杨鹏
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南开大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：教育部留学回国人员科研启动基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 单分子PCR技术及其应用被引量：3
- 2005年
- 常规PCR技术大都以大量DNA分子(一般为105个以上)为模板进行DNA扩增。新近发展起来的单分子PCR技术是一种以极少量DNA分子(1、5或10个分子)为模板进行扩增的技术。在高保真度DNA聚合酶作用下,单分子PCR技术能扩增出高度一致的DNA;在低保真度DNA聚合酶作用下,单分子PCR技术又能构建出含有大量突变基因的DNA文库。该文将介绍单分子PCR的基本原理、实验步骤、特点及其应用。
- 杨鹏陈喜文陈洁陈德富
- 关键词：DNA聚合酶
- 利用“致死点突变筛选”策略研究AtGSTZ功能位点
- 酶的结构与功能关系密切,然而绝大多数酶的结构目前并不清楚或不完全清楚,因此酶的结构-功能关系目前了解得很少,成为蛋白质工程和基因工程研究中的一大瓶颈。酶学理论指出,酶的活性通常由被称为活性中心或活性位点的几个特定氨基酸残...
- 陈德富陈喜文刘佳杨鹏
- 文献传递
- 不同二价阳离子对T-载体生成的影响被引量：1
- 2006年
- 目的载体加dT尾是基于非模板扩增特性而发展起来的,是TA克隆技术的关键步骤之一,但实际应用中加尾率不高,为此对不同二价阳离子对载体加dT尾的影响效果进行比较,以摸索高效加尾条件。方法用限制性内切酶SmaI将质粒pGEM7Zf(+)消化成平末端的线性片段,借助二价阳离子和Taq DNA聚合酶的作用在线性片段3-′末端上添加dTTP,随后与Control Insert DNA连接成环状DNA,再转化进E.coli DH5α-FT。根据白色菌落所占比例来评价不同种类和浓度的二价阳离子对T-载体生成的影响。结果不同种类和浓度的二价阳离子加尾效果比较显示,含1 mmol/L Cd2+缓冲体系的加尾效果最佳;Co2+及高浓度的Cd2+容易导致DNA反应体系变得浑浊,甚至出现白色沉淀析出的现象。结论Cd2+最有助于加尾,Mn2+次之,Mg2+最差。
- 杨鹏陈喜文陈德富
- 关键词：T载体CD^2+正交试验
