滑世轩
- 作品数：22 被引量：48H指数：4
- 供职机构：河南省人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金宁波市科技计划项目河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝细胞生长因子诱导慢性髓细胞性白血病K562细胞抗凋亡效应研究被引量：3
- 2017年
- 目的观察肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对经凋亡诱导剂足叶乙苷(etoposide,VP-16)诱导后慢性髓细胞性白血病(CML)K562细胞凋亡的抑制作用,并分析其分子机制。方法采用苏木素-伊红(HE)染色、吖啶橙染色(AO)染色对凋亡细胞形态特征变化进行定性/半定量分析;采用Annexin V-FITC/PI双染、JC-1染色检测细胞膜表面的PS外翻和完整性及线粒体膜电位分析凋亡细胞生化特征变化;采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9等凋亡相关基因mRNA表达的变化,综合评价HGF抗凋亡效应,并阐述其分子机制。结果 HE法、AO法发现HGF+VP-16组凋亡率明显低于VP-16组(P<0.05、P<0.05),提示HGF可显著抑制凋亡的发生;Annexin V-FITC/PI双染法、JC-1染色法发现HGF+VP-16组早期凋亡细胞明显低于VP-16组(P<0.05、P<0.001),提示HGF具有抗K562细胞早期凋亡效应;凋亡相关基因mRNA表达检测结果发现,HGF+VP-16组的Bcl-2 mRNA表达量明显高于VP-16组(P<0.001),而Bax mRNA、Caspase-3 mRNA、Caspase-9 mRNA表达量明显低于VP-16组(P<0.05、P<0.001、P<0.001),证实HGF抑制凋亡基因表达,同时促进抗凋亡基因的表达,提示HGF具抗凋亡效应。结论 HGF显著抑制经VP-16诱导的CML K562细胞的凋亡,该抗凋亡效应可能通过HGF/c-Met途径调控PI3K/AKT通路而实现。
- 郑筱娇高洲沈蓉蓉赵行滑世轩吕建新岑东
- 关键词：肝细胞生长因子慢性髓细胞性白血病K562细胞凋亡
- HMGB1及HMGB2与冠状动脉钙化相关性的分析被引量：2
- 2021年
- 目的:探讨血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)、血清高迁移率族蛋白2(HMGB2)水平与冠状动脉钙化(CAC)的关系。方法:入选2020年1月—2021年1月于华中阜外医院住院的156例冠心病患者作为试验对象,记录所有患者病史资料、HMGB1以及HMGB2等指标,并进行CAC的分析。将冠心病患者分为非CAC组(62例)与CAC组(94例),比较两组患者临床指标的差异。采用ROC曲线分析HMGB1与HMGB2对CAC的诊断价值,采用logistic回归分析探讨CAC的危险因素。结果:与非CAC组比较,CAC组患者年龄、冠心病病程、BMI、尿酸(UA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)、高血压病、糖尿病、HMGB1和HMGB2水平均显著升高(均P<0.05),左室射血分数(LVEF)与总胆红素(TBil)水平显著降低(均P<0.05)。ROC曲线显示,HMGB1水平诊断CAC的最佳截点值为6.1773 ng/mL,曲线下面积为0.734(95%CI:0.655~0.813),敏感性为86.2%,特异性为50.0%;HMGB2水平诊断CAC的最佳截点值为5.0396 ng/mL,曲线下面积为0.814(95%CI:0.748~0.881),敏感性为70.2%,特异性为87.1%。多因素logistic回归分析结果显示,TBil是CAC的保护因素,年龄、UA、TG、HbA1c、高血压病、HMGB1、HMGB2是CAC的危险因素。结论:高HMGB1、HMGB2是发生CAC的独立危险因素。
- 刘林鑫孟华杨冠旭李蒙刘军陈东昌李文博李震南滑世轩安松涛王忠民陈岩
- 关键词：钙化
- NK4蛋白在大肠杆菌中的表达及其活性研究被引量：4
- 2009年
- NK4蛋白是近年来发现的肝细胞生长因子的最佳拮抗剂。为规模化生产NK4蛋白,将NK4基因插入载体pET-26b(+),构建重组原核表达载体pET-26b(+)-NK4,并转化大肠杆菌Rosseta(DE3)。转化菌经IPTG诱导后以包涵体形式大量表达重组蛋白,占菌体总蛋白的42%。包涵体用盐酸胍溶解后经Ni-NTA树脂亲和层析纯化,蛋白纯度约为95%,经Western blot证实为NK4蛋白。纯化的重组蛋白行稀释复性后可抑制Hela细胞的贴壁、迁徙,并诱导其凋亡,证实制备的NK4蛋白具有生物活性。NK4蛋白的成功制备将有助于NK4相关功能的深入研究。
