梁逢奇
- 作品数：8 被引量：20H指数：3
- 供职机构：武汉市中心医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RhoA在卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭和迁移过程中的作用被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨RhoA在卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭和迁移过程中的作用。方法:构建RhoA真核表达载体,以脂质体介导转染卵巢癌细胞SKOV3,用RT-PCR和Westernblot检测SKOV3RhoAmRNA及蛋白表达水平;Boyden小室体外侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果:转染RhoA的实验组与转染空载体的对照组比较,RhoAmRNA的表达丰度(RhoA/GAPDH)为12.01±1.72,明显高于对照组的6.81±1.24;RhoA蛋白的表达水平(RhoA/β-actin)为4.81±0.56,亦明显高于对照组的3.02±0.32,两者差异都有统计学意义(P<0.05)。Boyden小室体外侵袭实验中实验组与对照组平均侵袭百分数分别为(47.60±1.47)%和(22.60±2.40)%(P<0.05),比较划痕后0h与24h的宽度差,实验组和对照组愈合百分比分别为(65±6.4)%和(54±5.5)%(P<0.05);表明转染RhoA后,细胞侵袭和迁移能力明显增强。结论:RhoA增强了卵巢癌细胞SKOV3体外侵袭和迁移能力。
- 赵良平王薇娜张庆华田训黄磊梁逢奇熊国平马丁
- 关键词：RHO因子RHOAGTP结合蛋白卵巢肿瘤细胞
- RNA干扰下调RhoA表达对卵巢癌细胞SKOV-3恶性表型的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨RNA干扰(RNAi)下调RhoA表达对卵巢癌细胞SKOV-3恶性表型的影响。方法:构建RhoA基因特异性短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,以脂质体介导转染卵巢癌细胞SKOV-3,RT-PCR和蛋白质印迹法检测RNAi后SKOV-3中RhoA的mRNA及蛋白表达水平变化;Boyden小室体外侵袭和划痕实验观察细胞侵袭和迁移能力,MTT比色法测定转染前后细胞增殖及粘附能力的变化。结果:转染RhoA shRNA的实验组细胞与转染空载体的对照组细胞比较,RhoA mRNA的表达分别为(5.46±2.02)%和(56.37±17.42)%,蛋白质的表达分别为(6.03±2.04)%和(59.03±19.94)%,细胞平均侵袭百分比为(15.84±4.17)%和(33.64±4.64)%,愈合百分比为(44.79±6.21)%和(68.36±4.46)%,增殖能力(A值)分别为0.726±0.166和1.703±0.340,P<0.05(n=3);而粘附能力(A值)分别为0.833±0.137和0.894±0.189,P>0.05(n=3)。结论:通过RNAi降低RhoA的表达能降低卵巢癌细胞SKOV-3体外侵袭、迁移和增殖能力。
- 赵良平王薇娜张庆华石晓燕梁逢奇吴汝芳马丁冯玲
- 关键词：RNA干扰RHO因子表型
- 蛋白质组学技术探寻宫颈癌相关抗原被引量：1
- 2007年
- 目的:应用蛋白质组学技术探寻宫颈癌相关抗原。方法:先用双向电泳(2-DE)分离宫颈癌患者的癌组织和癌旁正常组织中抽提的蛋白质混合物,再以免疫印迹将凝胶上的蛋白质转移到尼龙膜,继而与患者血清杂交显色后通过比较两者的反应性来筛选目的蛋白,最后运用质谱技术鉴定目的蛋白。结果:组织蛋白经2-DE分离、转膜后与患者血清杂交、显色,癌组织来源的蛋白质呈阳性反应。对应的癌旁正常组织来源的蛋白质呈阴性反应的蛋白质点有4个,切取其中1个经质谱鉴定为β微管蛋白Ⅳb(Beta tubulin Ⅳb)。β微管蛋白Ⅳb在宫颈癌患者体内发生体液免疫产生了抗体。结论:β微管蛋白Ⅳb可能是宫颈癌的相关抗原;蛋白质组学技术与血清学相结合是探寻肿瘤相关抗原的新方法。
- 赵良平王薇娜张庆华黄磊梁逢奇田训卢运萍马丁
- 关键词：蛋白质组学宫颈肿瘤
- 阻抑低氧诱导因子-1α逆转卵巢癌化疗耐药的研究
- 黄磊张庆华敖启林袁静萍苏文敬田训赵良平胡轶梁逢奇颜琳沈健
- (1)课题来源与背景：武汉市青年科技晨光计划项目(编号：200750731294)低氧通过上调低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达水平促进卵巢癌化疗耐药，传统镇咳药“那可丁”作为靶向抑制HIF-1α的小分子化合物，...
