王元国
- 作品数：21 被引量：9H指数：1
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人食管鳞癌细胞株中RIZ1基因启动子区甲基化状态的研究
- 2012年
- 目的:探讨6种人食管鳞癌细胞株KYSE150,KYSE510,TE13,EC9706,CaEs17和EC109中RIZ1基因启动子区的甲基化状态;观察特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR对存在甲基化的细胞株RIZ1基因的转录调控作用及其对该细胞生长增殖的影响。方法:甲基化特异PCR(MSP)法检测6种人食管鳞癌细胞株中RIZ1基因启动子区的甲基化状态;实时定量PCR法检测5-Aza-CdR处理前后RIZ1基因启动子区CpG岛高度甲基化的人食管鳞癌细胞株TE13中RIZ1 mRNA表达量的变化;MTT法检测5-Aza-CdR对TE13细胞生长增殖的影响。结果:(1)6种人食管鳞癌细胞株中TE13,CaEs17,EC109三株细胞RIZ1基因启动子区存在甲基化;(2)5-Aza-CdR处理细胞株TE13后,RIZ1 mRNA表达量上调;(3)5-Aza-CdR能抑制TE13的生长增殖,并随时间的延长和浓度的增加抑制作用变明显。结论:启动子区CpG岛高度甲基化是人食管鳞癌细胞株TE13 RIZ1基因表达沉默的重要原因;5-Aza-CdR能使TE13 RIZ1 mRNA表达上调;并能抑制TE13细胞的生长增殖,并呈时间和浓度依赖性。
- 崔元涛张鹏梁冬春董尚文王元国吕杨钟荣荣
- 关键词：启动子甲基化甲基化特异性聚合酶链反应
- PR结构域真核表达载体的构建
- 2012年
- 目的:构建能够稳定克隆、表达RIZ1基因中PR结构域的真核表达载体。方法:首先用RT-PCR方法从人食管组织中提取mRNA,逆转录为cDNA,利用cDNA模版扩增出PR结构域,连入T载体。然后提取PR结构域及pcDNA3.1(+)质粒,酶切后连接,转入Trans-T感受态细胞中。结果:提取pcDNA3.1/PR结构域质粒,琼脂糖凝胶电泳,可见大于5 000 bp的目的条带,与预测结果一致,测序结果正确。结论:构建PR结构域真核表达载体成功,为进一步实验研究PR结构域在食管癌细胞中的表达与功能奠定了基础。
- 陈渊张鹏王元国
- 关键词：食管癌RIZ1真核表达载体
- 上调视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1后食管癌细胞基因表达谱的变化
- 2013年
- 目的 观察转染视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1（RIZ1）后,食管鳞状细胞癌TE13细胞株基因表达谱的改变.方法 培养TE13细胞株,1∶10传代后培养至对数生长期,脂质体法分别转染pcDNA3.1（＋）和pcDNA3.1（＋）/RIZ1真核表达载体,转染成功后,应用Agilent人类全基因表达谱基因芯片筛选转染前后的差异基因（差异倍数≥2.0或≤0.5）,用聚合酶链反应（PCR）验证结果和对差异基因功能分析.结果 差异基因总共有2123个,其中上调960个,下调1163个,功能主要集中在细胞发育、病毒复制的监管等.RIZ1基因可能参与包括细胞因子受体互相作用等多种信号通路.结论 RIZ1基因通过多种途径发挥作用,为进一步研究RIZ1基因与食管癌间的关系提供了依据.
- 李栋张鹏董尚文王元国陈渊徐聪
- 关键词：食管鳞状细胞癌基因芯片
- 胸腺瘤并发重症肌无力患者免疫调节因子的表达被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨胸腺瘤合并重症肌无力（myasthenia gravis,MG）患者肿瘤组织及血液中Aire、Foxp3、AchR及血液相关免疫学因子的表达及其在胸腺瘤伴发MG发病中的重要意义.方法 分别采用RT-PCR及SP免疫组化方法检测胸腺瘤伴发MG胸腺瘤组织中Aire、Foxp3、AchR mRNA及蛋白的表达,比较外周血T细胞亚群及免疫球蛋白等免疫学指标并结合临床特征进行统计学分析.结果 Aire、Foxp3、AchR mRNA及蛋白在合并重症肌无力患者胸腺瘤组织中表达降低,在Ossermann分型、病理类型、Masaoka分期之间差别有统计学意义（P＜0.05）,CD4^ ＋/CD8^＋T细胞比值在胸腺瘤合并重症肌无力患者血清中增高（P＜0.05）.结论 Aire、Foxp3、AchR的异常表达在胸腺瘤伴发MG中发挥重要作用,CD4 ^＋/CD8^＋T细胞比值、免疫球蛋白和补体C3的水平可作为评价胸腺瘤患者免疫状态的关键指标,具有重要的临床意义.
