洪霓
- 作品数：214 被引量：616H指数：19
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家梨产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程生物学更多>>
- 我国柑橘衰退病毒的基因型鉴定
- 柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)是长线形病毒科(Closteroviridae)长线形病毒属(Closterovirus)成员,能侵染大多数的柑橘种、杂种及其近缘种。由CTV引起的柑橘速...
- 潘嵩王国平洪霓
- 文献传递
- 猕猴桃病毒A和B的RT-PCR检测及分子变异初步研究被引量：8
- 2015年
- 为明确猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,Ac VA)和猕猴桃病毒B(Actinidia virus B,Ac VB)在中国猕猴桃(Actinidia sp.)上的侵染状况和分子特性,采用RT-PCR技术对151份猕猴桃样品的Ac VA和Ac VB进行检测,检出率分别为15.2%和17.9%,所收集的6种猕猴桃样品中均检测到一种或两种病毒。发现Ac VA的ORF1、ORF4和ORF5扩增片段序列存在较大分子变异,不同分离物的269 bp片段(ORF1)核苷酸序列相似性为77.3%~99.3%。在基于各扩增片段核苷酸序列的系统进化树中,Ac VA分离物聚为2~3组。采用引物Ac VB5F/5R扩增获得20个Ac VB分离物的342 bp或338 bp的ORF5片段,核苷酸序列相似性为81%~100%,与新西兰Ac VB分离物TP7-93B相应片段的核苷酸序列相似性为83.9%~99.7%,在系统进化树中聚为3组。
- 郑亚洲王国平周菊芳朱晨熹王利平徐文兴洪霓
- 关键词：猕猴桃RT-PCR
- 苹果热处理脱毒技术的改进被引量：16
- 1996年
- 苹果热处理脱毒技术的改进张尊平，洪霓，姜修风，张少瑜（中国农业科学院果树研究所辽宁兴城１２５１００）苹果潜隐病毒发生普遍，我国各苹果产区现已栽培的多数品种潜带率已经饱和［１］。苹果病毒均经嫁接传染，随接穗、苗木及无性系砧木远距离扩散。迄今尚未发现传毒...
- 张尊平洪霓姜修风张少瑜
- 关键词：苹果树脱毒热处理脱毒苗木
- 来源于桃和苹果的苹果褪绿叶斑病毒的部分分子生物学特性和cp基因的原核表达被引量：6
- 2007年
- 从桃和苹果上分离得到苹果褪绿叶斑病毒ACLSV-HBP和ACLSV-C2个分离物,采用RT-PCR法进行扩增,所获扩增片段经序列测定,其全长分别为1768nt(ACLSV-HBP)和1751nt(ACLSV-C)。这2个分离物扩增片段全长的同源性为83%,mp基因片段核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为82.6%和87.1%;cp基因均由582nt组成,其核苷酸和推导编码氨基酸序列同源性分别为87.8%和95.9%。将2个分离物的cp基因与已报道ACLSV分离物进行序列同源性比较,结果显示ACLSV-HBP与SX/2的cp基因核苷酸序列及推导编码氨基酸序列同源性最高,分别为94.0%和96.4%。将ACLSV-HBP分离物的cp基因克隆到原核表达载体pGEX-KG,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白大小约为46kDa。Western-blot分析表明,该基因在大肠杆菌内得到高效表达,融合蛋白具有抗原性。
- 郑银英王国平洪霓宋艳苏游红
- 关键词：苹果褪绿叶斑病毒CP基因分子生物学特性SDS-PAGE分析序列同源性RT-PCR法
- 腐烂病菌的GFP标记及其在梨叶片组织中的侵染和扩展观察被引量：6
- 2015年
- 【目的】明确梨腐烂病菌强、弱致病力菌株在梨树叶片组织中的侵染及扩展情况。【方法】利用农杆菌介导的遗传转化(agrobacterium-mediated transformation technique,ATMT)方法对梨腐烂病菌强、弱致病力菌株进行绿色荧光蛋白(green looresent protein,GFP)标记,并筛选出和野生型菌株比较在生长速度、培养特性以及致病力都没有发生显著变化的阳性转化子菌株;利用荧光显微技术观察其在梨树叶片组织中的侵染和扩展,比较强、弱致病力菌株的侵染差异。【结果】强、弱致病力菌株在叶片上侵染存在差异。菌丝主要在叶片的上表皮扩展,菌丝扩展前端的叶片组织颜色发生变化,形成一段变色带,强致病力菌株侵染形成的变色带较弱致病力菌株形成的变色带宽,强致病力菌株菌丝在叶片组织上的分布较稀疏。【结论】梨腐烂病菌菌丝主要在叶片的上表皮组织扩展;强致病力菌株的侵入能力较强,其在叶片上扩展时菌丝分布较稀疏,扩展前端形成的变色带宽。
- 贾娜娜翟立峰白晴陈晓忍王彩霞洪霓王国平
- 关键词：农杆菌介导遗传转化绿色荧光蛋白标记侵染
- 一种诱导西洋梨离体叶片获得再生完整植株的方法
- 本发明属于植物培育技术领域，公开了一种诱导西洋梨离体叶片获得再生完整植株的方法，包括：无菌材料的获取、组培苗继代培养、叶片再生培养、再生芽继代培养、再生苗生根培养及生根苗移栽。鉴于梨叶片再生不具备一套再生体系可以在不同品...
