5
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记
- 本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记。所述的鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记，与野生型位点检测相关的标记Cas-tgw6-1的核苷酸序列SEQ？ID...
- 王加峰郭涛罗文龙周丹华陈志强王慧
- 文献传递
- 基于CRISPR/Cas9技术的水稻千粒重基因tgw6突变体的创建被引量：31
- 2016年
- 利用CRISPR/Cas9技术对调控水稻产量千粒重基因TGW6定点编辑,获得了一套有重要育种价值的tgw6突变体。设计了分别由U3、U6a和U6b启动子驱动、长20 bp的guide RNA(g RNA)靶点以靶向编辑TGW6基因的外显子,首先将这3个靶点一起组装到p YLCRISPR/Cas9-MT(I)载体上,然后利用农杆菌介导侵染水稻材料H447(R819/玉针香//R819的BC3F6);提取T0代转基因植株的基因组DNA并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析。结果表明,T0代材料中tgw6的突变频率高达90%,其中纯合缺失突变率约占51%。对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明,部分tgw6的缺失突变能显著提高千粒重(大于5%)。不同类型tgw6突变体的成功创建不仅丰富了tgw6的变异类型,为水稻的高产稳产奠定了重要的材料基础,还证实了CRISPR/Cas9技术在水稻基因工程育种中高效、易操作的特点。
- 王加峰郑才敏刘维罗文龙王慧陈志强郭涛
- 关键词：水稻千粒重
- 水稻单倍体诱导基因Os MATL突变体的创制与分析被引量：4
- 2021年
- MTL基因是玉米中控制单倍体诱导性状的关键基因,该基因在作物中的功能高度保守。OsMATL是MTL在水稻中的同源基因,已有研究证实该基因的突变可以诱导水稻单倍体产生,但不同遗传背景下,OsMATL基因的突变效应有待明确。本研究以日本晴(粳稻)和华航48(籼稻)为材料,利用CRISPR/Cas9技术对OsMATL基因启动子区和编码区的不同位点进行编辑,成功获得OsMATL基因不同遗传背景系列突变体。分析了不同突变位点对结实率的影响,发现OsMATL基因编码区突变后结实率为2%~15%,且存在不同类型的败育籽粒,而启动子区域的大片段缺失对结实率没有显著影响;此外,籼稻背景突变体的结实率高于粳稻突变体。本研究创制的不同类型OsMATL突变体为进一步研究水稻孤雌生殖单倍体诱导的机制提供了基础材料。
- 文钦贾思思王加峰黄翠红王慧陈志强郭涛
- 关键词：水稻突变体
- 水稻多胺氧化酶基因(OsPAO4)CRISPR/Cas9编辑突变体的创制
- 2023年
- 【目的】稻瘟病是水稻生产上的重要限制因素,挖掘与利用抗病基因是实现水稻高产稳产的重要保障。前期研究发现,稻瘟病抗性相关osa-miR-21可能通过靶向调控多胺氧化酶基因OsPAO4调节水稻稻瘟病抗性,但目前多胺氧化酶(Polyamine oxidases,PAOs)在水稻抗病中的功能研究尚未见报道。为进一步探究其在水稻抗病中的可能生物学功能,本研究利用CRISPR/Cas9编辑技术对水稻OsPAO4基因进行定点编辑并对其后代突变体进行分析。【方法】在OsPAO4第2外显子处设计了1个20 bp的编辑靶点,将靶点核苷酸片段克隆至pRGEB32载体,获得OsPAO4编辑载体。随后,利用农杆菌介导法转化水稻Pik-H4 NIL愈伤组织中,经过再生培养、潮霉素检测获得转基因阳性植株,并对T_(0)代植株靶位点附近DNA序列进行PCR和测序分析。【结果】OsPAO4基因被成功编辑,最终获得25个转基因阳性植株,并在T_(0)代产生多种突变类型:3株纯合突变、18株杂合突变和4株未发生编辑的植株。此外,T_(0)代杂合突变ospao4-8的颖壳颜色由紫色变为深灰色,且ospao4突变体中过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性有所升高,推测OsPAO4可能参与水稻的基础免疫过程。【结论】创制了多种类型ospao4突变体材料,初步确定OsPAO4可能参与水稻免疫过程的调控,为进一步深入揭示OsPAO4基因的具体生物学功能和分子调控机制奠定了重要基础。
- 林春姿黄其伟侯艳高上韩志开韦淡虹陈淳王加峰
- 关键词：水稻多胺氧化酶
- 稻瘟病主效抗性基因Pik-H4互作蛋白研究
- 稻瘟病是水稻生产上危害最严重的病害之一,该病主要由稻瘟病菌菌(Magnaporthe grisea)侵染引起,我国每年的发病面积约380万hm2,该病已成为我国水稻高产稳产的限制因素.目前针对该病的抗性基因在水稻中多编码...
- 刘浩王加峰孙大元王慧陈志强
- 关键词：稻瘟病酵母双杂交
- VIGS介导的转复制酶基因番木瓜对PRSV的抗性被引量：6
- 2009年
- 将PCR检测呈阳性的T4代转复制酶(replicase,Rep)基因番木瓜植株在苗期接种番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)Ys株系,定期采取不同部位的叶片进行Northern blot分析。结果表明:接种PRSV之前,在植株的各部位均能检测到转基因完整的Rep mRNA,但接种后不同时间在接种叶以上部位陆续出现了Rep mRNA的降解;接种后30 d内,接种叶下部第1片叶上始终未出现Rep mRNA的降解;另外,在发生mRNA降解的叶片上都能相继检测到小分子干涉RNA(short interferring RNA,si RNA)的产生。这说明转基因番木瓜的抗病性与mRNA的降解及siRNA的积累有着密切的关系。这种抗性发生在转录后水平上,是由病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)介导产生的。
- 阮小蕾王加峰李华平
- 关键词：番木瓜环斑病毒抗病机制
- 一种研究水稻与病原物互作模式的方法
- 本发明公开了一种研究水稻与病原物互作模式的方法，属于植物生物技术领域。本发明综合应用转录组、蛋白质组及miRNA组研究水稻响应病原物侵染的互作模式的方法，其具体步骤包括：A.别取接种病原物前后不同时间点的抗病材料及感病材...
- 王加峰杨瑰丽孙大元黄翠红陈志强王慧
- 文献传递
- 基因LOC_Os06g02960在提高水稻细菌性条斑病抗性中的应用
- 本发明公开了基因LOC_Os06g02960在提高水稻细菌性条斑病抗性中的应用，属于植物基因工程技术领域。该基因在感病单倍型材料中受水稻细菌性条斑病病原菌诱导后表达量降低。在敲除该基因后能提高水稻细菌性条斑病抗性。将LO...
- 王加峰谢华斌韩志开林春姿郭涛陈淳周丹华刘永柱王慧
- 一种增强稻瘟病抗性的miRNA的克隆与应用
- 本发明公开了一种增强稻瘟病抗性的miRNA的克隆与应用，属于植物基因工程技术领域。本发明miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明发明人鉴定并证实了miRNA‑T34可以通过抑制LOC_Os02g3941...
- 王加峰侯艳郭涛陈淳杨瑰丽肖武名黄翠红王慧陈志强
- 文献传递
- 一种稻瘟病抗性相关的miRNA及其应用
- 本发明公开了一种稻瘟病抗性相关的miRNA，具有如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列。该miRNA的表达量与调控水稻抗稻瘟病基因Pik2‑H4的表达量呈负相关，能够通过抑制该miRNA的表达构建抗稻瘟病的水稻高抗新品种。
- 王加峰董双玉孙大元张景欣陈志强王慧
