梁斌
- 作品数：16 被引量：37H指数：4
- 供职机构：桂林医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西教育厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 乙型肝炎病毒通过自分泌运动因子/溶血磷脂酸信号损伤对糖稳态的作用及其机制研究
- 2024年
- 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)通过自分泌运动因子(ATX)/溶血磷脂酸(LPA)信号对糖稳态的损伤作用及相关机制。方法利用基因芯片数据库分析HBV对ATX表达的影响。Western blotting检测HBV细胞株HepG2215、稳定表达HBV反式调节蛋白HBx和PreS2的HBx-HepG2和PreS2-HepG2细胞、对照组HepG2细胞的ATX蛋白表达水平。双萤光素酶报告基因检测HBx和PreS2对ATX启动子作用。构建稳定表达HBx和Pre-S2的小鼠分泌胰岛素细胞HBx-NIT、PreS2-NIT,检测两者对胰岛素分泌的影响。利用rAAV8-1.3HBV经尾静脉注射C57BL/6小鼠复制HBV小鼠模型,NC为注射同体积生理盐水的C57BL/6小鼠。小鼠按2 g/kg腹腔注射葡萄糖进行糖耐量试验(GTT)。采用液相色谱-质谱联用法、酶联免疫吸附试验和血糖分析仪分别检测小鼠血清LPA、血清胰岛素和血糖浓度。结果HepG2215细胞ATX蛋白相对表达量高于HepG2(P<0.05)。PreS2与ATX启动子共转染组萤光素酶活性高于ATX启动子转染组(P<0.05),HBX与ATX启动子共转染组的萤光素酶活性高于ATX启动子转染组(P<0.05)。HBx-HepG2细胞ATX蛋白相对表达量高于HepG2细胞(P<0.05),PreS2-HepG2细胞高于HepG2细胞(P<0.05)。添加不同浓度LPA后NIT细胞胰岛素分泌表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。1~3μmol/L LPA相对表达量与胰岛素分泌呈负相关(r=-0.990,P<0.05)。HBx-NIT细胞添加Ki16425前的胰岛素水平低于NIT细胞(P<0.05),PreS2-NIT细胞低于NIT细胞(P<0.05)。NIT、HBx-NIT和PreS2-NIT细胞添加Ki16425后的胰岛素水平较添加前高(P<0.05)。实验组血清LPA相对表达量、平均空腹血糖浓度、注射葡萄糖后的60、120 min平均血糖浓度和血糖浓度曲线下面积(AUC)平均值较对照组高(P<0.05)。实验组注射葡萄糖后15 min血清胰岛素浓度、血清胰岛素水平的AUC值较对照组低(P<0.05)。用HBV小鼠GTT血糖AUC绘制的ROC曲线显示,曲线面积为0.770(95%CI:0.556,0.984),特异性为60.00%(95%CI:0.122,0.73
- 朱政全梁斌石明连谷云艳周先丽梁成钦刘永明苏何玲
- 关键词：乙型肝炎病毒
- 乙型肝炎病毒对miR-10b表达的影响及其生物信息学分析
- 2021年
- 目的应用生物信息数据库分析和分子生物学方法检测乙型肝炎病毒(HBV)对微小RNA(miR-10b)表达的影响,以及生物信息学方法探讨HBV影响的miR-10b异常表达在肝脏疾病中的作用。方法以GEO2R分析miRNA表达芯片GSE19980中miR-10b的表达水平,荧光定量聚合酶链反应(PCR)验证分析结果。Targetscan、miRTarBase、miRDB和DIANA TOOLS分析miR-10b的靶基因并用韦恩图进行筛选。应用DAVID数据库对miR-10b靶基因数据集进行基因本体(GO)功能富集分析。采用STRING分析软件进行KEGG信号通路分析。GEO2R分析HBV诱导的肝细胞癌及其邻近正常组织的差异表达基因,并与miR-10b靶基因进行韦恩图筛选以获得交集靶基因,然后用STRING分析蛋白质的相互作用,得到miR-10b靶基因的核心蛋白基因。