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共表达H5亚型禽流感病毒HA基因和鸡白介素6基因的重组鸡痘病毒对鸭的免疫效力: 前言家鸭在禽流感病毒的传播中发挥着重要作用,研制有效控制家鸭高致性禽流感的疫苗是目前的热点之一。已有研究表明以鸡痘病毒(FPV)为载体的基因工程疫苗可用于鸭高致病性禽流感的预防,但其免疫保护效力并不理想。本研究以鸡痘病毒...; 钱程陈素娟丁平云柴茂许晨旭甘军纪彭大新刘秀梵; 文献传递

H5N1亚型禽流感病毒缺失跨膜区M2基因的原核表达及其单克隆抗体的制备: 2014年; 为制备针对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)M2蛋白的单克隆抗体,将H5N1亚型AIV缺失跨膜区的M2基因(sM2)克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,通过IPTG诱导表达,获得可溶性的36ku sM2融合蛋白。以100μg纯化的sM2融合蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。以sM2融合蛋白作为包被抗原,通过ELISA方法检测,将M2融合蛋白抗原检测阳性、GST抗原检测阴性的杂交瘤细胞进行克隆筛选,获得4株单克隆抗体,分别被命名为1A9、2D4、3E6和4E7,亚类分别为IgG2b、IgG1、IgG2a、IgG2a。间接免疫荧光试验显示,单克隆抗体与不同clade的H5亚型AIV感染的MDCK细胞均产生特异性荧光反应,可用于H5亚型AIV的检测。; 柴茂许晨旭管萌刘开春陈素娟彭大新刘秀梵; 关键词：H5N1亚型禽流感病毒单克隆抗体

共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒免疫抗体消长规律及免疫效力研究被引量：4: 2012年; 为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加均无影响,而野生型鸡痘病毒均可抑制鸡体质量增加。翅部皮下注射疫苗组能够产生较高的血凝抑制(HI)抗体水平,免疫21d后抗体水平达到高峰,28d后开始下降,49d时仍保持在一定的水平。免疫SPF鸡21d后攻毒,表明该重组病毒能使经滴鼻攻毒的SPF鸡抵抗H5亚型AIV的致死性攻击,保护率为95%,与油苗组相同,与单表达H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒组(40%)差异显著;攻毒后3、5、7d采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况,结果发现第3天排毒率最高,其中rFPV-AIH5AIL6免疫组排毒率为最低,显示IL-6在rFPV-AIH5IL6免疫过程中起到了免疫佐剂的作用,这为研制新型的禽流感重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。; 陈素娟丁彦红钱程柴茂彭大新刘秀梵; 关键词：禽流感病毒 HA基因重组鸡痘病毒

共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒的遗传稳定性研究被引量：1: 2012年; 为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的遗传稳定性,本研究将其接种CEF,绘制生长曲线。结果显示,该重组病毒与亲本病毒的生长速度及蚀斑大小一致;在CEF连续培养20代,取第0代、5代、10代、20代重组病毒PCR扩增HA和IL-6基因进行鉴定,显示HA基因无核苷酸突变,IL-6基因在第20代时有1个氨基酸发生突变,但不影响该蛋白的功能区;间接免疫荧光试验证明所选代次病毒均能够表达HA蛋白,RT-PCR试验表明各代次病毒均可以表达鸡IL-6基因;通过蓝斑鉴定重组病毒纯度,结果显示所有蚀斑均为蓝斑。因此,该重组鸡痘病毒具有良好的遗传稳定性,符合兽医生物制品的生产要求。; 陈素娟丁彦红钱程柴茂彭大新刘秀梵; 关键词：HA基因重组鸡痘病毒

鹅源坦布苏病毒SHYG株的分离与鉴定被引量：12: 2013年; 【目的】分离鹅源坦布苏病毒,并研究其对雏鹅的致病性。【方法】用RT-PCR方法对江苏省3个鹅场送检的产蛋期病鹅样品进行检测;对坦布苏病毒核酸阳性的样品进行病毒分离,测定分离病毒的生物学特性和E蛋白基因序列。【结果】这些样品中坦布苏病毒呈阳性;从病料中分离鉴定一株病毒,命名为SHYG。E蛋白基因序列同源性比对显示其与中国鸭源坦布苏病毒同源性达到99.3%;生物学特性研究表明该病毒可致Vero细胞病变,对小鼠无致病性,接种2周龄雏鹅出现精神沉郁、腹泻、神经症状甚至死亡;组织学变化可见肝脏淤血、胆小管扩张、脂肪变性;肺淤血、炎性渗出及含铁血黄素沉着,脾脏网状内皮细胞空泡化,肾出血,脑充血、胶质细胞增生。【结论】坦布苏病毒SHYG株对雏鹅有较强的致病性。; 潘金金邹晓艳李鑫宿春虎柴茂姜逸胡艳芬赵国王彦红石火英陈素娟彭大新

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柴茂