潘颖 作品数:24 被引量:88 H指数:5 供职机构: 安徽医科大学第二附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省教育厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
LPS通过上调Toll样受体2和4表达增强IFN-α抗病毒效应的研究 被引量:2 2014年 目的探讨细菌脂多糖(LPS)对Toll样受体2和4(TLR2和TLR4)表达的影响及其在α-干扰素(IFN-α)抗病毒效应中可能发挥的作用及相关机制。方法以1 000 IU/ml IFN-α和5 mg/L LPS单独及联合作用于HepG2细胞24 h后,运用RT-PCR和Western blot法分析作用前后细胞表面TLR2、TLR4和IFN-αJAK-STAT途径分子STAT1、STAT2、IRF9表达情况,并进一步分析IFN-α诱导的MyD88、MxA、2'-5'寡腺苷合成酶(2'-5'OAS)、双链RNA依赖性蛋白激酶(PKR)抗病毒蛋白的表达。结果 RT-PCR结果显示,IFN-α作用于HepG2细胞24 h后,TLR2、TLR4和STAT1、STAT2、IRF9信号分子及MyD88、抗黏病毒A蛋白(MxA)、2'-5'寡腺苷合成酶(2'-5'OAS)、PKR抗病毒蛋白的表达上升,而单独LPS处理细胞24 h后,除TLR2、TLR4 mRNA显著升高外(P<0.05),其他分子的表达均无显著变化;联合处理组较IFN-α处理组除MyD88和MxA mRNA水平无显著变化,其他分子的表达均显著升高(P<0.05)。Western blot结果显示,与IFN-α处理组相比,联合处理组STAT1、STAT2蛋白表达显著增加(P<0.05),而MyD88蛋白表达无显著变化。结论LPS可能通过上调细胞表面TLR2、TLR4的表达而发挥增强IFN-α诱导的抗病毒蛋白的表达水平,从而参与IFN-α抗病毒效应。 王爱华 管世鹤 杨凯 潘颖 孙蓓蓓关键词:干扰素Α 细菌脂多糖 TOLL样受体 Src蛋白及其生物学特性的研究进展 被引量:9 2011年 Src家族激酶(SFKs)由9个成员组成,分别是:LYN、FYN、LCK、HCK、FGR、BLK、YRK、YES和c-Src。其中,Src蛋白是目前研究最多的成员,也是与人类疾病联系最为密切的蛋白。Src广泛存在于组织细胞中,通过与信号转导通路中重要分子的相互作用,参与细胞的代谢过程,调控细胞的生长、发育和分化等过程,同时也与一些疾病的发生有着密切的联系。 潘颖 管世鹤关键词:生物学特性 信号通路 乙型肝炎病毒X蛋白对SOCS3表达的影响及其机制 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus Xprotein,HBx)对肝胚瘤细胞株HepG_2表达信号抑制因子3(SOCS3)的影响及其机制。方法将表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染H... 管世鹤 潘颖 杨凯 吴园园阻断HepG2细胞中ERK信号转导途径对IFN诱导抗病毒蛋白的影响 被引量:1 2012年 目的探讨阻断细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导途径对α-干扰素(IFN-α)Janus激酶-信号转导和转录激活子(JAK-STAT)信号转导途径分子和抗病毒蛋白表达的影响。方法以人肝胚瘤细胞株HepG2细胞为研究对象,以单独IFN-α及IFN-α和ERK抑制剂PD98059联合处理细胞,分析阻断ERK途径对HepG2细胞IFN-α应答的变化。结果反转录PCR(RT-PCR)结果显示,HepG2细胞经处理后,细胞内抗病毒蛋白和JAK-STAT信号转导途径分子STATl、STAT2、IRF9 mRNA表达均增高,其中联合处理的表达升高更加明显。Western blot分析STAT1、STAT2结果与RT-PCR结果一致,另外,细胞经IFN处理后JAK-STAT信号转导途径抑制因子3(SOCS3)的表达升高,联合处理后,SOCS3表达减少。结论在体外细胞模型中,ERK信号转导途径可能通过调节SOCS3蛋白的表达而参与IFN-α抗病毒效应。 吴园园 管世鹤 杨凯 潘颖关键词:乙型肝炎病毒 Α干扰素 血清肿瘤标志物在肺癌辅助诊断中的应用 被引量:18 2017年 目的探讨血清肿瘤标志物在肺癌诊断中的临床价值。方法收集40例健康人、45例肺部良性疾病患者和90例肺癌患者,采用电化学发光分析检测患者血清中肿瘤标志物细胞角蛋白19(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)和癌胚抗原(CEA),以及胃泌素释放肽前体(pro-GRP)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的含量。结果健康人组和肺部良性疾病患者组血清NSE、pro-GRP、CYFRA21-1、SCC和CEA水平较肺癌患者组水平低,差异有统计学意义(P<0.01)。NSE和pro-GRP在小细胞肺癌患者中的水平均明显高于其他类型的肺癌患者(P<0.01),CYFRA21-1和SCC在鳞癌患者中的含量比其他类型肺癌患者高(P<0.01)。联合检测此5种血清肿瘤标志物敏感性高于单独的肿瘤标志物(P<0.01)。