- 关键词：
- 关键词：卵巢癌药物治疗
- RhoC过表达对人脐静脉内皮细胞体外迁移及血管生成能力的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨RhoC基因过量表达对内皮细胞体外迁移及血管生成过程的影响。方法构建RhoC真核表达载体,以脂质体转染人脐静脉内皮细胞(HUVE),采用RT-PCR和Western blot检测RhoC的mRNA及蛋白表达水平;划痕实验检测细胞迁移能力;胶原基质胶三维培养检测内皮细胞体外血管生成能力。结果转染RhoC实验组与空载体对照组比较,RhoC mRNA和蛋白表达明显增高;细胞迁移能力和血管样结构生成能力明显增强。结论RhoC高表达能促进人脐静脉内皮细胞体外迁移及血管生成。
- 赵良平张庆华王薇娜田训梁逢奇黄磊熊国平马丁
- 关键词：RHOC人脐静脉内皮细胞细胞迁移血管形成
- 短发夹状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢上皮性癌细胞对紫杉醇敏感性的研究被引量：3
- 2006年
- 翁丹卉邢辉邓友星梁逢奇黄磊李芳卢运萍马丁
- 关键词：短发夹状RNA卵巢上皮性AKT2敏感性紫杉醇
- 纤维粘附素介导的卵巢癌细胞粘附耐药的实验研究
- 2005年
- 目的:探讨纤维粘附素(FN)介导的卵巢癌细胞与胞外基质粘附对耐药的影响,并检测细胞粘附耐药时凋亡抑制基因Survivin的表达。方法:建立FN介导的细胞粘附模型,设定为粘附耐药(FN)组,以未铺纤维粘附素接种细胞为对照(NOFN)组。经细胞增殖实验(MTT)检测不同浓度(0.1、1.0、10.0、100.0μmol/L)紫杉醇(Taxol)对粘附耐药组和对照组细胞(A2780、SW626)生存率的影响,用流式细胞仪(FACS)检测2组细胞50μmol/L紫杉醇作用24h后的细胞凋亡率,蛋白质免疫印迹法(Westernblot)和流式细胞仪(FACS)检测细胞粘附耐药形成前后Survivin蛋白的表达。结果:MTT检测结果显示细胞株A2780和SW626经不同浓度的紫杉醇作用后FN组细胞生存率均明显高于NOFN组(P均<0.05)。FACS检测结果显示两株细胞FN组细胞凋亡率均明显低于N0FN组(P均<0.05)。Westernblot和FACS法检测结果显示,两株细胞FN组Survivin蛋白表达均明显高于N0FN组(P<0.05)。结论:纤维粘附素(FN)可能通过上调Survivin的表达介导卵巢癌细胞粘附耐药。
- 梁逢奇邢辉翁丹卉黄磊李芳卢运萍马丁
- 关键词：纤连蛋白类紫杉属SURVIVIN
- 短发卡状RNA抑制AKT2基因表达增强卵巢癌细胞对紫杉醇敏感性的研究被引量：4
- 2007年
- 目的:构建AKT2基因特异性短发卡状RNA(shRNA)真核表达载体,观察RNA干扰(RNAi)技术,对人卵巢癌A2780和SKOV3细胞中AKT2蛋白激酶表达的抑制作用,并探讨其促进细胞凋亡的机制。方法:运用基因工程技术,设计合成针对AKT2 mRNA的特异性shRNA,构建真核表达载体pAKT2-shRNA。将pAKT2-shRNA经脂质体(LipofectamineTM2000)包裹转染人卵巢癌A2780和SKOV3细胞,荧光显微镜观察细胞内DsRed红色荧光蛋白的表达,计算转染效率,半定量RT-PCR(Semi-quantitativeRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测AKT2的表达及干扰效率,流式细胞学检测法(FACS)检测细胞凋亡率,比较抑制AKT2基因前后卵巢癌细胞抵抗凋亡能力。结果:成功构建了pAKT2-shRNA载体。A2780和SKOV3细胞转染pAKT2-shRNA后,荧光显微镜下观察转染效率约40%;Semi-quantitativeRT-PCR和Western blot检测结果示,转染后AKT2 mRNA和蛋白表达均显著降低。FACS检测结果显示,转染pAKT2-shR-NA后,紫杉醇25nmol/L处理细胞12h,与空白对照组和阴性对照组相比,细胞凋亡率显著增加,P<0.05。结论:构建的pAKT2-shRNA真核表达载体能有效抑制AKT2基因表达;运用RNAi技术,降低卵巢癌细胞中AKT2基因表达水平,能增强肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,促进肿瘤细胞凋亡。
- 翁丹卉邢辉邓友星梁逢奇黄磊李芳马丁卢运萍
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰
