段继强 作品数:10 被引量:82 H指数:6 供职机构: 云南大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省科技攻关计划 国家科技基础条件平台建设计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
苎麻细胞质雄性不育“三系”ISSR特异片段克隆和序列分析 被引量:2 2008年 利用ISSR分子标记技术对苎麻细胞质雄性不育"三系"mtDNA进行多态性分析;在选用的38个IS-SR引物中,有6个引物的扩增产物在不育系、保持系和恢复系之间存在差异。对这些特异性片段进行克隆和序列测定,结果表明:片段21-MS全长956bp,包含一个525bp的完整编码区,共编码174个氨基酸。片段31-M/R全长778bp,包含一个404bp的不完整编码区,共编码134个氨基酸;其核苷酸和氨基酸序列与已报道的多种植物中的番茄红素β-环化酶基因分别存在71~76和73~77的同源性。 段继强 李建永 吴丽艳 梁雪妮 刘飞虎关键词:苎麻 番茄红素Β-环化酶 细胞质雄性不育 亚麻脱胶菌的分离、筛选和鉴定 被引量:12 2007年 从云南亚麻沤麻水、种植土、沤麻残渣堆积土中粗筛获得具有果胶酶活性的菌株51株;通过几种酶活性测定,获得果胶酶和木聚糖酶(主要的半纤维素酶)活性较高、无纤维素酶活力且脱胶周期短的目的菌株4株.基于4个菌株的果胶分解能力、沤麻周期长短以及沤麻的效果等指标,最终确认YN1.1是优良的亚麻脱胶菌株.经16S rRNA基因测序和生理生化鉴定,该株菌为芽胞杆菌属的地衣芽孢杆菌. 吴丽艳 段继强 范志祥 杜威 梁雪妮 刘飞虎关键词:亚麻 生物脱胶 果胶酶 苎麻线粒体基因CoxⅡ和atpA与细胞质雄性不育相关性分析 被引量:13 2009年 【目的】探讨线粒体CoxⅡ和atpA基因与苎麻CMS的关系。【方法】根据GenBank报道的双子叶植物线粒体CoxⅡ和atpA基因编码区高度保守序列设计简并引物,通过PCR技术从苎麻细胞质雄性不育系、保持系和恢复系(简称"三系")mtDNA中扩增目的基因片段;采用DNAWalking策略从3′端和5′端扩增基因片段的未知侧翼序列,分离完整的线粒体CoxⅡ、atpA基因;基于全基因序列和基因表达(RT-PCR法)分析这两个基因在苎麻"三系"间的差异。【结果】分离的苎麻CoxⅡ和atpA基因片段与GenBank中一些双子叶植物同类基因的同源性分别高达95%和97%以上,获得的CoxⅡ、atpA全基因包含了完整的开放阅读框。"三系"的CoxⅡ基因在mtDNA水平、转录水平、蛋白质水平上均无明显差异。雄性不育系atpA基因在mtDNA水平、氨基酸序列和蛋白质二级结构上与保持系和恢复系存在比较明显的差异;RT-PCR分析还表明,不育系atpA基因在现蕾期和开花后期的表达量明显低于可育系。【结论】CoxⅡ基因与苎麻CMS可能无关,而不育系atpA基因的序列变异和/或异常表达可能与苎麻CMS关系密切。 段继强 李建永 杜光辉 梁雪妮 刘飞虎关键词:苎麻 细胞质雄性不育 RT-PCR 苎麻细胞质雄性不育相关候选基因的克隆和表达分析 细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility CMS)是植物普遍存在的一种现象,到目前为止已在300多种植物中发现。雄性不育已作为防止自交的有效手段被广泛地用于作物的杂交育种中,研究其分子机制有利... 段继强关键词:细胞质雄性不育 杂交育种 苎麻 基因克隆 文献传递 苎麻atp6和atp9基因的克隆表达及与细胞质雄性不育的相关性 被引量:12 2008年 根据GenBank报道的双子叶植物线粒体atp6和atp9基因编码区保守序列设计简并引物,通过PCR技术从苎麻细胞质雄性不育系、保持系和恢复系(简称"三系")mtDNA中扩增目的基因片段,发现所得序列开放阅读框虽不完整,但与GenBank报道的其他植物线粒体atp6和atp9基因同源性分别高于94%和85%。