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双链PCR产物直接测序方法介绍被引量：6: 1995年; 双链ＰＣＲ产物直接测序方法介绍陈虹，杜晓娟，伏瑾，陈珊对ＰＣＲ产物直接测序而不事先将待测基因片段克隆到测序载体上，使ＤＮＡ序列分析的效率大大提高，是近年来发展的检测基因突变的重要方法。最近我们以人ＳＲＹ基因ＰＣＲ扩增片段为模板，使用ＴａｑＤＮＡ聚合酶...; 陈虹杜晓娟伏瑾陈珊; 关键词：基因突变 DNA分析多聚酶链式反应

中国人SRY基因的分离、克隆和核苷酸序列分析被引量：8: 1993年; 睾丸决定因子基因(Testis-determining factor,TDF)位于Y染色体短臂上,它的表达产物诱导睾丸组织的发生。SRY基因(Sex-determining Region of the Y)位于Y染色体的性别决定区内,许多特征显示SRY就是TDF。我们选用与SRY基因相应的引物,用PCR技术对正常人男女各10例的基因组DNA进行扩增。将特异扩增的男性SRY基因片段重组到质粒PUC12中,得到含有中国人SRY基因片段的克隆,命名为PSY-1、PSY-2。用[^(32)p]标记重组质粒中的SRY基因片段作探针,与PCR结果进行Southern杂交,男性样品均显示特异杂交带,女性样品为阴性。用末端终止法测定克隆的SRY基因片段的全部核苷酸序列为299bp,含有SRY基因中高度保守及功能特异性区域的240bp,我们对此进行了讨论。; 陈虹杜晓娟孙国贤黄秉仁; 关键词：分子克隆性别决定基因

人SRY基因表达及表达蛋白的结合功能研究被引量：18: 1998年; 目的研究人类性别决定基因（ｓｅｘｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｎｔｈｅＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ，ＳＲＹ）表达蛋白对下游基因的调节作用。方法将ＳＲＹ基因ＨＭＧ结构域片段与表达载体ＰＥＴ－１５ｂ－进行重组，构建了ＳＲＹ基因的表达质粒ＰＥＴＳＹ，转入大肠杆菌中表达，组氨酸结合树脂柱纯化表达蛋白，与苗勒氏管抑制因子基因（Ｍüｌｅｒｉａｎｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｓｕｂｓｔａｎｃｅ，ＭＩＳ）启动子区片段进行凝胶电泳阻滞试验及竞争试验。结果获得ＳＲＹ基因表达蛋白，分子量接近２０．８Ｕ（２１ｋＤ），凝胶电泳阻滞试验及竞争试验表明，ＳＲＹ表达蛋白能特异结合位于１９号染色体的ＭＩＳ基因的启动子区。结论提示ＳＲＹ基因对ＭＩＳ基因转录具有调节作用。; 杜晓娟伏瑾蔡玲玲陈虹黄秉仁; 关键词：性别决定基因基因表达 MIS

46，XX真两性畸形的基因诊断被引量：1: 1994年; 睾丸决定因子（Ｔｅｓｔｉｓ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＴＤＦ）位于Ｙ染色体短臂上，它的表达产物诱导睾丸组织的发生。ＳＲＹ基因（Ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｒｅｇｉｏｎｏｆｔｈｅＹ）位于Ｙ染色体的性别决定区内，许多特征显示ＳＲＹ可能就是ＴＤＦ。采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）结合斑点杂交对３例４６，ＸＸ真两性畸形性腺组织的石蜡切片中ＳＲＹ基因进行检测，２例检测到ＳＲＹ基因，１例未检测到。性腺组织病理检查均为卵睾组织。为探讨两性畸形的发病机理提供了资料。; 杜晓娟熊健陈虹; 关键词：两性畸形聚合酶链反应斑点杂交

中国人哮喘易感性与染色体5q31～33区连锁关系的初步研究被引量：10: 1998年; 目的获得中国人相关位点的资料，确定中国人哮喘易感性与染色体５ｑ３１～３３区域的连锁关系。方法采集３２个哮喘家系共１９２份样品，并取３９个正常无关个体为对照；用同位素掺入的聚合酶链反应（ＰＣＲ）法扩增多态性遗传标记Ｄ５Ｓ４３６和Ｄ５Ｓ３９３，通过受累同胞配对法进行Ｄ５Ｓ４３６和Ｄ５Ｓ３９３与哮喘和高血清总ＩｇＥ的连锁分析。结果正常对照分析：Ｄ５Ｓ４３６共获得９个等位片段，多态性信息含量（ＰＩＣ）为０．８０３，杂合度（ＨＥＴ）为０．８２３，Ｄ５Ｓ３９３共有１１个等位片段，ＰＩＣ为０．８９２，ＨＥＴ为０．８９８，表明两个位点均属于高度多态性的遗传标记。连锁分析：Ｄ５Ｓ４３６与哮喘呈连锁状态（Ｐ＜０．０５），Ｄ５Ｓ３９３与哮喘没有连锁关系；Ｄ５Ｓ４３６和Ｄ５Ｓ３９３与高血清总ＩｇＥ都没有显示连锁关系。结论染色体５ｑ３１～３３区可能存在与中国人哮喘易感基因相关的１个或多个位点，是进行中国人哮喘易感基因研究的重要候选区域之一。; 赵华杜晓娟林丽渊姜晶徐平池陈虹陈虹; 关键词：哮喘多态现象染色体易感性

