杨俊俊
- 作品数：9 被引量：2H指数：1
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术更多>>
- 一种三角板形核酸纳米制剂及制备方法和应用
- 本发明涉及一种三角板形核酸纳米制剂及制备方法和应用，所述制剂包括由序列SEQ ID NO：1所示的mTOR siRNA、序列如SEQ ID NO：2所示的mT-2A和序列如SEQ ID NO：3所示的mT-1A3通过单链...
- 王关嵩王应明尤再春杨俊俊
- 文献传递
- 脂多糖对肺癌细胞系SPC-A1细胞骨架蛋白表达及细胞迁移能力的影响
- 目的 探讨脂多糖(LPS)对肺癌细胞系SPC-A1细胞骨架蛋白表达及细胞迁移能力的影响.材料与方法 应用LPS分别处理肺癌细胞SPC-A1细胞0、6、12、24h,经罗丹明标记的鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦显微镜观察SP...
- 杨俊俊王关嵩
- 一种自组装核酸纳米管制剂及制备方法和应用
- 本发明涉及一种自组装核酸纳米管制剂及制备方法和应用，所述制剂包括由序列SEQ ID NO：1所示的mTOR siRNA、序列如SEQ ID NO：2所示的L、序列如SEQ ID NO：3所示的M、序列如SEQ ID NO...
- 王关嵩尤再春王应明王贝诺钱航杨俊俊
- 文献传递
- 一种自组装核酸纳米管制剂及制备方法和应用
- 本发明涉及一种自组装核酸纳米管制剂及制备方法和应用，所述制剂包括由序列SEQIDNO：1所示的mTORsiRNA、序列如SEQIDNO：2所示的L、序列如SEQIDNO：3所示的M、序列如SEQIDNO：4所示的S和序列...
- 王关嵩尤再春王应明钱航杨俊俊
- 新型纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸对肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的作用被引量：1
- 2013年
- 目的研究纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASON)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary arterial smooth muscle cells,RPASMCs)增殖和凋亡作用。方法设计合成5'端标记Cy3的Bcl-xlASON,由纳米载体Ac-αCD携带。实验分3组:纳米载体携带的Bcl-xl ASON组(ASON-NPs组)、单纯纳米载体组(NPs组)和空白对照组,分别使用纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl ASON、纳米载体Ac-αCD和培养液处理RPASMCs 48 h,激光共聚焦显微镜观察RPASMCs对纳米载体携带的Bcl-xl ASON的摄取情况;RT-PCR、Western blot检测Bcl-xl的mRNA和蛋白表达;MTT检测处理后细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果激光共聚焦显微镜下可见ASON-NPs组细胞质内大量呈颗粒状均匀分布的红色荧光物质,空白对照组和NPs组细胞细胞质内未见红色荧光物质;ASON-NPs组处理的RPASMCs的Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著低于空白对照组和NPs组(P<0.05);ASODN-NPs组、NPs组、空白对照组细胞抑制率分别为:(53.61±3.02)%、(6.30±1.90)%、(1.40±0.62)%,凋亡率分别为:(53.04±2.09)%、(10.98±2.03)%、(2.19±0.11)%、ASON-NPs组和NPs组细胞抑制率、凋亡率均显著高于空白对照组(P<0.01),ASON-NPs组均显著高于NPs组(P<0.01)。结论纳米载体Ac-αCD携带的Bcl-xl反义寡核苷酸能被RPASMCs有效摄取,从而抑制其增殖,促进凋亡。
- 刘雪萍贺斌峰陈华萍孙欢杨俊俊魏征华窦寅王关嵩
- 关键词：BCL-XL反义寡核苷酸肺动脉平滑肌细胞
- 野生型大鼠Rab5a基因表达载体pcDNA3-Rab5(a)WT的转化扩增及鉴定
- 2013年
- 目的对含野生型大鼠Rab5a基因载体pcDNA3-Rab5(a)WT进行体外转化、扩增及鉴定,为基于Rab5a的相关研究提供高纯度、高丰度的表达载体。方法取pcDNA3-Rab5(a)WT质粒转化DH5α感受态菌,再接种到含氨苄青霉素的LB琼脂培养板进行抗性筛选,对挑取的阳性克隆进行LB液体培养基培养后抽提质粒,用超微量核酸蛋白测定仪测定提取质粒的纯度和浓度,并取样进行琼脂糖凝胶电泳及PCR鉴定。结果经转化后获得了大量抗氨苄青霉素的阳性克隆菌落,挑取阳性克隆并经培养后提取的pcDNA3-Rab5(a)WT质粒均为浓度高、纯度高、超螺旋结构为主的质粒。pcDNA3-Rab5(a)WT经PCR后得到Rab5a基因。结论成功转化并扩增了pcDNA3-Rab5(a)WT,为Rab5的相关研究提供了高质量的表达载体。
- 孙欢杨俊俊贺斌峰王关嵩
- 关键词：RAB5A质粒转化
- Rab1对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化的影响
- 目的:应用RAb1 siRNA处理大鼠肺动脉平滑肌细胞(RPASMCs),观察低氧处理后RPASMCs的表型转化以及血管紧张素Ⅱ1型受体(ATIR)对其表型转化的影响,探讨RAb1在RPASMCs表型转化中的作用,为低氧...