结果miR-10b在稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞中表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);miR-10b靶基因主要富集在转录调控、转录因子活性、参与转录因子复合体等相关蛋白基因;miR-10b的靶基因富集在蛋白多糖、miRNA、cAMP信号通路;miR-10b靶基因编码蛋白的相互关系分析获得CREB1、NCOA6、NCOR2、PIK3CA、GATA3、MAPRE1、TIAM1等核心蛋白,其功能涉及糖稳态调节、炎症、肿瘤发生和发展。结论HBV上调miR-10b表达,高表达的miR-10b对其靶基因的沉默可能在HBV感染的肝脏疾病中发挥着重要作用。
- 梁俐兰刘莉莉覃超梅梁斌石明连刘永明苏何玲
- 关键词：乙型肝炎病毒MIR-10B肝脏疾病生物信息学分析
- PBL教学法在微生物工程实验教学中的应用被引量：1
- 2018年
- 微生物工程是一门实践性很强的课程,为提高教学质量,在微生物工程实验教学中尝试引入PBL教学法。结果表明,在微生物工程实验中实施PBL教学法,可训练学生科学的思维方法,提高学生的职业技能,培养学生的创新能力。
- 谢琦梁斌唐颖林军王凛周先丽
- 关键词：PBL教学改革
- 设计性实验与大学生科技创新活动有机融合的教学模式的探讨被引量：7
- 2012年
- 通过深入分析设计性实验的开设与开展大学生科技创新活动的重要意义,并结合多年的教学实践与思考,创造性地提出将大学生科技创新活动引入设计性实验教学课堂的教学模式改革理念,并对这一改革模式的总体思路和具体实施方案做了详尽的分析,此教学模式改革有利于创新实践人才的培养。
- 李红艳梁斌黄健
- 关键词：科技创新活动
- 不同剂量柚皮素对CNE2细胞生长的双向调节作用及其机制研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨不同剂量柚皮素(naringenin)对人鼻咽癌CNE2细胞生长的影响及其相关作用机制。方法以不同剂量(0、5、10、20、40、60、80、100、200、400、800μg·mL^(-1))柚皮素处理CNE2细胞,作用不同时间(24、48、72 h)后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长率的变化;以较高剂量(0、200、400μg·mL^(-1))柚皮素处理CNE2细胞48 h,进行Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡形态变化及细胞周期流式检测;以不同剂量(0,40,200μg·mL^(-1))柚皮素处理CNE2细胞,作用不同时间(24、48 h)后,通过流式细胞仪对其活性氧含量(R0S)进行测定,并对其增殖凋亡调控相关基因P53及C-fos进行mRNA表达水平的检测。结果不同剂量柚皮素对CNE2细胞的生长具有双向调节作用,较低剂量能使CNE2细胞内活性氧含量低水平升高,从而激活细胞增殖信号途径,通过诱导C-fos(p<0.01)及抑制P53(P<0.01)基因的表达体现为促进癌细胞增殖的活性;较高剂量能引发CNE2细胞内活性氧大量产生,从而激活细胞凋亡信号途径,通过诱导P53(P<0.01)及抑制C-fos(P<0.01)基因的表达,对细胞周期产生阻滞(p<0.01)并诱导细胞凋亡,有效抑制癌细胞的增殖。结论不同剂量柚皮素对CNE2细胞生长具有双向调节作用,较低剂量体现为促癌活性,较高剂量则体现为强烈的抑癌活性。
- 李红艳梁斌陈志婷胡春萍黄健
- 关键词：柚皮素CNE2促癌抑癌
- GST融合蛋白活性测定条件的优化
- 2016年
- 谷胱甘肽硫转移酶（GST,EC2.5.1.18）是一种广泛分布于动植物和微生物体内,具有多种生理功能的同工酶家族.在医学研究中,由于它是生物体内重要的解毒酶系,其在体内活性的高低与代谢环境致癌物和化疗药物能力之间的关系受到人们的关注.