- 罗建平滑世轩赵行岑东吕建新涂植光裴仁治
- 关键词：纯化生物活性
- AendB亚型鉴定及输血治疗对策
- 2016年
- 目的探讨AendB亚型的血清学特点,并分析此类患者如何应用血制品进行输血治疗并观察疗效。方法通过血清学检测、吸收放散试验、唾液试验等血清学实验方法鉴定1例ABO正反定型不符患者并进行家系调查。结果该患者体内可能产生不规则抗-A1抗体,通过该流程可以从血清学角度鉴定AendB亚型,家系分析可以从遗传学角度进一步支持AendB亚型。结论对于AendB亚型患者输血治疗,为避免出现输血反应可以考虑给患者输注非亲的O型洗涤红细胞。
- 滑世轩孙长义张福明许泼实岑东
- 关键词：家系调查输血治疗
- HGF mRNA实时荧光定量PCR在淋巴瘤的应用
- 2008年
- 目的构建肝细胞生长因子(HGF)mRNA定量标准,建立实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测体系,探讨在淋巴瘤的应用价值。方法提取总RNA,行RT-PCR,获HGF cDNA目标片段并构建重组质粒,作为定量标准。设计第二引物对和探针,确定扩增条件,优化组分浓度,建立HGF实时FQ-PCR检测体系,并进行方法学评价。应用该检测体系定量检测47例淋巴瘤的HGF mRNA表达,并采用受试者工作特征(ROC)曲线法,评价其在淋巴瘤诊断中的敏感度和特异度。结果成功构建了HGF定量标准,结合热启动PCR和降落PCR技术创建了HGF mRNA实时FQ-PCR检测体系。方法学评价实验表明:标准曲线的斜率为-3.513,相关系数为0.999,扩增效率达92.6%;批内、批间和日间变异系数分别为2.1%、4.0%和6.8%;灵敏度达2拷贝/μl。HGF mRNA在对照组和淋巴瘤组的表达分别为0.317±0.192和6.425±2.172,组间差异具统计学意义(P<0.001),但HD组和NHL组的表达无显著差异(P>0.05),而缓解组显著低于复发组(P<0.05)。ROC曲线法提示,当临床诊断界值为3.316时,HGF mRNA对淋巴瘤诊断敏感度和特异度分别为93.6%和100%。结论成功构建了HGF mRNA定量标准。建立的HGF mRNA FQ-PCR检测体系是理想的、可行的,可定量检测淋巴瘤HGF mRNA并具诊断价值。
- 岑东吕建新裴仁治涂植光余晓林文阳安滑世轩
- 关键词：肝细胞生长因子实时荧光定量PCR淋巴瘤
- NK4基因的克隆及其在Raji细胞中的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:克隆NK4基因,构建其重组真核表达载体,并观察其在Raji细胞中的表达。方法:从人肝组织中提取总RNA,行RT-PCR获得NK4基因cDNA,与载体pVITRO2-mcs构建重组真核表达载体,转染Raji细胞。潮霉素B筛选后,采用实时荧光定量PCR、ELISA、细胞免疫组化和半固体培养等方法检测NK4基因在Raji细胞的表达,筛选稳定表达的细胞株。结果:NK4基因获成功克隆并构建了重组真核表达载体pVITRO2-mcs-NK4;转染NK4基因后的Raji细胞经RT-PCR发现存在特异性DNA片段。NK4基因在Raji细胞可稳定表达NK4mR-NA和蛋白,且可抑制Raji细胞的增殖、迁徙和侵袭。结论:NK4基因成功克隆并构建了重组真核表达载体,转染Raji细胞后表达稳定。
- 滑世轩岑东赵行吕建新涂植光裴仁治
- 关键词：基因NK4克隆基因表达RAJI细胞
- 血脂正常冠心病患者炎症因子水平与病情严重程度的关系被引量：12
- 2023年
- 目的探讨白细胞介素(IL)-1β、可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平与血脂正常的冠心病患者疾病严重程度和Gensini评分的相关性。方法选取血脂正常的冠心病患者114例,根据临床类型分为稳定型心绞痛(SAP)组、不稳定型心绞痛(UAP)组、急性心肌梗死(AMI)组,以健康体检者74名作为正常对照组。检测所有研究对象IL-1β、sIL-2R、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α水平。分析促炎因子IL-1β、s IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α和抑炎因子IL-10与冠心病严重程度和Gensini评分的相关性。结果AMI组、UAP组、SAP组IL-1β、s IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α水平依次降低(P<0.05),IL-10水平依次升高(P<0.05)。