杨中汉
- 作品数：31 被引量：115H指数：6
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- 一种丹参酮IIA衍生物TAN20及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种丹参酮IIA衍生物TAN20，所述丹参酮IIA衍生物TAN20结构式如式(I)所示，其与丹参酮IIA相比，具有更好的改善糖脂代谢的效果，能降低血糖、改善糖耐量和消脂减肥能降低血糖、改善糖耐量和消脂减肥；所...
- 杨中汉梅文杰马雷赵泽伟罗诗雅周琳
- 文献传递
- 血管抑制因子在前列腺癌及前列腺增生组织中的表达及意义被引量：3
- 2006年
- 【目的】探讨前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PCa)组织中血管增生抑制因子,如视网膜色素上皮细胞源因子(PEDF)、血管抑素(angiostatin)、内皮抑素endostatin的表达情况及其血管依赖性生长的分子机制。【方法】收集正常前列腺、前列腺增生和前列腺癌组织标本,RT-PCR技术检测样品中PEDF、angiostatin、endostatin的mRNA表达量,Westernblot技术检测样品中PEDF蛋白的表达量。【结果】和正常前列腺组织相比,PEDF表达量在BPH中无明显变化(P>0.05),在前列腺癌中普遍显著下降(P<0.05);良性前列腺增生组织中endostatin表达量较正常前列腺组织显著升高(P<0.05),前列腺癌比正常前列腺显著升高(P<0.05),而且前列腺癌组织较良性前列腺增生进一步显著增高(P<0.05);三种组织中均未检测到angiostatin的表达。【结论】良性前列腺增生及前列腺癌组织抑制因子表达变化可能和其血管依赖性生长相关;PEDF可能是前列腺组织最主要的血管增生内源性抑制因子。
- 杨中汉李朝阳杨霞蔡卫斌王青松周世豪邓春华高国全丘少鹏
- 关键词：前列腺增生前列腺癌血管增生
- 大剂量葡萄糖诱导人视网膜内皮细胞凋亡(英文)被引量：1
- 2004年
- 背景:有证据表明,大血管内皮细胞对高血糖症具有与视网膜微血管不同的特征与反应。目的:检验大剂量葡萄糖水平对培养的原代人视网膜毛细血管内皮细胞(humanretinalcapillaryendothelialcells,HRCECs)的直接影响。设计:非随机非对照的实验研究。地点和对象:本研究在解放军第四七六医院内科完成。对象为HRCEC细胞,从志愿捐赠者眼中分离得到。方法:HRCEC细胞在含有5mmol/L或25mmol/L葡萄糖的培养基中培养6d。应用锥虫蓝染色测定细胞活力、流式细胞计数分析细胞周期、TUNEL分析细胞凋亡。主要观察指标:在高剂量葡萄糖中HRCEC的增殖和凋亡的量化。结果:HRCEC细胞在25mmol/L葡萄糖中培养6d,细胞活力显著下降。通过流式细胞计数和TUNEL测定,凋亡细胞的数目在大剂量葡萄糖培养基中显著升高。结论:大剂量葡萄糖可诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡,这有可能是促进糖尿病性视网膜病发展的原因。
- 马建芳杨中汉宋志宏郭颖蔡卫斌刘倩平郭琳琅高国全
- 关键词：糖尿病视网膜病脱噬作用高血糖症
- PEDF调控HSL抑制肥胖状态下脂肪动员的作用及机制被引量：1
- 2017年
- 目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)调控激素敏感性脂肪酶(HSL)抑制肥胖状态下脂肪动员的作用及机制。方法构建高脂喂养的肥胖小鼠模型,应用Western blot和荧光定量PCR检测PEDF和HSL的蛋白及mRNA水平;腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)模拟激素诱导脂肪动员过程,应用Western blot检测HSL的磷酸化水平;培养3T3-L1并诱导分化为脂肪细胞,分别加ISO和AMPK激动剂利用Western blot研究PEDF调控HSL的分子机制。结果Western blot和荧光定量PCR检测结果提示高脂组PEDF蛋白水平和mRNA含量在各个时间点(4、8、12、16、20周)较普通组均明显上调,而HSL蛋白和mRNA水平在各个时间点较普通组均显著下调。在ISO诱导下,不同浓度(10、100、500 nmol/L)PEDF显著下调HSL磷酸化水平。Western blot检测提示PEDF可以同时下调脂肪细胞AMPK和HSL磷酸化水平。结论 PEDF可能通过抑制AMPK的磷酸化调控HSL,导致肥胖状态下体内甘油三酯进一步蓄积,最终诱导胰岛素抵抗等代谢异常疾病。
- 齐炜炜卢汉平陈菲董畅曾嘉毅周倜杨中汉杨霞
- 关键词：色素上皮衍生因子肥胖激素敏感性脂肪酶
- 纤溶酶原K5抗血管增生活性依赖其完整Kringle结构域被引量：6
- 2006年
- 根据K5蛋白(Pro451—Ala541)的结构特征和二硫键分布特点,设计K5的两个缺失突变体K5 mut1(Cys461—Cys540,保留K5 kringle环3个完整二硫键但去除N端和C端多余氨基酸)和K5mut2(Cys482—Cys535,打开kringle环,只保留2个二硫键).以野生型人纤溶酶原K5 cDNA为模板,用PCR方法得到编码缺失突变体的DNA片段,定向克隆入pET22b(+)质粒载体,重组体转化进大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,产物经亲和层析和高浓度甘油透析纯化后进行鉴定和生物活性测定.K5 mut1蛋白特异性抑制人视网膜微血管内皮细胞增殖,且活性强度是完整的K5蛋白2倍;K5mut2对人视网膜微血管内皮细胞无显著抑制作用.结果提示,完整的Kringle结构(包含3个二硫键)是维持人纤溶酶原K5抗血管增生活性的必需结构域,而K5分子中Kringle结构域外的N端和C端氨基酸臂则并非其活性所必需.
