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用原代细胞培养和人全基因表达谱芯片筛选鼻咽癌差异表达基因被引量：4: 2007年; 目的利用细胞的原代培养技术及人全基因表达谱芯片技术初步筛选出鼻咽癌差异表达基因,以发现与鼻咽癌发生、发展相关的新的候选基因。方法分别用1例鼻咽癌细胞株C666及5例鼻咽癌培养出的原代细胞和3例鼻咽正常上皮的原代细胞,进行基因表达谱分析,并以荧光定量PCR及免疫组织化学验证芯片结果。结果原代培养的鼻咽癌细胞和鼻咽正常上皮细胞通过细胞角蛋白的免疫细胞化学染色、EBER1原位杂交和EBV-DNA荧光定量PCR证实;鼻咽癌原代细胞和鼻咽正常上皮原代细胞的基因表达谱有显著差异;4例以上共同表达的差异基因有493个,包括上调基因264个,下调基因229个。荧光定量PCR及免疫组织化学结果和芯片结果一致。结论用原代培养细胞及人类全基因组基因芯片构建基因表达谱能够准确、高效地筛选出鼻咽癌相关的差异表达基因,该基因表达谱的建立为研究鼻咽癌分子生物学机制、鼻咽癌的分子分型和分子诊断提供了重要的分子依据。; 李瑞平邵建永邓玲曾木圣宋立兵李满枝吴秋良; 关键词：寡核苷酸芯片基因表达谱原代细胞培养

鼻咽癌差异表达miRNAs筛选研究被引量：24: 2007年; 【目的】应用miRNAs芯片筛选原代培养的鼻咽癌细胞差异表达miRNAs,并寻找差异表达miRNAs调控的靶基因,为进一步研究其在鼻咽癌发病机制中的作用打下基础。【方法】运用miRNAs芯片技术筛选原代培养的鼻咽癌细胞差异表达miRNAs,同时运用miRNAs特异的引物组对差异表达的miRNAs进行荧光定量RTPCR验证。运用靶基因预测软件并结合全基因组表达谱芯片结果预测差异表达miRNAs可能调控的靶基因,并利用western blot技术检测预测的靶基因在原代培养的鼻咽癌细胞中的表达。【结果】miRNAs芯片结果显示,鼻咽癌中miR-203、miR-503、miR-424、miR-141和miR-148a表达下调,而miR-25、miR-195和miR-15a表达上调,其差异表达均在2倍以上;荧光定量RTPCR结果与miRNAs芯片的结果较符合;其中miR-203的预测靶基因为CCNG1和SPARC,Westernblot结果显示,其在原代培养的鼻咽癌细胞亦高表达。【结论】miR-203、miR-503、miR-424、miR-141、miR-148a、miR-25、miR-195、miR-15a在原代培养的鼻咽癌细胞与正常鼻咽上皮细胞中存在差异表达;CCNG1和SPARC可能是miR-203调控的靶基因,可能参与了鼻咽癌的发生发展。; 李晓霞李瑞平杜紫明曾木圣邵建永; 关键词：MICRORNA 鼻咽癌

用肿瘤细胞原代培养和人全基因芯片技术筛选鼻咽癌差异表达基因: 目的:本研究采用寡核苷酸探针基因芯片技术，结合肿瘤细胞原代培养技术，研究鼻咽癌基因表达谱差异基因，并对鼻咽癌的发病机制进行初步探讨。为鼻咽癌的早期诊断、预后判断及治疗方案的选择提供理论依据。方法:取鼻咽癌和鼻...; 李瑞平; 关键词：鼻咽肿瘤基因表达谱原代细胞培养荧光定量PCR; 文献传递

柯萨奇病毒-腺病毒受体在结肠癌组织中的表达及意义被引量：3: 2007年; 目的:柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)介导腺病毒与靶细胞之间的粘附,是腺病毒转染靶细胞的限速因子。本文分析CAR在瘤旁上皮组织、结肠肿瘤原发灶和淋巴结转移灶中的表达,为设计腺病毒载体基因治疗方案提供依据。方法:采用免疫组织化学方法检测62例结肠癌组织中CAR的表达,分析CAR表达与临床病理特征的关系。结果:与瘤旁上皮组织相比,肿瘤组织普遍存在CAR表达下调,但CAR在原发灶和淋巴结转移灶的表达水平无明显差异。CAR的表达水平与患者年龄及肿瘤大小相关。结论:结肠癌组织中存在CAR表达下调,提示在设计腺病毒载体基因治疗方案时应充分考虑CAR表达变化对疗效的影响。; 张念华宋立兵伍小军高艳芳彭瑞清丁娅李瑞平万德森张晓实; 关键词：结肠癌基因治疗

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李瑞平