SAP组与正常对照组之间各炎症因子差异均无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析结果显示,IL-1β、sIL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α与Gensini评分呈正相关(r值分别为0.742、0.653、0.816、0.711、0.582,P<0.05),IL-10与Gensini评分呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论血脂正常的冠心病患者IL-1β、s IL-2R、IL-6、IL-8、TNF-α水平显著升高,IL-10显著降低,且与冠心病的严重程度有关。
- 滑世轩代淑阳李冰洁岑东许泼实
- 关键词：炎症因子GENSINI评分冠心病
- 肝细胞生长因子抑制肿瘤细胞凋亡作用研究被引量：9
- 2012年
- 目的探讨肝细胞生长因子(HGF)抑制凋亡诱导剂依托泊苷(etoposide,VP-16)诱导5种肿瘤细胞(B细胞淋巴瘤细胞系Raji、人急性粒细胞白血病细胞系HL-60、宫颈癌细胞系HeLa、前列腺癌细胞系PC-3、非小细胞肺癌细胞系A549)凋亡的作用及其分子机制的研究。方法实验设正常对照组、药物组及肝细胞生长因子保护组,通过CCK-8法观察依托泊苷对5种肿瘤细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术,吖啶橙(AO)荧光染色,瑞氏染色(HE),透射电镜定性及定量观察5种肿瘤细胞的凋亡情况,并进行相关分析。结果 CCK-8法显示依托泊苷可明显抑制Raji、HL-60、PC-3、HeLa、A549等5种细胞增殖的药物浓度分别是100、1、400、200、200μg.mL-1;透射电镜下可观察到典型的凋亡细胞。流式细胞仪检测结果表明,5种细胞的药物组凋亡率均明显高于对照组(P<0.01,P<0.05),其中肝细胞生长因子保护组凋亡率明显低于药物组(P<0.01,P<0.05);吖啶橙染色和HE染色结果表明,正常组细胞形态完好,药物组及肝细胞生长因子保护组凋亡率明显增高(P<0.01,P<0.05),其中肝细胞生长因子保护组凋亡率明显低于给药组(P<0.01,P<0.05)。结论肝细胞生长因子可明显抑制依托泊苷诱导的5种肿瘤细胞凋亡,其作用机制有待进一步研究证实。
- 沈蓉蓉郑筱娇赵行岑东罗建平吕建新裴仁治滑世轩
- 关键词：肝细胞生长因子依托泊苷凋亡流式细胞术吖啶橙染色肿瘤
- 原发性醛固酮增多症合并无症状主动脉夹层A型一例
- 2023年
- 原发性醛固酮增多症(原醛)是指肾上腺皮质自主分泌醛固酮,导致体内钠潴留,血容量增加,钾排出量增多,肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin angiotensin aldosterone system, RAAS)活性受抑制的一种综合征,临床主要表现为高血压和低血钾。研究发现,醛固酮增多是导致心肌肥厚、心力衰竭和肾功能受损的重要危险因素,与原发性高血压患者相比,原醛患者心脏、肾脏等高血压靶器官损害更为严重。
- 代淑阳滑世轩董佳佳李涛王晓宇邓予晖许泼实
- 关键词：原发性醛固酮增多症主动脉夹层肾功能受损无症状钠潴留
- 河南汉族人群血小板抗原HPA1-16bw基因多态性研究被引量：7
- 2011年
- 目的研究河南地区汉族人群血小板抗原基因分布频率,建立地区性血小板抗原基因库,为血小板配合输注提供实验依据。方法用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对160例无血缘关系的河南汉族体检健康者进行HPA1-16bw系统基因分型。结果 HPA1-6和HPA-15基因频率分别为1a 0.987 5,1b 0.012 5;2a 0.946 9,2b 0.053 1;3a 0.590 6,3b0.409 4;4a 0.996 9,4b 0.003 1;5a 0.990 6,5b 0.009 4;6a 0.981 2,6b 0.018 8;15a 0.540 6,15b 0.459 4。HPA7-14bw,16bw仅检测到a/a等位基因,基因频率均为1.000 0。经χ2检验各系统HPA符合Hardy-Weinberg平衡法则。HPA基因分布存在种族和地区差异。结论河南汉族人HPA-15和HPA-3基因型杂合率最高。HPA基因分型有助于输注血小板时降低免疫性血小板减少症的发生概率。
- 滑世轩王书勤岑东燕备战
- 关键词：人类血小板抗原序列特异性引物聚合酶链反应基因频率