采用DNA Walking步移法分别从3′端和5′端扩增两个基因片段的未知侧翼序列,分离出完整的苎麻线粒体atp6和atp9基因,包含了完整的开放阅读框。其中"三系"的atp6基因在mtDNA水平、转录和翻译调控水平、蛋白质水平上均无差异。不育系atp9基因在编码区3′端与保持系和恢复系相比存在若干个碱基的差异和缺失;RT-PCR分析还表明,不育系atp9基因在现蕾期和盛花期的表达量很高。推测不育系atp9基因的结构变异和/或异常表达与苎麻细胞质雄性不育(CMS)的关系密切。 段继强 杜光辉 李建永 梁雪妮 刘飞虎关键词:苎麻 细胞质雄性不育 DNA WALKING RT-PCR ACC脱氨酶基因转化矮牵牛获得转基因苗 <正>研究证明,阻止/减少和推迟跃变型植物中乙烯的生成可延长花卉、瓜果的保鲜期。已知 ACC 是乙烯合成的直接前体,ACC 脱氨酶(ACDS)可将 ACC 降解为丁酮酸和氨(Penrose & Glick 2001)。利... 刘飞虎 范志祥 李建永 段继强苎麻细胞质雄性不育系与保持系线粒体DNA的ISSR检测 被引量:8 2006年 采用蔗糖衬垫法提取苎麻雄性不育系与相应保持系的线粒体DNA。选用了38个ISSR引物进行ISSR-PCR扩增,在编号为ISSR-29、33、34引物中找到了苎麻不育系与相应保持系线粒体DNA之间的差异。 侯思名 段继强 梁雪妮 丁小维 刘飞虎关键词:苎麻 线粒体DNA提取 基于农艺性状和ISSR标记分析亚麻种源的变异及遗传关系 被引量:7 2009年 根据农艺性状的测定结果及ISSR标记分析结果,采用聚类分析方法对引种至云南昆明的73份亚麻(Linum usitatissimum L.)种源的变异及遗传关系进行了研究。结果表明,73份亚麻种源的10个农艺性状(包括株高、工艺长度、茎粗、单株分枝数、单株蒴果数、单株茎干质量、单株种子产量、单株纤维产量、种子千粒重和出麻率)均有一定的差异,但总体上生长状况均较好;根据农艺性状可将73份亚麻种源分成2类,每一类又可分为2组,其中,第Ⅰ类包括36份种源,第Ⅱ类包括37份种源。从40个ISSR引物中筛选出9个引物用于ISSR扩增,共扩增出54条带,其中多态性条带33条,多态性条带百分率为61.1%;基于ISSR扩增结果进行聚类分析,在相似系数0.80处可将供试的亚麻种源分成3大类:第1类包括67份种源,第2类包括4份种源,第3类仅有2份种源,在相似系数为0.82处第1类种源又可分成3个亚类。结果显示,根据农艺性状和ISSR标记进行的聚类分析结果有一定差异,但对二者进行综合分析,结合亚麻不同种源的适应性及育种目的,可培育出适于本地栽培的优良杂交后代。 杜光辉 吴丽艳 段继强 李建永 梁雪妮 刘飞虎关键词:亚麻 农艺性状 ISSR标记 聚类分析 亚麻脱胶增效菌株的分离、筛选、鉴定及其脱胶效果 <正>亚麻纤维是一种重要的纺织原料.云南亚麻原茎产量高、出麻率高、经济效益高,生产发展迅速.亚麻原茎脱胶多采用温水浸渍法,利用自然生长微生物分泌的酶实现脱胶,存在脱胶周期长、工艺条件不易控制、麻纤维质量不稳定等问题。研究... 梁雪妮 吴丽艳 段继强 刘飞虎苎麻总DNA提取的CTAB法优化方案 被引量:32 2005年 根据苎麻组织自身含有较多的酚类、粘状物及黄酮类等次生代谢物质的特点,对CTAB法进行优化后用于提取苎麻组织总DNA.在研磨过程中加入抗氧化剂PVP,提取缓冲液中加入终浓度6%的PVP和4%的β-巯基乙醇,可防止整个提取过程中溶液变褐;在第2次用氯仿/异戊醇抽提时,加入10%的CTAB和4%的N aC l高盐溶液,以除去多糖.经几种改良方案提取总DNA的ISSR-PCR扩增结果验证,以同时加入抗氧化剂和高盐溶液的CTAB-4法效果最好. 侯思名 段继强 梁雪妮 丁小维 肖伏 刘飞虎关键词:苎麻 DNA提取 CTAB法