杨鹭
- 作品数:7 被引量:11H指数:2
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体
- 本发明公开了一种通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体,本发明构建的抗乳腺炎转基因载体pCMV/CSN2-hLY-hIFA,在乳腺细胞中能高水平表达绿色荧光蛋白,在泌乳期的乳腺细胞中...
- 孙达权陈兴启张涌刘凤军杨鹭张东
- 文献传递
- 人-牛异种体细胞克隆胚胎构建及其线粒体来源检测
- 人-动物异种间体细胞核移植技术可利用动物的卵母细胞为核受体,以人类的体细胞为核供体构建异种间体细胞克隆胚,通过体外培养获取人源性胚胎干细胞。这项技术为获得人类干细胞以及人类器官移植开辟了一条崭新的途径。但极低的成功率限制...
- 杨鹭
- 关键词:线粒体胎儿成纤维细胞囊胚发育率桑椹胚供体细胞发育能力
- 文献传递
- 人-牛异种克隆胚构建及其线粒体来源
- 2008年
- 通过人-牛异种核移植技术获得异种克隆囊胚,便于在不消耗人类卵母细胞的情况下从异种克隆胚中分离出人类干细胞。通过透明带下注射法将人胎儿成纤维细胞和牛胎儿成纤维细胞分别注入去核牛卵母细胞中构建异种和同种胚胎,并比较两者之间的融合率、卵裂率、8-细胞发育率以及囊胚率。并对处于2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑椹胚、囊胚阶段的异种克隆胚的线粒体DNA来源进行检测。结果表明,异种克隆胚体外各个阶段的发育率均低于同种克隆胚,尤其是8-细胞到囊胚阶段的发育率,以及囊胚率都显著低于同种克隆胚(P<0.05)。异种克隆胚在2-细胞到桑椹胚阶段检测到人、牛线粒体DNA共存,囊胚阶段只检测到牛线粒体DNA。结果表明:牛卵母细胞可以重编程人胎儿成纤维细胞,完成异种克隆胚植入前的胚胎发育,异种克隆胚由于核质相互作用的不谐调,影响其发育能力,使其囊胚率显著低于同种克隆胚。牛线粒体DNA存在于植入前异种胚胎发育的各个阶段。异种克隆胚胎用于人类胚胎干细胞分离具有可行性。
- 杨鹭张东王勇胜孙达权张涌
- 关键词:异种克隆治疗性克隆体细胞核移植线粒体
- 通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体
- 本发明公开了一种通用型高效真核表达载体p3I-GFPN及采用该载体构建的抗乳腺炎的转基因载体,本发明构建的抗乳腺炎转基因载体pCMV/CSN2-hLY-hIFA,在乳腺细胞中能高水平表达绿色荧光蛋白,在泌乳期的乳腺细胞中...
- 孙达权陈兴启张涌刘凤军杨鹭张东
- 文献传递
- TSA处理供体细胞对组蛋白乙酰化和核重编程效果的影响被引量:6
- 2009年
- 克隆胚胎基因组的不完全重编程是克隆动物成功率低的主要原因。试验中以第5代牛胎儿成纤维细胞作为供体核,以牛卵母细胞作为受体胞质进行体细胞核移植,用75 nmol.L-1曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)分别处理供体细胞6、12和24 h,通过核移植检测克隆胚胎发育率,并应用激光共聚焦显微镜技术和流式细胞术检测处理细胞和克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平和细胞周期。结果显示:随着TSA处理时间的延长,供体细胞组蛋白H3K18乙酰化水平不断提高;以75 nmol.L-1TSA处理供体细胞12 h的克隆胚的囊胚发育率显著高于未处理组(23.5%vs 15.7%,P<0.05);供体细胞经TSA处理的克隆囊胚组蛋白H3K18乙酰化水平与未处理组相比差异不显著(P>0.5);处理组和对照组细胞G0/G1期和S期比例间存在显著差异(P<0.05)。结论:TSA对核供体细胞的处理存在时间效应,75 nmol.L-1TSA处理12 h的牛胎儿成纤维细胞更易被卵母细胞重编程,显著提高了克隆胚的体外发育能力,初步证实TSA是通过提高供体细胞组蛋白乙酰化水平来促进供体细胞重编程的。
- 张东杨鹭王勇胜刘根胜刘利杰万敏张涌
- 关键词:核移植曲古抑菌素A重编程