欧程山
- 作品数:15 被引量:17H指数:3
- 供职机构:南方医科大学更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 含hTERT片段的重组逆转录病毒感染对树突状细胞功能的影响被引量:2
- 2006年
- 目的观察含人端粒酶逆转录酶(hTERT)片段的重组逆转录病毒感染对树突状细胞(DCs)功能的影响。方法 ELISA试剂盒检测DCs培养液中IL-12水平;混合白细胞(MLR)反应检测含hTERT片段的重组逆转录病毒感染的 DCs(hTERT-DCs)和未感染的DCs(N-DCs)刺激同种异体淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测DCs表面分子CD80、 CD83、CD86和HLA-DR的变化;CytoTox 96非放射性细胞毒性检测试剂盒检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。结果 hTERT-DCs和N-DCs在分泌IL-12的水平、刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力方面无明显差异;hTERT-DCs的 CD83表达水平低于N-DCs,同时,hTERT-DCs激发的CTL对端粒酶阳性的靶细胞杀伤率明显高于端粒酶阴性的靶细胞(P<0.05)。结论 hTERT-DCs尽管有可能阻止DCs自身的成熟,但在活化淋巴细胞、刺激淋巴细胞分化增殖的能力方面并没发生明显改变,并且还能激发hTERT特异性CTL。
- 胡贵方孙莉莎金宏欧程山蒋毅萍庞建新
- 关键词:HTERT逆转录病毒树突状细胞免疫治疗
- p53,miR-365在紫外线诱导小鼠胚胎成纤维细胞S期阻滞中作用被引量:2
- 2012年
- 目的探讨中波紫外线(UV-B)应激下p53调控细胞周期阻滞过程中miR-365的作用。方法用50 J/m2的UV-B分别照射p53正常表达的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和p53低表达的MEF,分别在照前和照后不同时间点用流式细胞术检测细胞周期分布情况;用逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹(Western blot)分别检测p53在mRNA和蛋白表达水平的改变;用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-365的表达情况。结果 50 J/m2的UV-B照射后18 h,p53正常表达的MEF出现S期阻滞,并在照后24 h出现明显的凋亡峰,而在p53低表达的MEF中未观察到此变化;2种细胞其p53的mRNA表达水平在照后未见明显改变;p53正常表达的MEF的p53蛋白在照后1 h开始升高,至12 h达到峰值,24 h开始下降;而在p53低表达的MEF中p53蛋白未见明显改变;UV-B照射后p53正常表达的MEF中miR-365在照后4 h升高(P<0.05),并持续到照后8 h,照后12 h恢复到照前水平;而在p53低表达的MEF中miR-365无明显变化。结论UV-B照射可能通过转录后调控作用提高细胞p53蛋白水平进而发挥其诱导细胞S期阻滞的作用;miR-365参与了p53蛋白诱导S期阻滞的过程。
- 江丽红欧程山柳维林郭院霞丁振华周美娟
- 关键词:中波紫外线P53小鼠胚胎成纤维细胞
- 辐射损伤后小鼠外周血一氧化氮变化
- 2008年
- 一氧化氮(NO)是一种第一和第二信使分子,在体内NO是由L-精氨酸(L-Arg)与O2在一氧化氮合酶(NOS)的作用下合成的。机体受到一定的应激因素作用后,体内诱导型NOS的合成增加,进一步导致NO的含量增加。电离辐射作用于机体时,导致NOS的增加,
- 周美娟李培平欧程山查永如丁振华
- 关键词:鼠外周血诱导型NOSL-精氨酸信使分子应激因素
- 辐射损伤对小鼠血清及肝脏一氧化氮的影响被引量:3
- 2008年
- 目的探讨辐射损伤后外周血及肝脏NO的变化。方法以9.0Gy电离辐射全身均匀照射NIH小鼠,然后立即置于室温环境中,并分别于照前,照后各不同时间点获取血清和肝细胞匀浆,分别测各自的NO浓度。结果大剂量电离辐射作用后,外周血血清和肝细胞匀浆中NO浓度均升高,但外周血NO浓度值在照后3h开始升高,而肝细胞匀浆在照后6h开始升高。结论电离辐射能引起小鼠外周血及肝脏中NO浓度增加,但不同组织的反应强度不一致。
- 欧程山江丽红叶青周美娟
- 关键词:NO血清肝脏
- 一种抗皮肤鳞状细胞癌药物antagomir-365-2
- 本发明公开了一种抗皮肤鳞状细胞癌药物antagomir-365-2,所述antagomir-365-2是一种经化学修饰的反义寡核苷酸,其核苷酸序列见SEQIDNO:1,序列的5'端连续2个碱基以及3'端连续4个碱基经硫代...
