杨慧林
- 作品数：13 被引量：16H指数：3
- 供职机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 一种合成生物学技术在鸟苷工程菌育种中的运用
- MAGE(multiplex automated genome engineering)即多重自动化基因组工程,可以实现短时间内大规模重构细胞基因组,达到细胞进化的目标.MAGE可以同时锚定细胞染色体上需要改造的多个位点...
- 廖瑜玲杨慧林潘力
- 关键词：芽孢杆菌
- 大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法
- 本发明公开了大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法，该方法包括如下几个步骤：(1)根据茂原链霉菌转谷氨酰胺酶酶原基因的核苷酸序列，设计PCR引物进行PCR扩增，克隆到原核表达载体pET22b(+)中，构建表达载体p...
- 潘力杨慧林苗小康崔翠
- 文献传递
- 透明颤菌血红蛋白在枯草芽孢杆菌WB800中的表达及其对菌体生长的影响被引量：1
- 2010年
- 通过基因工程的方法,将透明颤菌血红蛋白基因(vhb)置于大肠杆菌-枯草杆菌穿梭质粒pBEP43-DFE的强启动子P43下,构建重组质粒pBEP43-vhb,并通过化学感受态法转入枯草杆菌WB800中,转化子经过酶切和PCR验证。采用一氧化碳差异色谱法测定转入的血红蛋白基因具有表达活性。通过限氧试验表明,血红蛋白基因能在低氧环境下促进菌体的生长。
- 廖瑜玲任楠李俊星杨慧林
- 关键词：透明颤菌血红蛋白枯草芽孢杆菌
- 解淀粉芽孢杆菌ptsGHI基因的敲除及缺陷株生长特性被引量：2
- 2012年
- 在解淀粉芽孢杆菌磷酸转移酶系统中,葡萄糖主要是由ptsGHI操纵子编码的酶EI、HPr、EIIGlc转运入细胞.文中运用PCR技术,扩增出ptsG和ptsHI基因上下游的DNA片段,共约1kbp,用融合PCR连接上下游片段后,再连接到温敏型质粒pKS2上,然后电转化到解淀粉芽孢杆菌XH7中,最终构建了ptsG和ptsHI基因缺陷株.实验结果显示:在LB培养基中,ptsG及ptsHI基因缺陷株的生长状况与野生型菌株无明显差异;在含葡萄糖的LB培养基中,ptsG基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株提高了28%,且平稳期比野生型菌株要长,而ptsHI基因缺陷株的最高菌密度比野生型菌株降低了约32%,与其在LB中的生长状况基本一致;ptsG和ptsHI缺陷株及野生型菌株经鸟苷发酵实验后,ptsG基因缺陷株的鸟苷产量比野生型菌株提高了约24%,ptsHI基因缺陷株的鸟苷产量则比野生型菌株降低了约82%.以上结果表明:解淀粉芽孢杆菌ptsG基因缺陷株具有良好的生长能力和产物合成能力.
- 杨慧林王坤廖瑜玲王斌林影潘力
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌基因敲除代谢工程
- 转谷氨酰胺酶酶原在枯草芽孢杆菌WB800中的表达被引量：3
- 2011年
- 以茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)基因组DNA为模板,PCR扩增得到转谷氨酰胺酶酶原基因(pro-transglutaminase,pro-TG),经pMD18-T载体亚克隆到表达载pBEp43(+),然后转化到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB800中,经过32 h摇瓶发酵,成功表达了转谷氨酰胺酶酶原。采用胰蛋白酶激活转谷氨酰胺酶酶原,成功切除前导肽后得到成熟的转谷氨酰胺酶。牛血清蛋白(BSA)交联表明成熟的转谷氨酰胺酶具有蛋白交联的功能。本研究首次采用枯草芽孢杆菌作为宿主分泌表达了茂原链霉菌的转谷氨酰胺酶酶原,对基因工程异源表达这种特殊的食品用酶提供了新思路。
- 罗宁杨慧林沈徐凯郑明英
- 关键词：枯草芽孢杆菌分泌表达
- 基于全基因组测序和系统生物学分析的鸟苷工业生产菌分子育种研究
- 本研究以一株鸟苷工业生产菌解淀粉芽孢杆菌XH7为出发菌株，为了提高育种效率、构建高产稳定的鸟苷基因工程菌，探索了将全基因组测序和系统生物学分析方法应用于XH7菌株分子育种的可行性，并获得了如下结果： 1.解淀粉芽孢杆菌X...
- 杨慧林
- 关键词：鸟苷解淀粉芽孢杆菌全基因组测序系统生物学分子育种
- 文献传递
- 转谷氨酰胺酶酶原在大肠杆菌中的重组优化表达被引量：2
- 2012年
- 茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)转谷氨酰胺酶酶原(pro-transglutaminase,pro-TG)在重组大肠杆菌中的表达量低,限制了其在食品、化妆品、纺织行业中的应用。通过对转谷氨酰胺酶酶原的基因序列进行密码子优化,降低其GC含量,提高了它在大肠杆菌中的表达水平,结果表明经优化后转谷氨酰胺酶原的表达量达到了优化前的4.4倍。为提高转谷氨酰胺酶的比活力,通过基于融合PCR的定点突变技术将转谷氨酰胺酶第二位的丝氨酸突变为脯氨酸,突变后转谷氨酰胺酶的比活力达到了突变前的1.26倍。上述研究结果表明,密码子优化及定点突变技术可以应用于优化转谷氨酰胺酶酶原在大肠杆菌中的表达。
- 王坤杨慧林王斌潘力
- 关键词：密码子优化定点突变大肠杆菌
- 米曲霉沪酿3．042制曲过程中碱性蛋白酶的表达分析被引量：3
- 2008年
- 测定了米曲霉3.042种曲在固体制曲时碱性蛋白酶的酶活,同时利用实时定量PCR分析了碱性蛋白酶基因alp A的表达。结果显示在培养过程中,碱性蛋白酶基因转录水平和表达水平总体上都呈上升趋势,其中转录水平的增长率要比翻译水平大,说明该基因的表达调控主要在转录水平上。
- 陈红梅李方方潘力杨慧林王超
- 关键词：碱性蛋白酶米曲霉
- 大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法
- 本发明公开了大肠杆菌及其可溶性表达转谷氨酰胺酶酶原的方法，该方法包括如下几个步骤：(1)根据茂原链霉菌转谷氨酰胺酶酶原基因的核苷酸序列，设计PCR引物进行PCR扩增，克隆到原核表达载体pET22b(+)中，构建表达载体p...
- 潘力杨慧林苗小康崔翠
- 片段化全基因组体外诱变选育转谷氨酰胺酶高产菌株的研究被引量：3
- 2009年
- 茂原链霉菌产生的转谷氨酰胺酶由于具有使蛋白质交联的特性而备受关注,但是其较低的产量阻碍了工业化的发展。本文采用一株分离到的茂原链霉菌作为出发菌株,通过片段化全基因组体外诱变育种的方法,最终得到一株转谷氨酰胺酶酶活为0.223U/mL的优良菌株,比出发菌株(0.0685U/mL)酶活提高近2.23倍。
- 杨慧林包莹玲潘力
- 关键词：育种转谷氨酰胺酶