- 杨俊俊尹洪金王关嵩
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞表型转化低氧诱导肺血管重建
- 核酸纳米材料携带的mTOR小干扰RNA对肺动脉平滑肌细胞自噬和增殖的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究自组装核酸纳米材料携带的mTOR小干扰RNA(self-assembled nucleic acid nanoparticles loaded mTOR small interfering RNA,siRNA-NPs)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(rat pulmonary arterial smooth muscle cells,RPASMCs)自噬和增殖的影响。方法设计并合成DNA序列m T-2A、m T-1A3以及5'端标记Cy3的mTOR siRNA,共设计mTOR siRNA序列3条,选其中最佳序列,将上述核酸材料按照操作步骤自组装合成三角板型的核酸纳米材料。实验分4组:核酸纳米材料携带的mTOR siRNA组(siRNA-NPs组)、单纯纳米材料组(NPs组)、单独的siRNA组和空白对照组。各组材料分别转染RPASMCs 24 h,激光共聚焦显微镜观察RPASMCs对核酸纳米材料携带的mTOR siRNA的摄取情况;应用RT-PCR检测各组细胞中mTOR mRNA的表达水平,应用Western blot检测p-mTOR、LC3B蛋白的表达水平;激光共聚焦、透射电镜检测细胞自噬水平;MTT及3H-TdR检测各种材料处理后对细胞的生长的影响。结果激光共聚焦显微镜下可见siRNA-NPs组细胞质内均匀分布大量呈颗粒状的红色荧光物质,其荧光强度均显著高于单独的siRNA组(P<0.05);而且siRNA-NPs组处理的mTOR mRNA和p-mTOR蛋白表达显著低于单独的siRNA组、NPs组及空白对照组(P<0.05);而LC3B蛋白表达显著高于其他各组(P<0.05),激光共聚焦检测显示siRNA-NPs组标记自噬小体的绿色荧光明显强于单独的siRNA组、NPs组及空白对照组(P<0.05),电镜结果显示siRNA-NPs能明显诱导细胞自噬小体形成;MTT及3H-TdR检测siRNA-NPs和单独siRNA处理RPASMCs后明显抑制其生长,且siRNA-NPs组细胞生长抑制率又显著高于单独的siRNA组(P<0.01)。结论 siRNA-NPs能被RPASMCs有效摄取并明显抑制靶基因的表达,进而诱导细胞自噬并且抑制其细胞增殖。
- 杜鹃尤再春贺斌峰王应明杨俊俊毛诚德王关嵩
- 关键词：MTOR小分子干扰RNA肺动脉平滑肌细胞
- 一种三角板形核酸纳米制剂及制备方法和应用
- 本发明涉及一种三角板形核酸纳米制剂及制备方法和应用，所述制剂包括由序列SEQ？ID？NO：1所示的mTOR？siRNA、序列如SEQ？ID？NO：2所示的mT-2A和序列如SEQ？ID？NO：3所示的mT-1A3通过单链...
- 王关嵩王应明尤再春杨俊俊
- 文献传递
