殷长传
- 作品数：6 被引量：23H指数：4
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 分子伴侣 SecB 基因和人淋巴毒素基因在大肠杆菌中的共表达被引量：6
- 1997年
- 分子伴侣ＳｅｃＢ基因和人淋巴毒素基因在大肠杆菌中的共表达周颖张青殷长传宋大新陈永青（复旦大学微生物学系和遗传研究所上海２００４３３）分子伴侣（Ｃｈａｐｅｒｏｎｅ）是细胞内催化及维持其他蛋白质正确构象的一类蛋白质分子［１，２］。研究表明，分子伴...
- 周颖张青殷长传宋大新陈永青
- 关键词：分子伴侣基因表达
- 分子伴侣GroESL在大肠杆菌中的克隆、表达及分离纯化被引量：2
- 1997年
- 将含分子伴侣GroESL基因的DNA片段,通过在合适的酶切位点进行酶切,将该基因克隆入高表达载体pKC220,含该表达质粒的工程菌经42℃热诱导后,分子伴侣GroESL基因在大肠杆菌中获得了高效表达,其中,分子伴侣蛋白GroEL的表达量占细菌总蛋白的40％,其辅助蛋白GroES的表达量占细菌总蛋白的15％;同时,建立了较简单的分离纯化路线,通过硫酸铵沉淀、DEAE-52柱层析,Sephadex G-50凝胶过滤等方法得到纯化的分子伴侣蛋白GroEL和GroES。
- 周颖殷长传张青宋大新陈永青
- 关键词：大肠杆菌分子伴侣GROESL纯化克隆
- FD耐热逆转录酶的部分酶学性质研究被引量：5
- 1998年
- ＦＤ耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ）来自一株栖热杆菌菌株．通过ＲＴ－ＰＣＲ方法，论文对ＦＤ－ＴＲＴ的部分酶学性质进行了研究．ＦＤ耐热逆转录酶能耐受９５℃的高温，最适反应温度在６５～７５℃左右，这时ＲＮＡ的高级结构能解开，可以提高逆转录反应的效率；同时引物和ＲＮＡ模板识别的专一性强，可大大提高逆转录的特异性．实验表明ＦＤ－ＴＲＴ逆转录反应的最适条件为：２５ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．８，１５ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４，１００μｇ／ｍｌ明胶，５００μｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，２５ｐｍｏｌ逆转录引物，１ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ２，２ＵＦＤ耐热逆转录酶，反应在６５～７０℃下进行．在上述条件下，用ＲＴ－ＰＣＲ可检出少于５ｐｇ外周血总ＲＮＡ中特异的α珠蛋白ｍＲＮＡ．
- 郑佐华周宗祥朱蔚殷长传季朝能毛裕民
- 关键词：逆转录酶耐热逆转录PCR
- 甲硒氨酸耐热邻苯二酚2,3双加氧酶的高表达和分离纯化
- 1999年
- 季朝能姜涛殷长传陈民勤张志鸿毛裕民
- 甲硒氨酸耐热邻苯二酚2,3双加氧酶的高表达和分离纯化被引量：5
- 2000年
- 甲硒氨酸多波长反常散射法是国际上 90年代发展的蛋白质晶体结构测定的新方法 ,该法得以实施的首要一步是获得硒取代 (硫 )的高纯蛋白质 .通过亚克隆将编码耐热邻苯二酚 2 ,3双加氧酶 (简称TCTD)的基因PHEB克隆至表达载体 pRSET ,得到了高表达质粒pRSET PHEB ,转入Met缺陷的菌株B834DE3.通过诱导表达和分离纯化得到了甲硒氨酸参入的TCTD .经质谱测定发现TCTD的所有 7个甲硫氨酸都被甲硒氨酸所替代 ,这为Se Met多波长反常散射法研究TCTD的晶体结构打下了基础 .
- 季朝能姜涛殷长传殷长传金詟金詟张志鸿
- 关键词：纯化