- 李朝阳蔡卫斌杨中汉杨霞宋志宏周世豪李明友刘祖国高国全
- 关键词：纤溶酶原KRINGLE缺失突变体
- 交叉酶切联合MALDI-TOF/MS分析重组蛋白二硫键分布的方法建立被引量：2
- 2011年
- 以Kringle环为分子模型,应用MALDI-TOF/MS联合特异性蛋白酶酶切技术,探讨建立蛋白质二硫键分布和定位分析的研究方法。采用pET22b(+)原核表达体系诱导表达重组人纤溶酶原K5蛋白(rhK5),经Ni2+-NTA resin亲和层析纯化,并通过SDS-PAGE和Western-blot进行初步鉴定;采用MTT法分析rhK5对微血管内皮细胞的抑制活性;联合应用交叉酶切(Trypsin Gold单切或Trypsin Gold及Endoproteinase ASP-N双酶切)和基质辅助激光解析-飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)分析rhK5的二硫键分布;并应用生物信息学方法和圆二色谱法进一步验证rhK5二级结构。应用原核体系高效表达具有生物活性的rhK5蛋白,经交叉酶切联合MAL-DI-TOF/MS证实rhK5中的6个半胱氨酸正确配对形成了3对二硫键(Cys462:541,Cys483:524和Cys512:536),圆二色谱法测定发现rhK5为典型的β折叠型结构。上述研究结果为分析基因工程重组蛋白质中半胱氨酸配对及二硫键分布提供了方法学基础。
- 徐祖敏程锐杨霞杨中汉刘少军黎明涛蔡卫斌高国全
- 关键词：基因工程重组蛋白蛋白质结构二硫键
- 高脂血症患者脂蛋白脂酶基因异常的初步研究
- 目的 脂蛋白脂酶（LPL）是脂代谢的关键酶，其基因缺陷与内源性高甘油三脂 血症（HTG）及冠心病等多种疾病有密切关系。LPL基因外显子4编码酶活性中 心...
- 杨中汉
- 关键词：脂蛋白脂酶RNA二级结构剪接多聚酶链反应单链构象多态性
- 文献传递
- 免疫调控米色脂肪生成的研究进展被引量：2
- 2018年
- 哺乳动物中米色脂肪是一种被新发现的产热脂肪组织,可由白色脂肪转化而成,在机体的糖、脂代谢中起到了重要作用。研究表明,免疫系统跟脂肪代谢息息相关,它可以从多个方面来调控米色脂肪,比如骨髓、嗜酸性粒细胞、2型先天性淋巴细胞(ILC2)、IL-4/IL-13。本文就免疫系统(免疫器官、免疫细胞、免疫因子)对米色脂肪的调控作用加以综述,以期为治疗肥胖及其相关代谢疾病提供新的思路。
- 马雷李令一杨中汉
- 关键词：免疫脂肪
- 脱氧核酶:生物催化剂的新成员被引量：4
- 2000年
- 杨中汉冯建生
- 关键词：脱氧核酶分子结构生物催化剂
- 藏红花素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其作用机制被引量：15
- 2009年
- 目的:研究藏红花素对HeLa细胞的促凋亡作用和机制。方法:设置0、0.2、0.4及0.8mmol/L4个浓度梯度,MTT法分析不同浓度藏红花素对HeLa细胞增殖的影响;设置空白阴性对照及秋水仙素(10μg/L)阳性对照,向HeLa细胞培养物分别加入0.4和0.8mmol/L的藏红花素,培养48h后用PI/AnnexinⅤ双染法分析其凋亡情况;1.6mmol/L藏红花素作用于HeLa细胞72h后,蛋白质印迹法检测Caspase-3的切割。结果:MTT实验分析显示,在0、0.2、0.4及0.8mmol/L浓度下HeLa细胞存活率分别为1、0.964、0.796和0.586。藏红花素显著地抑制HeLa细胞生长,P<0.05;各浓度组间均差异有统计学意义,P<0.05。PI/AnnexinⅤ双染法、流式细胞仪检测显示,阴性对照组、10μg/L秋水仙素阳性对照组、0.4及0.8mmol/L藏红花素处理组的细胞凋亡率分别为3.64%、15.99%、4.86%和9.28%,藏红花素促进HeLa细胞凋亡。蛋白质印迹法检测显示,藏红花素促进HeLa细胞Caspase-3切割。结论:藏红花素可明显地抑制HeLa细胞生长,并通过增加HeLa细胞Caspase-3切割促进其凋亡。
- 龚青石丁波蔡卫斌杨中汉谭维格廖彩韵彭超刘畅高国全杨霞
- 关键词：HELA细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
