林道红
- 作品数：18 被引量：44H指数：4
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- 大鼠心室肌M_3受体与间隙连接蛋白43作为抗心律失常药物靶点的综合研究被引量：11
- 2006年
- 目的在蛋白质分子水平研究心律失常相关蛋白质M3受体与间隙连接蛋白43之间的结构相互作用,并为其作为筛选药物靶点提供依据.方法通过免疫组化结合激光共聚焦显微镜,及免疫沉淀与免疫印迹技术,研究M受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位关系.结果证实了大鼠心室肌细胞膜蛋白中M1～M5等5个亚型的存在;观察到大鼠单个心肌细胞膜上M3受体与间隙连接蛋白43的结构性共定位;发现M受体各亚型与间隙连接蛋白43均存在结构整合,且一定浓度离子型去垢剂可破坏M3受体与间隙连接蛋白43的结构整合关系,并进一步发现参与M3受体结构整合的是间隙连接蛋白43的磷酸化形式.结论大鼠心室肌M受体亚型与间隙连接蛋白43的磷酸化形式存在结构性共定位关系,且可被一定浓度离子型去垢剂破坏.
- 张勇岳朋肖静于海雁潘振伟林道红吕延杰杨宝峰
- 关键词：心室肌细胞膜M受体间隙连接蛋白43
- 白藜芦醇能够修复离体缺血再灌注损伤大鼠心脏M_3受体与间隙连接蛋白43间结构及功能性整合被引量：6
- 2007年
- 为了探讨白藜芦醇是否能通过影响M3受体和间隙连接蛋白43(Cx43)间结构及功能性整合发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用,应用免疫共沉淀、免疫印迹及免疫荧光技术研究白藜芦醇对M3受体与Cx43间结构及功能性整合的影响。结合大鼠离体II导联心电图及心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测观察白藜芦醇是否能恢复心肌缺血再灌注损伤。白藜芦醇能修复心肌缺血再灌注损伤所致的M3受体与Cx43间结构及功能性整合的破坏及纠正Cx43表达异常。同时QRS波时限?SOD及MDA的改变也得到相应恢复。白藜芦醇能修复M3受体与Cx43间结构及功能性整合而发挥抗缺血再灌注损伤作用。
- 肖静岳朋王莹张勇霍蓉王宁林道红吕延杰杨宝峰
- 关键词：白藜芦醇缺血再灌注损伤M3受体间隙连接蛋白43
- 优化心肌膜蛋白提取方法及心肌缺血时间隙连接蛋白43的表达变化(英文)被引量：3
- 2005年
- 目的优化膜蛋白提取方法,以便研究心肌缺血时connexin43(间隙连接蛋白43)的表达变化。方法①差速离心法结合溶剂提取法提取心肌膜蛋白,溶解膜蛋白时比较了6组方案,通过各组方案在聚丙烯酰胺凝胶电泳中条带分布差异筛选出最佳方案,分析心肌细胞膜表面受体表达。②通过左冠脉结扎造成对照组、5min、20min、60min心肌缺血组,研究缺血时心肌connexin43表达变化。结果①最终选择RIPA含4%SDS来溶解膜蛋白,并成功检测出connexin43,βactin(管家蛋白),M受体(毒蕈碱型乙酰碱受体)等膜蛋白。②免疫印迹技术检测缺血不同时相connexin43表达变化,5min、20min、60min缺血组相对对照组分别减少20%、60%、76%。结论应用此方案能成功提取心肌膜蛋白,为进一步研究心肌缺血时connexin43的表达变化奠定了基础。
- 肖静岳朋潘振伟王宁张勇于海燕林道红杨宝峰
- 关键词：膜蛋白间隙连接蛋白43免疫印迹聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 大鼠胎脑组织的冻存及体外培养并实验性移植的研究
- 该文应用同种脑组织移植治疗帕金森氏病及脑外伤、垂体功能低下等引起的中枢神经系统功能障碍已在基础与临床研究方面职得较大进展.然而,由于脑组织移植的供体组织多为新鲜的胎脑组织,为临床的脑组织移植的择期手术带来许多困难.因此,...
