李芬
- 作品数：4 被引量：19H指数：2
- 供职机构：湖南医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HLA-Ⅱ类基因DR_α、DRB_1*0401转基因鼠模型的建立及体内表达研究被引量：4
- 1999年
- 目的 建立携带人HLA-Ⅱ类基因DRα、DRB10401 转基因鼠模型。方法 利用受精卵原核的显微注射技术,将HLA-DRα、DRB10401 两种基因显微注射至C57BL/6×DBA/1 杂交小鼠受精卵中,并移植到假孕受体鼠的输卵管内,然后应用PCR、Southern 印迹杂交和Northern 杂交方法分析子代鼠中基因的整合及表达情况。结果 实验先后有5 只Found 鼠,稳定遗传5 代。经PCR检测有95 只鼠HLA-DR阳性,Southern 印迹杂交出68 只整合含有DRα、DRB10401 混合型的转基因小鼠。经Northern 杂交和RT-PCR检测,其HLA-DR 基因在脾脏和肾脏中均有表达。结论 携带人HLA-Ⅱ类DRα。
- 邓军卫吴轰游学科冯清泉李芬朱亚辉卢光琇
- 关键词：转基因动物模型自身免疫病
- HLA-Ⅱ类基因DR_α及DRB_1 0401转基因小鼠模型的遗传与繁殖被引量：1
- 2000年
- 采用类系祖建系的方法 ,对HLA -Ⅱ类基因DRα 和DRB1 0 4 0 1转基因小鼠模型进行了繁育。通过PCR和Southernblot分子杂交的方法 ,检测小鼠尾组织的DNA样品 ,以确定DR基因的整合和复制情况。结果表明 ,HLA -Ⅱ类基因DR已稳定地遗传至第五代(F5) ;共产仔 32 6只 ,PCR检测出阳性小鼠 95只 ,阳性率为 2 9.1 %。PCR—Southern印迹杂交检测 ,发现 68只仔鼠整合有DR基因 ,总有效率为 2 0 9%。经Nothern杂交和RT -PCR检测HLA -DR基因在脾脏和肾脏中均有表达。
- 邓军卫吴轰李芬冯清泉游学科朱亚辉卢光
- 关键词：HLA-DR基因转基因小鼠模型繁殖
- 以转基因动物研究类风湿关节炎的易感基因被引量：14
- 1999年
- 目的通过人ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠的胶原性关节炎动物模型研究易感基因对类风湿关节炎及药物治疗的影响。方法将人ＨＬＡＤＲα＋４β基因转入Ｃ５７ＢＬ／６×ＤＢＡ／１Ｆ１代小鼠复制出转基因动物，并予胶原和佐剂免疫建立胶原性关节炎模型。以分子生物学技术检测外源基因的整合和表达，以发病时间、病理评分及血清Ⅱ型胶原抗体水平研究ＨＬＡＤＲ４基因对关节炎易感性及甲氨蝶呤治疗的影响。在体外通过淋巴细胞增殖及阻断实验研究Ⅱ型胶原及抗ＨＬＡＤＲ、Ｌｙｔ２和Ｌ３Ｔ４单抗对淋巴细胞增殖的影响。结果①人ＨＬＡＤＲ４基因稳定整合于Ｃ５７ＢＬ／６×ＤＢＡ／１Ｆ１代小鼠，主要在脾、肾中表达。②ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠对照组发病时间较非转基因小鼠组提早（Ｐ＜００５）。③ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠的对照组总病理评分和软骨破坏评分较相应的甲氨蝶呤治疗组高（Ｐ＜００５），非转基因小鼠的对照组的总病理评分、软骨破坏评分和骨质侵蚀评分较相应的甲氨蝶呤治疗组高（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。④ＨＬＡＤＲ４转基因小鼠对照组和甲氨蝶呤治疗组的Ⅱ型胶原抗体水平较相应的非转基因小鼠组高（Ｐ＜００５，Ｐ＜０００１），且均高于二组正常血清对照组（Ｐ＜?
- 李芬吴轰邓军卫游学科魏启幼范松青朱亚辉卢光琇
- 关键词：类风湿性关节炎转基因HLA-DR4易感基因
- HLA-Ⅱ类基因DRα及DRB_1~*0401~1转基因小鼠的制备
- 2002年
- 利用受精卵原核的显微注射技术 ,将人类HLA Ⅱ类DRα及DRB1 0 4 0 1两种基因 ,显微注射至C5 7BL 6×DBA 1杂交小鼠受精卵中 ;并移植至假孕受体鼠的输卵管内。实验先后有 8只鼠妊娠 ,稳定遗传五代 ,经PCR检测 95只HLA DRα、DRB1 0 4 0 1阳性。α 32P dCTP斑点杂交与Southern印迹杂交鉴定出 6 8只整合含有DRα及DRB1 0 4 0 1混合型的转基因小鼠 ,有效率为 2 0 .9%。经Northern杂交[1] 和RT PCR检测 ,其HLA DRα、DRB1 0 4 0 1基因在脾脏和肾脏中均有表达。结果说明 ,携带人类HLA Ⅱ类DRα和DRB1 0 4 0 1基因的转基因动物模型构建成功。
- 佘鸥邓军卫吴轰游学科李芬冯清泉朱亚辉卢光琇
- 关键词：DRB1疾病模型转基因小鼠