- 梁斌谢琦
- 关键词：谷胱甘肽硫转移酶分光光度法活性测定
- 乙型肝炎病毒X蛋白对autotaxin表达的影响及其意义被引量：3
- 2017年
- 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对autotaxin(ATX)表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-ATX,共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx的HepG2.HBx细胞,Western blot检测HBx对ATX蛋白表达的影响。结果共转染检测显示,pcDNA3.1(+)-HBx和pGL3-ATX共转染组的荧光素酶活性是空载体pcDNA3.1(+)和pGL3-ATX共转染组的1.47倍(P<0.000)。Westernblot检测显示,HepG2.HBx细胞ATX蛋白表达显著升高,为HepG2细胞的1.75倍(P<0.05)。结论 HBx可激活ATX基因启动子,上调ATX的表达,提示HBV感染可增强ATX/溶血磷脂酸的信号转导。
- 肖雅伦苏何玲谭燕莲梁斌谷云艳莫之婧黄红丽刘永明
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白AUTOTAXIN
- 浅谈PBL教学模式在生物化学教学中的重要性被引量：13
- 2017年
- PBL教学法是一种新型教学方法和教学理念,其目的是培养学生自主学习和综合思考问题的能力。为了解决学生在学习生物化学这门课程时面临的困难,需将PBL教学法应用到生物化学的实践教学中。因此,本文对生物化学这门课程的教学现状进行了总结与分析,最后从多个方面提出了PBL教学法在生物化学教学中的重要性。
- 周先丽苏何玲刘永明梁斌梁成钦谢琦
- 关键词：生物化学PBL
- 佛手瓜鲨烯合酶基因克隆及酶分子结构分析被引量：3
- 2016年
- [目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5'末端保守序列和3'race方法扩增的佛手瓜SQS基因3'末端序列设计佛手瓜SQS基因克隆引物。扩增的佛手瓜SQS基因片段插入p GEM-T Easy Vector后经DNA测序。应用生物信息学方法分析克隆序列的开放阅读框架(ORF)、酶蛋白的疏水性/亲水性和蛋白质磷酸化位点,预测酶蛋白的二级结构、结构域、三级结构和跨膜区。以布朗葡萄藻为outgroup,应用MEGA 5.0进行UPGMA算法构建系统树,并进行1 000次的Bootstrap测试。[结果]佛手瓜SQS由417氨基酸残基构成,等电点为6.983。构象预测提示该酶二级结构以α螺旋为主,是一种只有三级结构的单体酶,其活性中心是主要由几个α螺旋围绕形成的穴状结构,酶蛋白肽链中具有1个跨膜区。结构域分析表明SQS属于异戊二烯合酶家族。磷酸化位点分析显示该酶共有17个磷酸化位点,其中,S48位于与酶活性中心相关模体中,而S196为陆生植物SQS基因的正选择位点。以佛手瓜SQS基因ORF序列构建系统发生树得到的系统发生分类结果与形态学分类结果一致。[结论]佛手瓜SQS是由417氨基酸残基构成的单体酶,具有1个跨膜区和17个磷酸化位点,其中,S48和S196可能是佛手瓜SQS酶活性调节的关键性磷酸化位点。
- 苏何玲肖雅伦谭燕莲梁斌谷云艳刘永明吴耀生
- 关键词：佛手瓜鲨烯合酶基因克隆
- 人精子特异性抗原表位肽及其多聚体和应用
- 本发明提供了一种新的人精子特异性抗原表位肽(SSEP)，即SSEP12及其多聚体和应用。SSEP12氨基酸序列为：TRRIHRHMTIRR(Thr Arg Arg Ile His Arg His Met Thr Ile ...
- 刘永明苏何玲梁斌谭燕莲黄红丽朱金清
- 文献传递
