王其
- 作品数：25 被引量：152H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乳腺癌耐药蛋白在肝癌多药耐药中的作用及其机制探讨被引量：6
- 2006年
- 目的研究乳腺癌耐药蛋白(breastcancer resistance protein,BCRP)在肝癌中的表达及其意义。方法通过培养液中ADM浓度递增诱导法筛选培养,建立HepG2/ADM肝癌多药耐药细胞株;采用荧光定量PCR及免疫组织化学技术,分别在mRNA和蛋白质水平检测BCRP在正常肝细胞系L02、肝癌细胞系HepG2及HepG2/ADM与未经化疗的癌组织、多次化疗后的癌组织、癌旁组织的表达差异。结果HepG2/ADM的BCRPmRNA表达是HepG2的9倍(P<0.01);L02和HepG2中BCRPmRNA的表达无差异(P>0.05);化疗后病人癌组织BCRPmRNA平均表达是未化疗病人癌组织的4.2倍(P<0.01);化疗病人癌组织BCRPmRNA平均表达是癌旁组织的3.4倍(P<0.01);未化疗病人癌和癌旁组织间的表达无差异(P>0.05);免疫组织化学显示BCRP在胞膜表达;BCRPmRNA和蛋白表达具有一致性。结论HepG2/ADM多药耐药细胞株是一个较好的研究肝癌多药耐药的模型。BCRP基因在正常肝细胞中表达,而在多次化疗后的病人和HepG2/ADM中表达上调,提示化疗药物诱导BCRP的表达,BCRP的高表达与肝癌多药耐药有关。
- 李高鹏陈孝平叶露王其徐宗全张万广
- 关键词：肝肿瘤抗药性多药免疫组织化学
- Tet-on基因表达系统反应质粒P^(TRE-HIF-1α)的构建和表达鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α。方法以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板,进行RT-巢式PCR,获得HIF-1α的cDNA,克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE2hyg,酶切重组子鉴定。将构建好的PTRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2Tet-on细胞,在强力霉素的作用下,用RT-PCR及Westernblot法鉴定重组质粒的表达。结果扩增出HIF-1α的cDNA测序结果与Genbank记载完全一致,并成功克隆入PTRE2hyg,将反应质粒PTRE-HIF-1α转入HepG2Tet-on细胞,可以完整有效表达HIF-1α且受强力霉素的调控。结论成功克隆和构建携带HIF-1α基因的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α,并证明其表达能在HepG2Tet-on细胞中受强力霉素调控。
- 徐宗全陈孝平张万广王其关剑李高鹏
- 关键词：低氧诱导因子-1Α巢式PCR克隆
- 环氧合酶-2和血管内皮生长因子共表达与肝细胞癌血管形成的关系被引量：17
- 2004年
- 目的 探讨环氧合酶 (COX) 2与肝细胞癌血管形成的关系。方法 利用免疫组织化学、Westernblot方法检测 48例肝癌组织中COX 2和血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白及逆转录 聚合酶链反应法 (RT PCR)检测COX 2和VEGFmRNA的共表达 ,对共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织进行微血管记数。结果 免疫组织化学检测中 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2和VEGF蛋白。类似结果见于蛋白电泳分析。RT PCR显示 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2mRNA和VEGFmRNA。两者之间的表达明显相关 (γ =0 .845 )。共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织中 ,平均微血管数 (5 6.8± 17.5 )个 ,明显高于阴性表达组。结论 COX 2可能与肝细胞癌的血管形成有关 。
- 张必翔陈孝平余红平张万广朱虹罗顺峰王其吴在德裘法祖
- 关键词：环氧合酶-2肝细胞癌血管形成