用染色体候选区域限定策略对诏安地区人群哮喘易感性的初步研究被引量：1: 1999年; 目的　对福建诏安地区哮喘易感基因进行研究，以获得相关位点的资料，确定哮喘易感性与该区域的连锁关系。方法　用ＰＣＲ／Ｒｓａ Ⅰ酶解检测位于染色体１１ｑ１３区的β链ＩｇＥ高亲和力受体基因（Ｆｃε ＲＩβ）非编码区的两个多态性位点；用同位素掺入的ＰＣＲ法扩增位于染色体５ｑ３１３３区的Ｄ５Ｓ４３６和Ｄ５Ｓ３９３多态性标记，对３２个哮喘家系，共１９２份样品进行分析。结果　Ｆｃ ε ＲＩβ基因第２内含子区ＲｓａⅠ多态性位点Ａ等位片段与哮喘有显著相关性（Ｐ＜０．０５，ＯＲ＝２．０３９）；血清总ＩｇＥ水平的差异在Ｆｃ ε ＲＩβ基因第２内含子区Ｒｓａ Ⅰ多态性位点的不同基因型之间有显著性差别（Ｐ＜０．０５）；Ａ等位片段与血清总ＩｇＥ水平的升高有显著相关性（Ｐ＜０．０５，ＲＲ＝１．３６１）。Ｆｃ ε ＲＩβ基因第７外显子非编码区Ｒｓａ Ⅰ多态性位点未显示与哮喘有相关性。受累同胞配对法分析显示，Ｄ５Ｓ４３６与哮喘呈连锁状态（Ｐ＜０．０５），Ｄ５Ｓ３９３与哮喘无连锁关系；Ｄ５Ｓ４３６和Ｄ５Ｓ３９３与高血清总ＩｇＥ都没有显示连锁关系。; 陈虹杜晓娟林丽渊姜晶胡良平张惠琴陈育智伏瑾; 关键词：哮喘易感性染色性

八例性发育异常患者的SRY基因检测被引量：6: 1995年; 采用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）结合核酸杂交的方法对８例性发育异常患儿进行了ＳＲＹ基因检测，３例４６，ＸＸ男性患儿有２例显示基因组ＤＮＡ中含有ＳＲＹ基因，证实ＳＲＹ基因易位是导致患儿性发育异常的原因。４例４６，ＸＹ女性患儿ＳＲＹ基因均为阳性。探讨了ＳＲＹ基因检测对临床诊断的意义和应用的可能性。; 陈虹熊健杜晓娟张莉莉张小伟黄秉仁; 关键词：SRY基因性发育异常核酸杂交

先天性巨结肠 RET 基因的突变: 1997年; 酪氨酸激酶受体基因（ｒｅｃｅｐｔｏｒｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅｇｅｎｅ，ＲＥＴ基因）被定位于染色体１０ｑ１１．２上，其突变可导致３种多发性内分泌瘤综合征和先天性巨结肠的发生。为了探讨ＲＥＴ基因突变在先天性巨结肠发病中的作用，采用多聚酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）及单链ＤＮＡ构象多态性分析（ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎｄｅｄＤＮＡｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ）的方法，对３４例散发先天性巨结肠基因组ＤＮＡ进行ＲＥＴ基因第６外显子突变筛查，并对电泳条带变异的ＰＣＲ产物进行了直接核苷酸序列分析。发现１例为ＧＡＣＴＣＡＧＡＣ→ＧＡＡＴＣＡＡＡＣ碱基突变，导致两个氨基酸发生改变。表明ＲＥＴ基因突变与先天性巨结肠发病有关。; 杜晓娟陈虹蔡玲玲伏瑾叶蓁蓁; 关键词：先天性巨结肠酪氨酸激酶基因突变; 全文增补中

46，XY真两性畸形基因分析及发病机理初探被引量：4: 1996年; 为了解４６，ＸＹ真两性畸形发病机理，采用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）及核苷酸序列分析等手段，对４例４６，ＸＹ真两性畸形儿的ＳＲＹ基因及ＤＹＺ１序列进行了分析。４例患儿ＳＲＹ基因功能保守区均未发现基因突变。其中１例患儿ＰＣＲ扩增ＤＹＺ１序列未见特异扩增带，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和细胞遗传学分析提示该患儿可能存在ＤＹＺ１序列的部分或全部缺失。对患儿父亲ＤＹＺ１序列分析的结果同正常男性进行了对照。综合有关报道，分析了ＳＲＹ基因及ＤＹＺ１序列在性别发育中的作用。; 陈虹杜晓娟黄秉仁丁秀原伏瑾张莉莉梁廷臣; 关键词：两性畸形病理学儿童

国内首次在导管心肌活检组织中检测到柯萨奇B组病毒核酸: 1992年; 病毒性心肌炎的病原学诊断一直是一个难题。因为从患者血液及粪便中分离到病毒心肌炎的病原只能是中度或低度相关,从心肌中分离到病毒的阳性率很低,仅见于少数病例。国外目前采用经导管取得的心内膜心肌活检标本进行核酸分子杂交或多聚酶链反应检测病毒RNA或DNA。首都儿科研究所与安贞医院合作,对1例病原不清的7岁女性心肌炎患者经导管心内膜心肌活检取材,制备8μm厚的冰冻切片。用〔³H〕标记的柯萨奇B₃病毒（coxsackie virus B₃,CVB₃; 杜晓娟陈虹王惠玲孙国贤; 关键词：心肌活检病毒核酸病毒心肌炎核酸分子杂交

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杜晓娟

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