结论联合检测NSE、pro-GRP、CYFRA21-1、SCC和CEA可以提高肺癌诊断的灵敏度。 吴园园 管世鹤 杨凯 潘颖 陈礼文 王爱华 孙蓓蓓关键词:肿瘤标志物 肺癌 外周血血小板/淋巴细胞比值在非小细胞肺癌诊断中的价值 被引量:12 2016年 目的探讨外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)及血小板/淋巴细胞比值(PLR)在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中的价值。方法分析83例NSCLC患者和60例作为健康对照者的NLR、LMR、PLR,观察不同病理类型及TNM分期的NSCLC患者PLR差异,运用受试者工作特征(ROC)曲线评价PLR能否作为NSCLC诊断及鉴别病理类型的临床指标。结果与健康体检者相比较,NSCLC患者PLR值明显升高,鳞癌患者PLR明显高于腺癌患者。而NLR、LMR在NSCLC患者和健康体检者间无显著性差异。ROC曲线结果显示,采用PLR诊断NSCLC的曲线下面积为0.633,敏感性为0.59,特异性为0.61,界值为115.00;鉴别鳞癌与腺癌的曲线下面积为0.608,敏感性为0.61,特异性为0.66,界值为126.51。Spearman相关性分析结果显示,NSCLC患者PLR与TNM分期呈正相关性。结论 PLR值具有初步诊断肺癌、鉴别TNM分期及病理类型的价值。 潘颖 管世鹤 杨凯 陈礼文 吴园园 王爱华 孙蓓蓓 张浩关键词:TNM分期 肝癌细胞株HepG2中阻断ERK信号转导途径对IFN诱导抗病毒蛋白的影响 吴园园 杨凯 潘颖 管世鹤干扰素诱导的双链RNA依赖性蛋白激酶体外抗乙型肝炎病毒活性的研究 被引量:2 2015年 目的构建表达双链RNA依赖性蛋白激酶(PKR)融合绿色增强荧光蛋白(p EGFP-PKR)真核表达质粒,并进一步研究PKR蛋白在体外抗乙型肝炎病毒(HBV)活性。方法以p EGFP-N1为空载体,运用分子克隆技术构建重组质粒p EGFP-PKR,通过双酶切和直接测序两种方法验证重组质粒p EGFP-PKR是否构建成功。以能分泌完整HBV病毒颗粒子的肝胚瘤细胞株Hep G2.2.15细胞为细胞模型,采用重组质粒转染方式处理Hep G2.2.15细胞,运用荧光显微镜观察融合蛋白p EGFP-PKR在细胞内的表达,以电化学发光方法和实时荧光定量PCR技术分析细胞上清HBV抗原表达和细胞病毒复制水平。结果酶切鉴定和序列分析证实成功构建重组质粒p EGFP-PKR,转染Hep G2.2.15细胞后在荧光显微镜下可见融合蛋白p EGFP-PKR表达,同时细胞分泌的HBV抗原与空载体组相比较明显下降(P<0.05),而细胞外HBV复制水平未见明显变化。结论在体外肝细胞模型中,PKR蛋白具有一定的抗HBV活性作用。 王爱华 管世鹤 杨凯 张浩 孙蓓蓓 潘颖 沈继龙关键词:肝炎病毒 乙型 质粒 肝胚瘤细胞株HepG_2中HBx蛋白对SOCS3表达的影响及其机制 被引量:2 2012年 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein,HBx)对肝胚瘤细胞株HepG2表达信号抑制因子3(SOCS3)的影响及其机制。方法将表达HBx蛋白的重组质粒FL1-145HBx转染HepG2细胞,以不同浓度的SRC抑制剂PP2处理转染细胞,运用Western blot和RT-PCR技术分析HBx、SOCS3 mRNA和蛋白的表达情况,并以免疫细胞化学分析转染细胞中p-SRC的表达水平。结果重组质粒FL1-145HBx转染HepG2细胞后,转染细胞HBx能够表达HBx蛋白,并且细胞中SOCS3 mRNA和蛋白表达水平随着HBx蛋白的表达而显著增加(P<0.05),同时p-SRC蛋白的表达增强;而SRC抑制剂PP2处理转染细胞后,随着p-SRC蛋白表达的减少SOCS3蛋白表达逐渐下降。结论在肝胚瘤细胞株HepG2中,HBx蛋白很可能通过促进SRC蛋白的磷酸化而诱导SOCS3蛋白的表达。 管世鹤 潘颖 杨凯 吴圆圆 杨东亮关键词:乙型肝炎病毒 HBX蛋白 肝胚瘤细胞株HepG2中HBx蛋白对SOCS3表达的影响及其机制 2012年 目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HepatitisBvirusXprotein.HBx)对肝胚瘤细胞株HepG2表达信号抑制因子3(SOCs3)的影响及其机制方法将表达HB×蛋白的重组质粒FLl—145HBx转染HepG2细胞,以不同浓度的sRc抑制剂DP2处理转染细胞,运用Westernblot和RT—PCR技术分析HBx、SOCs3mRNA和蛋白的表达情况.并以免疫细胞化学分析转染细胞中p-SRC的表达水平结果重组质粒FLl-145HBx转染HepG2细胞后,转染细胞HB×能够表达HB×蛋白.并且细胞中SOCs3mRNA和蛋白表达水平随着HBx蛋白的表达而显著增加(P〈005).同时p—SRC蛋白的表达增强,而sRc抑制剂PP2处理转染细胞后.随着P—SRC蛋白表达的减少SOCS3蛋白表达逐渐下降结论在肝胚瘤细胞株HepG2中.HBx蛋白很可能通过促进SRC蛋白的磷酸化而诱导SOCS3蛋白的表达。 管世鹤 潘颖 杨凯 吴圆圆 杨东亮关键词:HEPG2细胞 C蛋白 细胞株 转染细胞