- 张晖张鹏刘毅梅陈渊李新吕朋王元国
- 关键词：胸腺瘤重症肌无力自身免疫调节因子乙酰胆碱受体
- GTF2i基因在胸腺瘤中的研究进展
- 2022年
- GTF2i是一类结合到DNA上特定位点以激活转录的蛋白质转录因子,在人类细胞中广泛表达,定位于细胞的细胞质,并在转录时转移到细胞核.随着对GTF2i研究的深入,发现其突变与胸腺瘤的发生、预后密切相关.GTF2i突变在不同病理类型的胸腺瘤中具有不同的发生频率,在A及AB型胸腺瘤中其突变频率达到80%以上,而在胸腺癌中其突变频率不足10%,突变的发生预示肿瘤的惰性和较好的临床预后.此文主要阐述了GTF2i的结构、功能和相关疾病,并对GTF2i在胸腺瘤中的研究进展予以综述.
- 王元国张鹏
- 关键词：胸腺瘤靶向治疗
- 视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因RIZ1／RIZ2表达失衡调控食管鳞癌细胞凋亡的研究
- 2017年
- 目的探讨在食管鳞癌中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因（RIZl／RIZ2）表达失衡对食管鳞癌细胞凋亡的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）的方法检测食管鳞癌组织及正常食管上皮组织中RIZl及RIZl＋RIZ2mRNA表达水平，选取前期实验中RIZl基因表达缺失的食管鳞癌细胞株ECl09，采用脂质体转染的方法实验组转染pcDNA3．1（＋）／RIZl，对照组转染空真核表达载体pcDNA3．1（＋），Real—timePCR、Westernblot分别检测RIZlmRNA及蛋白表达水平，验证转染效率，转染成功后Real—timePCR法检测RIZl＋RIZ2mRNA表达水平的变化，同时采用流式细胞仪检测食管鳞癌细胞的凋亡。结果食管鳞癌组织中RIZlmRNA表达水平低于正常食管上皮组织，相对表达量分别为1．00和28．10±2．30，差异有统计学意义（t=一57．758，P=0．ooo），而两者间RIZl＋RIZ2mRNA表达水平分别为1．00和1．08±0．31，差异无统计学意义（t=一1．180，P=0．249），食管鳞癌细胞株ECl09转染RIZl成功后，与对照组比较，RIZl基因mRNA表达水平上调，相对表达量分别为10．83±1．94和1．00，差异有统计学意义（t：一11．308，P=0．000），RIZl＋RIZ2mRNA的表达水平未见变化，相对表达量分别为0．98±0．08和1．00，差异无统计学意义（t=0．581，P=0．592），转染RIZl后食管鳞癌细胞株ECl09凋亡率升高，细胞凋亡率分别为（54．97±2．33）％和（38．29±8．44）％，差异有统计学意义（t=一4．560，P=0．010）。结论食管鳞癌中存在RIZl／RIZ2的表达失衡，这种表达失衡有可能引发细胞凋亡，参与食管鳞癌的发生、发展。
- 崔元涛董尚文王元国张鹏
- 关键词：食管癌
- 下调Wnt4、叉头框基因家族蛋白n1基因后胸腺瘤Thy0517细胞差异基因表达研究被引量：1
- 2018年
- 叉头框基因家族蛋白n1（FoxNl）是胸腺上皮细胞特异性转录因子，被证明是Wnt4的靶基因。我们前期证实胸腺瘤中存在Wnt4及FoxNl的高表达，是否也有类似的调控关系尚不清楚。
- 路超张鹏陈渊王元国
- 关键词：差异基因表达胸腺上皮细胞家族蛋白特异性转录因子
- 基于SSP1和TGFB1与食管腺癌发生、预后和免疫浸润关系的生物信息学分析
- 2024年
- 目的:分析基因表达综合(GEO)数据库和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中食管腺癌(EAC)基因表达数据,阐明EAC发病的潜在核心基因与肿瘤淋巴细胞浸润的关系,为EAC的诊断和治疗提供分子靶标。方法:在GEO数据库检索“esophageal adenocarcinoma”,下载包括EAC和食管正常组织的高通量芯片数据集GSE13898、GSE26886、GSE74553和GSE92396。