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肝癌耐药细胞株阿霉素化疗敏感性的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合阿霉素(ADM)处理肝癌耐药细胞株HepG2/ADM对化疗敏感性的影响。 方法 通过培养液中ADM的浓度梯度增加法长期筛选培养,建立肝癌HepG2/ADM耐药细胞株,荧光定量PCR检测多药耐药(MDR)1的表达,TRAIL联合化疗药物ADM处理HePG2/ADM,MTT比色法检测细胞增殖,细胞凋亡采用流式细胞仪和TUNEL法检测观察HepG2/ADM对化疗药物的敏感性变化。 结果 HepG2/ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型,联合TRAIL(100ng/L)+ADM(0.1 mg/L)后,MTT显示HepG2/ADM细胞的增殖明显抑制,流式细胞术、TUNEL法检测TRAIL联合ADM处理HepG2/ADM 细胞诱导的凋亡,与对照组相比,凋亡指数显著增加。 结论MDRI不参与TRAIL耐受。TRAIL可部分逆转HepG2/ADM对ADM的耐药,增加其对化疗药物的敏感性。联合TRAIL和亚毒剂量化疗药物可望克服肿瘤细胞中存在的化疗耐药和TRAIL耐受。
- 何松青陈孝平张万广王海平王其
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体肝癌耐药细胞阿霉素化疗敏感性
- Survivin在NF-κB圈套寡核苷酸促进肝癌细胞HepG2凋亡中的作用被引量：1
- 2007年
- 目的观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用。方法将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位观察,凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染前后NF-κB活性变化;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白Survivin的改变。结果NF-κB圈套寡核苷酸转染后定位于细胞核内,EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降。与未处理组、转染错义组相比,转染NF-κB圈套寡核苷酸组的HepG2细胞凋亡率增加,Survivin蛋白表达下调[(39.8±1.9)、(42.7±2.5)vs(20.1±3.1)]。结论NF-κB圈套寡核苷酸具有促进肝癌细胞HepG2凋亡的作用,其机制可能与下调Survivin的表达有关。
- 张万广杨盛力李哲夫张峰徐宗全王其张志伟
- 关键词：核转录因子-ΚB圈套寡核苷酸SURVIVIN
- 原发性肝癌合并门静脉高压症病人行联合肝脾切除与单纯肝切除的回顾性研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨脾切除在合并轻中度乙型病毒性肝炎（简称乙肝）后肝硬化性门静脉高压症的原发性肝癌病人中的作用。方法选取2002--2008年间符合下列条件的171例合并乙肝肝硬化性门静脉高压症的原发性肝癌病人进行回顾性对照研究：①术前血小板计数在50×109／L～80×109／L之间，白细胞计数〉2．0×10 9／L；②无食管静脉曲张或曲张程度≤F2；③肿瘤病灶经术前评估可切除。按是否接受同时性脾切除将病例分为联合肝脾切除组（SPH）及单纯肝切除组（HA），前者57例，后者114例。结果两组病例在围手术期临床资料等方面差异无统计学意义（P〉0．05）。脾切除对肝功能有短期改善作用，长期则无影响；对无瘤生存率（HA26．3％、SPH35．1％）及总生存率（51．8％与54．4％）无明显影响（P〉0．05）。严重并发症发生率联合肝脾切除组病人（22．8%）较单纯肝切除组（7．9%）高（P〈0．01）。结论对于合并轻中度乙肝肝硬化性门静脉高压症的原发性肝癌病人，脾切除并无必要性，应慎行之。
- 罗鸿萍王其张必翔
- 关键词：肝肿瘤脾切除术
- 改良联合断流术治疗食管胃底曲张静脉破裂出血被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨改良联合断流术治疗食管胃底曲张静脉出血的疗效.方法 回顾性分析1999年1月至2009年1月间施行62例改良联合断流术治疗食管胃底曲张静脉出血患者的疗效.结果 本组62例患者的围手术期死亡率为2％（1/62）,食管吻合口漏发生率为2％（1/62）,吻合口狭窄发生率为5％（3/62）.术后12个月复查,食管曲张静脉消失率为79％（48/61）,改善率为18％（11/61）,有3％（2/61）的患者食管曲张静脉无变化;胃底曲张静脉消失率为98％ （60/61）,改善率为2％（1/62）.术后3年和5年食管胃底曲张静脉再出血率分别为3％ （2/61）和8％（5/61）.结论 改良联合断流术是治疗食管胃底曲张静脉出血安全有效的方法.