- 王利平吕沙妹王婷婷杨岳昆何颖朱浩东张靖国洪霓王国平
- 苹果茎痘病毒RdRp基因分子变异分析被引量：2
- 2022年
- 苹果茎痘病毒(apple stem pitting virus,ASPV)是凹陷病毒属β线性病毒科(Foveavirus,Betaflexiviridae)的典型代表。ASPV基因组是正单链RNA(+ssRNA),全长约9300个核苷酸,包含5个开放式阅读框(Open reading frames,ORFs),5′端非翻译区(Untranslated region,UTR)和3′UTR。ORF 1编码依赖RNA的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRp)。
- 马小方马小方洪霓蒋迎春吴黎明何利刚何利刚于婷婷王志静王志静
- 关键词：苹果茎痘病毒
- 葡萄卷叶伴随病毒-3复制酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2006年
- 以感染有葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevineleafroll-associatedvirus-3,GLRaV-3)的葡萄韧皮部组织中提取到的dsRNA为模板,利用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,对GLRaV-3的复制酶(RNA-dependentRNApolymerase,RdRp)基因进行克隆,获得了预期大小的目标片段。将此片段克隆到载体pBluescriptSKⅡ,酶切鉴定后测序。测序结果表明:RdRpcDNA全长为1618bp。经BLAST分析推导其可能编码538个氨基酸,与报道的GLRaV-3美国分离物NY1RdRp核苷酸相似性为99.3%,氨基酸相似性为99.6%;推导的氨基酸序列与其同属的PMWaV-2、GLRaV-1和LChV-2的RdRp氨基酸序列相似性分别为53%,50%和38%,包含了GDD在内的8个保守基元序列。将该段RdRp连接到表达载体pET22b(+)上,获得的重组子pET-RdRp转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后,用1mmol/L的IPTG进行诱导。SDS-PAGE分析表明,RdRp在大肠杆菌中被诱导表达,融合蛋白分子量约为61kDa。
- 徐章逸王国平洪霓
- 关键词：复制酶原核表达
- 梨树病虫害发生流行趋势与防治对策建议
- 梨是世界性重要果树，栽培国家(地区)有76个，其中年产梨果20万t以上的国家有12个。我国梨栽培面积大、分布广，在我国除海南省之外均有栽培。梨是我国第三大果树，面积和产量均仅次于苹果和柑橘。本文对世界梨病虫害防控技术发展...
- 王国平洪霓
- 关键词：梨树病虫害栽培技术
- 文献传递
- 苹果花叶病血清学快速诊断技术研究被引量：9
- 1994年
- 本试验结果表明，Ａ蛋白夹心酶联法检测苹果花叶病毒，适宜工作浓度第１抗血清为１／１０３－１／１０４，第２抗血清为１／１０３。双抗体夹心法检测该病毒，抗体ＩｇＧ浓度愈高，阳性样品与阴性样品吸光值之比愈大，当ＩｇＧ稀释４００倍时，两者的吸光值无明显差别。取休眠期枝条进行检测，以含０．０５％吐温－２０的磷酸缓冲盐水（ＰＢＳＴ）十２％聚乙烯吡咯烷酮十０．１％卵蛋白作提取缓冲液获得了较好的检测结果，添加铜试剂能明显提高阳性样品吸光值。春季嫩叶的检测效果最佳。
- 洪霓王国平于济民
- 关键词：苹果花叶病毒血清学