采用R软件的limma包筛选EAC组织和食管正常组织的差异表达基因(DEGs),并通过韦恩图获取共同DEGs,采用STRING数据库分析后导入Cytoscape软件筛选核心基因并构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,采用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库验证核心基因表达水平,采用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析门户(UALCAN)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析核心基因与EAC患者预后和临床资料的关联性,采用肿瘤免疫评价资源(TIMER)数据库分析核心基因与肿瘤免疫浸润的关系,采用基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)对LinkedOmics数据库获得的核心基因中正相关表达基因进行功能和信号通路富集分析。结果:对GEO获得的4个数据集的DEGs取交集,共获得340个DEGs,其中上调基因127个,下调基因213个。经STRING数据库和Cytoscape软件筛选后,最终获得评分最高的关键核心基因分泌型磷蛋白1(SPP1)和转化生长因子β1(TGFB1)。GEPIA数据库分析,与食管正常组织比较,癌组织中SPP1和TGFB1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);SPP1低表达组EAC患者1、3和5年总体生存期均高于SPP1高表达组(HR=10.1,P<0.05;HR=3.09,P<0.05;HR=2.32,P<0.05),TGFB1低表达组EAC患者5年总体生存期高于TGFB1高表达组(HR=2.36,P<0.05)。UALCAN数据库分析,与食管正常组织比较,Ⅱ-Ⅲ期及N1-N2期淋巴结转移的EAC患者癌组织中SPP1和TGFB1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。TIMER分析,SPP1和TGFB1 mRNA表达水平与EAC患者癌组织中巨噬细胞(r=0.353,P<0.01;r=0.187,P<0.05)和树突状细胞(r=0.236
- 王元国张鹏
- 关键词：食管腺癌生物信息学预后
- 视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1真核表达质粒对人食管癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用被引量：1
- 2013年
- 食管癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病和死亡平均水平位于恶性肿瘤前列。目前，食管癌的治疗主要以手术切除、化疗为主，但这些治疗手段不能明显改善患者5年生存率，因此寻求新的食管癌的治疗方法尤为重要。近年来肿瘤的基因治疗成为人们关注的焦点，有关研究认为，视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1（RIZ1）其正常表达可导致细胞生长阻滞并诱导细胞凋亡，发挥抑癌基因的作用。我们通过建立人食管癌TE13细胞裸鼠移植瘤模型，采用瘤体内直接注射RIZ1真核表达质粒的方法，观察抑癌基因RIZ1对人食管癌细胞TE13裸鼠移植瘤生长的影响。
- 徐聪张鹏董尚文王元国李栋郭峰孙蓓
- 关键词：视网膜母细胞瘤真核表达质粒裸鼠移植瘤人食管癌结构基因蛋白结合
- 低压低氧动物模型舱的压力容器舱设计
- 2022年
- 目的:研制一种低压低氧动物模型舱的压力容器舱,以满足高原缺氧动物实验对压力水平维持的要求。方法:该压力容器舱由金属封头、可视观察管体、密封门、嵌套式密封圈、自封闭式内法兰和递进式传感器密封装置等组成。其中可视观察管体和管体两端的金属封头通过自封闭式内法兰进行密闭连接,密封门与舱门外壳通过嵌套式密封圈密封,递进式传感器密封装置可实现双层密封的效果。通过压力容器舱真空度验证和低压低氧动物实验分别验证压力容器舱的密闭性能和用于动物实验的效果。结果:该压力容器舱可以稳定维持11.5 kPa真空度,能够模拟15000 m极限海拔,而且能稳定运行30 d;低压低氧动物实验结束后实验动物有明显的肺损伤。结论:该压力容器舱可以长时间稳定模拟高海拔环境,能够用于高原缺氧动物模型的制备。
- 李仕聪于尧王建垚王元国张金霞张鹏
