潘志刚
- 作品数：9 被引量：19H指数：3
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技攻关计划广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SARS冠状病毒spike基因DNA疫苗的初步研究
- 2005年
- 目的 构建SARS病毒spike基因片段真核表达质粒DNA疫苗;检测spike基因片段的免疫原性;筛选SARS病毒疫苗构建的理想靶抗原。方法 采用RT PCR从SARS冠状病毒北京0 1(BJ0 1)株cDNA获取了spike基因cDNA的全长D12、编码N末端氨基酸的cDNA片段D14和编码C末端氨基酸的cDNA片段D2 3;构建重组真核表达质粒pcDNA3 /D12、pcDNA3 D14、pcDNA3 D2 /3;用3种重组质粒和pcDNA3空质粒载体(对照)DNA皮下注射免疫Wistar大鼠;ELISA检测免疫后大鼠血清S蛋白特异性抗体IgG的产生;同位素51 Cr实验检测特异性CTL应答;ELISPOT检测单细胞水平IFN -γ分泌。结果 pcDNA3 /D2 3疫苗免疫组大鼠血清有S蛋白阳性抗体IgG产生、抗体滴度>10 0 0 ;脾淋巴细胞可诱导特异的CTL应答和IFN γ分泌,pcDNA3 /D2 3疫苗组与其它组之间统计分析P <0 .0 5。结论SARS冠状病毒S蛋白的C末端具有较强的免疫原性,是疫苗构建的理想候选靶抗原,本研究结果为SARS病毒的疫苗研究提供了资料。
- 李疆覃海德刘鹏张经纬冯炳健冯启胜陈丽珍潘志刚黄丽惜张如华余杏娟曾益新
- 关键词：SARS冠状病毒S蛋白PCDNA3ELISPOT抗体IGGCTL应答疫苗构建
- 候选肿瘤抑制基因RASSF1A在鼻咽癌中的遗传学和表观遗传学研究
- 鼻咽癌(Nasopharyngealcarcinoma，NPC)是中国南方广东人群中最常见的一种恶性上皮肿瘤，发病率居世界首位，达30～50/10万，但在世界大多数地区比较少见。鼻咽癌作为一种多因素复杂性疾病，其发病与E...
- 潘志刚
- 关键词：鼻咽癌杂合性丢失抑癌基因
- 文献传递
- 细胞色素P450酶系在人鼻咽癌及鼻咽非癌组织中的表达被引量：6
- 2004年
- 背景与目的:鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)的发生与环境及遗传因素密切相关。环境中各种前致癌物需经代谢酶包括细胞色素P450(CytochromeP450,CYP450)的活化才具有致癌作用。本研究拟检测鼻咽癌及鼻咽非癌组织中的CYP450基因表达,以了解与鼻咽部组织中致癌物代谢活化有关的CYP450基因。方法:利用下述两种方法检测CYP450基因的表达:(1)混合7例鼻咽非癌组织的RNA构建cDNA文库,进行克隆测序及生物信息学分析;(2)逆转录14例鼻咽癌组织及8例鼻咽非癌组织的RNA为cDNA,以PCR扩增检测CYP450基因的表达。结果:cDNA文库检测的CYP450基因EST(ExpressedSequenceTag)有CYP1B1、CYP2F1、CYP2J2、CYP4B1、CYP4F12、CYP5A(TBXAS1)、CYP20A1和CYP51A1,其中CYP4B1的EST拷贝数最高,达16个拷贝;RT-PCR检测表达的CYP450基因有CYP1A1、CYP1B1、CYP2A6、CYP2A13、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1、CYP2F1、CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7、CYP4B1,其中CYP1B1、CYP2B6、CYP4B1已经在文库检测有表达。总共有19个CYP450基因在鼻咽癌及鼻咽非癌组织表达,表达较高的基因有CYP1B1、CYP2C8、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A5和CYP4B1。结论:鼻咽部组织表达CYP450基因种类较多,其中包括与前致癌物代谢活化相关的基因。
- 姜桔红贾卫华覃海德梁慧潘志刚曾益新
- 关键词：鼻咽癌细胞色素P450CDNA文库
- Haemadin基因的人工合成及其在巴斯德毕赤酵母细胞中表达的初步研究
- 该实验的目的是希望能利用巴斯德毕赤酵母表达系统,为Haemadin基因在真核细胞中表达做初步的研究,并为以后进一步对进行Haemadin生产和药理学等基础研究打下基础.该文实验采用毕赤酵母表达系统的分泌型表达载体pPIC...
- 潘志刚
- 关键词：凝血酶巴斯德毕赤酵母基因表达生物活性
- 文献传递
- 中国蛭类动物研究(分类、生态、行为、繁殖、觅食生物学、形态、分子生物学、驱避防治和利用)
- 谭恩光黄立英王波潘志刚
- 成果主要内容：1、发现一批蛭类新种，分别属于蛭类两目，三科，五属，丰富中国蛭类物种多样性，为教学科研，为军事和医用提供基础资料。2、提出陆蛭起源存在多元化新观点，提出华中区南中国是医蛭科分化分布中心。3、首次弄清了山蛭、...