- 王其刘飞龙张志伟梅斌
- 关键词：食管和胃静脉曲张断流术
- TRAIL联合阿霉素诱导肝癌耐药株凋亡的实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)及TRAIL和阿霉素(ADM)联用对肝癌耐药株诱导凋亡的作用。方法通过浓度递增法用阿霉素处理人肝癌细胞株HepG2获得肝癌耐药株HepG2/ADM。并通过MTT方法鉴定耐药株的耐药性。构建可溶型TRAIL真核表达质粒真核表达质粒pIRES-EGFP-TRAIL。通过脂质体(Lipofectamine)2000介导转染质粒入HepG2/ADM。通过RT-PCR和Westernblot证实转染的HepG2/ADM有sTRAIL的mRNA和蛋白的表达后,用MTT方法和AnnexinVFITCPI染色流式细胞仪检测单纯TRAIL处理和联合阿霉素处理HepG2/ADM的生长抑制率和凋亡率。并用共聚焦显微镜观察处理后细胞凋亡的形态。结果肝癌耐药株筛选成功,sTRAIL质粒构建、转染成功。用MTT测HepG2/ADM抑制率阿霉素处理组40.9%;TRAIL处理组29%;合用组58.4%;联合后抑制率有显著差异。凋亡检测为阿霉素处理组18.37%;TRAIL处理组14.8%;合用组52.71%。但TRAIL处理HepG28.9%和HepG2/ADM8.54%的凋亡率无显著差异。结论TRAIL联合阿霉素能明显增加HepG2/ADM的凋亡从而逆转耐药。同时单纯TRAIL治疗对耐药株作用与亲代细胞作用相仿,说明TRAIL可能有另外的诱发凋亡的途径,受HepG2/ADM耐药性的影响小。
- 赵旭陈孝平何松青王其朱虹关键丁磊
- 关键词：肿瘤耐药性凋亡阿霉素
- 核转录因子-κB对肝癌细胞Hep3B COX-2表达的调节被引量：3
- 2004年
- 目的探讨核转录因子(NF)κB对肝细胞癌细胞Hep3B中COX2表达的调控作用。方法以体外合成的NFκB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)处理Hep3B细胞72h,利用Westernblot方法检测ASODN处理的Hep3B细胞p50和COX2蛋白表达水平。利用电泳凝胶迁移法测定经ASODN处理的Hep3B细胞核内NFκB水平。对照组为p50正义寡聚脱氧核苷酸(SODN)和未经处理的Hep3B细胞。结果(1)Westernblot分析显示,与以SODN处理和对照组的Hep3B细胞相比,以ASODN处理的Hep3B细胞其NFκB亚单位p50蛋白的水平明显降低,Hep3B细胞核抽提物NFκB水平也相应减低。(2)以ASODN处理的Hep3B细胞其COX2蛋白水平低于以SODN处理的Hep3B细胞和对照组细胞。结论在肝细胞癌细胞Hep3B中,NFκB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)可抑制NFκB活性,导致COX2的表达下调。由此反过来推测,活化的NFκB对COX2具有激活和诱导作用,提示COX2在肝细胞中作用与NFκB通道有关,在肝细胞癌的形成和以NSAIDs预防性或治疗性用于肝细胞癌时,NFκB有了新的作用。
- 张必翔陈孝平张万广余红平朱虹罗顺峰王其吴在德裘法祖
- 关键词：核转录因子-ΚB肝癌细胞
- 脂质过氧化物酶体增殖物激活受体α在人肝癌多药耐药中的作用被引量：4
- 2006年
- 目的研究脂质过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor α,PPARα)在人肝癌多药耐药中的作用机制。方法利用透射电镜观察人肝癌多药耐药 (multidrug resistance,MDR)细胞HepG2／ADM及其亲本细胞HepG2的超微结构;荧光定量PCR技术检测PPARα mRNA在两种细胞系中的表达水平;免疫印记法检测PPARα蛋白的在两种细胞中的表达情况。结果人肝癌多药耐药细胞与其亲本细胞相比,耐药细胞的核膜上绒毛样突起增多,胞浆内有大量空泡,粗面内质网增多;HepG2／ADM细胞的PPARα mRNA表达和蛋白表达均有下降。结论PPARα与HepG2／ADM细胞的MDR现象有关,PPARα表达下调可能是肿瘤细胞MDR形成的机制之一。
- 王其陈孝平关剑张万广张必翔
- 关键词：多药耐药