- 林道红
- 关键词：体外培养冷冻保存脑内移植
- 人乳头瘤病毒16型晚期基因L1的原核表达质粒的构建和鉴定被引量：1
- 2000年
- 目的 构建人类乳头瘤病毒 (HPV) 16型晚期基因 L1的原核表达质粒 ,以期从中选出能够高效表达 HPV16 L1的重组子 ,为进一步表达 L1蛋白奠定基础。方法 应用定向克隆策略 ,将 HPV16 L1基因分别克隆到原核表达载体 p Trac99A和 p ET- 2 1c中。结果 通过酶切鉴定选出了重组子 p Trc99A- HPV16 L1和 p ET- 2 1c-HPV16 L1。结论 HPV16
- 郭淑元凌虹钟照华庄敏林道红曲章义郭彩玲谷鸿喜
- 关键词：基因重组质粒
- 人乳头瘤病毒16型和11型L1基因双价重组杆状病毒转移质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2003年
- 目的 :构建人乳头瘤病毒 16型与 11型 L 1基因双价重组杆状病毒转移质粒并对其进行鉴定。方法 :采用 PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒 11型晚期基因 L 1,并对其进行克隆测序 ;利用基因重组技术将人乳头瘤病毒 16型和 11型 L 1晚期基因共同装入杆状病毒转移载体中 ,分别位于强启动子 Ppolh和弱启动子 P10之下 ;利用酶切和 PCR技术对双价重组杆状病毒转移质粒进行鉴定。结果 :PCR扩增法获得尖税湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒 11型的 L1基因 ,得到人乳头瘤病毒 16型 L1和 11型 L1基因双价重组杆状病毒转移质粒 ,经酶切电泳鉴定验证重组成功。结论 :本研究成功构建了双价重组杆状病毒转移质粒 ,为进一步构建双价 L 1蛋白表达系统进而建立双价基因工程亚单位疫苗打下基础。
- 庄敏谷鸿喜李迪孔卫兰林道红凌虹魏兰兰
- 关键词：人乳头瘤病毒16型人乳头瘤病毒11型
- M3受体激动剂对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响被引量：5
- 2009年
- 目的研究M3受体激动剂胆碱对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响。方法应用全细胞膜片钳技术记录M3受体激动剂胆碱对豚鼠单个心室肌细胞L型钙通道电流(ICa-L)的影响;采用激光扫描共聚焦技术观察细胞内钙离子的变化。结果应用10 mmol.L-1胆碱使豚鼠心室肌细胞ICa-L密度从(9.02±0.82)pA/pF减少到(5.61±0.55)pA/pF(n=4,P<0.01),5 nmol.L-14-DAMP能够使其恢复至(8.12±0.65)pA/pF(n=4,P<0.01);10 mmol.L-1胆碱抑制KCl除极诱导的心肌细胞内钙的升高,从(2.76±0.05)降至(1.37±0.05)倍(n=8,P<0.01),5 nmol.L-14-DAMP可以阻断该作用(n=8,P<0.01)。结论M3受体激动剂胆碱通过延长L型钙通道激活过程而明显抑制ICa-L,减少细胞外的钙离子内流,降低心肌细胞内钙,从而发挥抗心律失常作用。
- 栾海蓉庞晓平周宇宏隋晓红林道红杨宝峰吕延杰
- 关键词：M3受体钙离子通道膜片钳技术激光扫描共聚焦
- 人乳头瘤病毒11型L1基因原核表达系统的构建及鉴定被引量：3
- 2004年
- 目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)鄄HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础。方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序。将其从克隆重组质粒中切下连入表达载体,建立pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达重组质粒,在大肠杆菌宿主菌Top10中,经阿拉伯糖诱导,表达融合蛋白L1,经SDS鄄PAGE电泳和Westernblot进行鉴定。结果3株HPV11L1经测序发现变异一致,每株均有2个核苷酸变异,但未影响氨基酸变化。经SDS鄄PAGE鉴定L1蛋白相对分子质量为59×103,与预期值相同,Westernblot证明表达蛋白能与单克隆抗体反应,成功构建了pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达系统。结论所构建的pBAD(B)鄄HPV11L1原核表达系统能够高效表达HPV11L1蛋白。
- 庄敏谷鸿喜孔卫兰李迪魏兰兰李金梁林道红
- 关键词：人乳头瘤病毒11型L1基因原核表达系统HPV11基因表达疫苗
- 钾离子饮食PTK和PKC介导的磷酸化过程调节肾脏钾离子通道（ROMK）开放和关闭的分子生物学机制
- 我们在以前的研究中证明：刺激蛋白质酷氨酸激酶（PTK）可以抑制、而刺激蛋白质酷氨酸磷酸化酶（PTP）可以增强ROMK1通道蛋白质的功能.为了检验ROMK1通道蛋白质是否为PTK的直接底物,我们纯化了His-tagged重...
- 林道红
- 关键词：钾离子通道
- 文献传递
- LAK细胞及活化胚胎胸腺细胞对脑胶质瘤细胞的体外作用
- 2001年
- 目的 探讨体外培养后人胚胎胸腺细胞 (ETC)表面抗原的转变及进行移植的时机 ,比较不同源LAK细胞、活化ETC联合与TJ90 5细胞的体外作用效果。方法 对不同处理的人胚胎胸腺悬液培养前后观察 ,测定细胞表面抗原 ;进行LAK细胞、活化ETC体外杀瘤活性比较。结果 应用特殊培养液培养 ,可以使人胚胎胸腺上皮细胞生存2 8天 ,分离后悬液比混悬液细胞表面抗原早期达稳定 (CD4/CD8=2 .2 6 ) ;胸腺LAK细胞对TJ90 5细胞的杀伤作用与脾LAK细胞无显著性差异。结论 活化ETC在体外对肿瘤细胞无抑制作用 ,不同源LAK细胞和活化ETC联合对TJ90
- 王启弘杨富明周志红郭彩玲林道红高光强关秀茹
- 关键词：杀伤细胞表面抗原脑胶质瘤ETCLAK细胞