- 关键词：
- 关键词：行为生态学
- SARS核酸疫苗及其制备方法
- 本发明属于生物基因工程领域，具体涉及非典型肺炎(SARS)核酸疫苗及其制备方法，以及SARS相关冠状病毒S基因在制备预防SARS的疫苗方面的应用。本发明是一种核酸疫苗，具体说是通过提取SARS相关冠状病毒刺突蛋白S基因，...
- 曾益新黄文林汪健覃海德刘鹏潘志刚冯启胜李疆黄丽惜张妙华陈丽珍
- 文献传递
- SARS核酸疫苗及其制备方法，冠状病毒S基因的应用
- 本发明属于生物基因工程领域，具体涉及非典型肺炎(SARS)核酸疫苗及其制备方法，以及SARS相关冠状病毒S基因在制备预防SARS的疫苗方面的应用。本发明是一种核酸疫苗，具体说是通过提取SARS相关冠状病毒刺突蛋白S基因，...
- 曾益新黄文林汪健覃海德刘鹏潘志刚冯启胜李疆黄丽惜张妙华陈丽珍
- 文献传递
- SEMA3B、SEMA3F基因在鼻咽癌细胞中突变和表达的研究被引量：6
- 2003年
- 背景与目的:鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)致病的分子机理至今仍不清楚,但高频的杂合性缺失和功能学证据均表明染色体3p21.3区段中存在着与鼻咽癌相关的抑癌基因。SEMA3B和SEMA3F基因是定位于3p21.3的两个semaphorin家族成员,最近被鉴定为抑癌基因。本研究通过对SEMA3B和SEMA3F基因在鼻咽癌中的突变和表达检测,探讨SEMA3B和SEMA3F基因与鼻咽癌发病的关系。方法:采用PCR-直接测序方法,在21例散发性NPC组织和2例NPC细胞株(CNE2,SUNE1)中对SEMA3B和SEMA3F基因的编码区、拼接位点和部分调控区进行突变检测;利用半定量RT-PCR方法,检测SEMA3B和SEMA3F基因在鼻咽癌中的表达。结果:在鼻咽癌中未发现SEMA3B或SEMA3F基因具有体细胞突变,但在SEMA3B基因中发现两个导致氨基酸改变的单核苷酸多态性Thr415Ile和Ile242Met。在Thr415Ile多态位点中,可导致SEMA3B基因功能缺陷的Ile等位基因频率在鼻咽癌患者中占有较高比例(64%,27/42)。SEMA3BmRNA在6例鼻咽非癌组织中正常表达,但在76%(16/21)的鼻咽癌组织中表达下调或缺失;SEMA3FmRNA的表达水平在鼻咽癌和非癌组织中无明显差异。结论:SEMA3BmRNA在鼻咽癌中发生高频表达缺失说明该基因失活与鼻咽癌密切相关,SEMA3B基因可能是定位于染色体3p21.
- 刘晓琼孙敏陈汉奎李京湘潘志刚龙綮新王珣章曾益新
- 关键词：基因突变杂合性缺失鼻咽癌
- 3p21.3区域鼻咽癌相关基因——BLU的抑癌功能被引量：8
- 2003年
- 背景与目的:染色体3p21.3区域的杂合性丢失是鼻咽癌细胞中高发和早期的细胞遗传学变异,提示缺失区域内可能存在与鼻咽癌发生相关的抑癌基因。BLU基因定位于3p21.3,蛋白质结构中含有MYND功能域。已有研究表明,BLU基因在鼻咽癌细胞中发生高频率的启动子甲基化和表达缺失。本研究构建了野生型BLU基因和其突变体的表达载体,分析BLU基因对鼻咽癌细胞恶性增殖的可能抑制作用。方法:用RT-PCR方法钓取BLU基因全长cDNA;用定点突变技术分别构建缺失MYND结构域的突变体、携带Ser402Phe点突变及缺失第405位Cys和第406位Ser的突变体、以及携带Gly160Arg点突变的BLU基因突变体的表达载体。将野生型BLU基因和MYND缺失型突变体转染鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,用TUNEL方法检测、观察细胞凋亡情况;通过细胞计数和克隆形成实验分析稳定转染细胞的生长特性;分析稳定转染BLU基因的载体对CNE2细胞裸鼠致瘤性的影响。结果:瞬时转染野生型或MYND缺失突变型BLU基因不能诱导CNE2细胞凋亡;外源表达BLU基因对CNE2的细胞凋亡以及对CNE1、CNE2的细胞增殖和克隆形成能力均无明显影响;BLU基因对CNE2细胞的裸鼠成瘤能力也没有明显抑制作用。结论:尽管BLU基因在鼻咽癌中发生高频率变异,但其对鼻咽癌细胞的恶性增殖并没有明显抑制作用。
- 刘晓琼潘志刚李满枝姜桔红付捷龙綮新王睤章曾益新
- 关键词：鼻咽癌TUNEL基因缺失肿瘤生物学