- 周美娟丁振华柳维林郑莉欧程山
- 一种8Gy电离辐射的检测方法
- 本发明公开了一种电离辐射的检测方法,其包括以下步骤:1)将实验动物置于辐射环境中,照射完成后取出;2)照射完毕24小时后抽取实验动物血清;3)检测实验动物血清外泌体中的miRNA电离辐射标志物,当miRNA含量超过未受照...
- 周良丁振华张颖郝帅周美娟欧程山
- 文献传递
- 放射医学教案准备的几点体会
- 2006年
- 教案是课堂教学的基础和关键环节。放射医学涉及的知识面比较广,因此对教案的要求就更高。要切实提高教师教学水平、确保课堂教学质量、保证教学效果,放射医学教案的准备就要从教学对象、教材内容和教案布局等几方面入手。
- 欧程山周美娟丁振华
- 关键词:教案教学效果
- 含hTERT基因片段重组逆转录病毒的构建被引量:1
- 2005年
- 目的构建含hTERT基因片段的重组逆转录病毒. 方法采用RT-PCR法从人白血病细胞株K-562中扩增hTERT基因片段(1590~2540bp),亚克隆至逆转录病毒表达载体pLXSN,构建重组质粒pLXSN-hTERT;用脂质体转染的方法将从重组质粒转入PT67细胞,G-418压力筛选获得含hTERT基因片段的重组逆转录病毒细胞克隆;0.22μm微孔过滤抗性克隆上清获得含表达hTERT基因的重组逆转录病毒;Western Blot检测G-418抗性克隆的hTERT产物的表达.结果PCR扩增的hTERT基因片段与GenBank公布的序列相比仅有2个核苷酸差异,氨基酸序列完全一致;重组病毒的滴度为2.85×105PFU/ml;Western Blot检测到含hTERT基因片段的重组病毒能够表达出一分子量为37kD的多肽. 结论成功构建了表达hTERT基因片段的重组逆转录病毒,为进一步探讨内源性表达hTERT基因产物的树突状细胞能否激发特异性CTL的产生奠定了坚实的基础.
- 胡贵方孙莉莎欧程山蒋毅萍庞建新
- 关键词:HTERT基因表达逆转录病毒
- 人源性14-3-3σ真核表达载体的构建及鉴定
- 2010年
- 目的:构建人源性14-3-3σ真核表达载体pCMV-Myc-SFN,并观察其在真核细胞中的表达。方法:通过反转录-聚合酶链反应从HeLa细胞(人宫颈癌细胞系)中获得编码14-3-3σ的cDNA,定向克隆至真核表达载体pCMV-Myc中,经酶切和测序鉴定正确后,应用脂质体法转染HeLa细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内14-3-3σ的表达。结果:构建了真核表达载体pCMV-Myc-SFN,将其转染HeLa细胞48h后,蛋白免疫印迹法检测到细胞内14-3-3σ的表达显著增高。结论:成功构建了真核表达载体pCMV-Myc-SFN,为研究14-3-3σ在上皮细胞源性肿瘤中的作用奠定了基础。
- 甘露朱阅伟周美娟欧程山丁振华
- 关键词:上皮性恶性肿瘤真核表达载体
- 乙型肝炎表面抗原基因重组2型腺相关病毒的免疫原性研究
- 2005年
- 目的观察含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的2型重组腺相关病毒(rAAV-2-HBsAg)在Balb/c小鼠体内的免疫原性。方法以5×1011的重组病毒颗粒单次注射Balb/c小鼠,RT-PCR扩增肝脏组织中HBsAg基因cD-NA:ELISA检测肝组织中HBsAg的表达;RIA法检测血清中表面抗体(抗一HBs)滴度;51Cr释放分析检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果外源性HBsAg基因己整合到肝细胞染色体DNA并有效地转录和翻译,表达水平最高可达33.8pg/(mglivertissue),rAAV-HBsAg免疫小鼠后可以诱导机体产生表面抗体并激发特异性CTL。结论外源性HBsAg基因可以转移到小鼠肝细胞并稳定表达;rAAV-2-HBsAg免疫小鼠可以同时诱导体液和细胞免疫反应的出现。提示基于rAAV-2载体的乙型肝炎(HBV)疫苗,对于防止HBV感染,尤其是作为慢性乙型肝炎的治疗性疫苗可能只有潜在的应用价值,值得做进一步的系统研究。
- 欧程山胡贵方陈清吴小兵俞守义