李浩戈
- 作品数：60 被引量：306H指数：9
- 供职机构：沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 血红铆钉菇免疫调节蛋白基因克隆及其生物信息学分析和重组表达被引量：1
- 2015年
- 为研究血红铆钉菇中克隆的一种新型真菌免疫调节蛋白基因以及其在毕赤酵母GS115中进行高效重组表达,采用同源克隆的方法从血红铆钉菇菌丝体基因组DNA中扩增得到一个新的真菌免疫调节蛋白基因——FIP-cru,构建FIP-cru真核表达重组载体,并在毕赤酵母GS115中进行FIP-cru重组表达。利用硫酸铵沉淀、琼脂糖镍纳米磁珠纯化目的重组FIP-cru蛋白,采用SDSPAGE和Western blot验证重组FIP-cru表达情况。利用体外血细胞凝集实验与MTT法检测r FIP-cru生物学活性。结果表明:FIPcru属于真菌免疫调节蛋白家族,包含342 bp,编码113个氨基酸,经生物信息学分析发现,FIP-cru与其他真菌免疫调节蛋白有较高的同源性。SDS-PAGE和Western blot检测表明FIP-cru在毕赤酵母GS115中正确重组表达,粗蛋白表达水平为148.5mg·L-1。纯化后的r FIP-cru可以在体外凝集小鼠和羊的血细胞而不凝集人血细胞,MTT法表明r FIP-cru可明显刺激小鼠脾淋巴细胞的增殖。FIP-cru为一种新型真菌免疫调节蛋白,毕赤酵母高效重组表达的r FIP-cru具有良好的生物学活性。
- 林景卫关山越钟鸣陈丽静李浩戈张丽范文丽李天来
- 关键词：血红铆钉菇毕赤酵母GS115重组蛋白
- 一种利于百合鳞片生根的育苗架
- 本实用新型公开了一种利于百合鳞片生根的育苗架，包括底座、支架和支撑板，底座的上表面固定设置有支架，支架为中空结构，支架的纵截面为直角三角形，支架的倾斜面上沿高度方向固定设置有多个支撑板，支撑板上表面的两侧对称设置有滑轨，...
- 陈丽静张丽殷晓娟马爽马慧李浩戈郭志富钟鸣刘少霞杨会
- 文献传递
- 富硒蛹虫草对小鼠降血脂和抗氧化作用的影响
- 目的：探讨富硒蛹虫草的降血脂和抗氧化作用。方法：昆明种雄性小鼠60只,随机分4组(n=15只/组)：正常对照组、高脂模型组、普通蛹虫草组、富硒蛹虫草组。用不同的饲料持续喂养5周,每周的固定时间称量小鼠体重1次,第5周断头...
- 钟鸣高丹胡昆陈丽静张丽李浩戈张月
- 关键词：降血脂抗氧化作用动物实验
- 文献传递
- FIP-fve基因沉默载体构建和金针菇的遗传转化被引量：7
- 2017年
- 为了探究金针菇FIP-fve基因对金针菇本身的生物学功能,本研究克隆FIP-fve基因正反片段并构建其RNAi载体,并将其转化农杆菌LBA4404,建立以农杆菌介导的金针菇遗传转化体系。双酶切琼脂糖电泳检测结果表明成功构建了FIP-fve基因的RNAi载体:p TCK303-fve(F)-fve(R),并用液氮转化法获得重组农杆菌转化子。金针菇遗传转化以菌丝体为外植体,潮霉素B(Hygromycin B)和头孢霉素(Cephalosporins)使用浓度分别为9μg/m L和600μg/m L。重组农杆菌浓度OD600为0.5,侵染金针菇菌丝体30 min,共培养培养基AS使用浓度为200μg/m L,共培养25℃3 d,抗性筛选10 d。最终通过潮霉素抗性筛选和PCR检测从60个外植体中筛选得到5个金针菇遗传转化子,转化率为8.33%。经过连续培养,对比观测转化子和野生型金针菇,FIP-fve基因沉默的金针菇转化子菌丝的生长在第3天、第6天和第10天明显慢于野生型金针菇菌丝。初步说明FIP-fve基因对金针菇菌丝体时期的生长发育具有一定调节作用,这为研究金针菇FIP-fve以及FIP对真菌本身生物学功能提供一定研究基础和直接证据。
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- 关键词：RNAI载体
- 性别决定基因TASSELSEED2在水稻中的功能歧化性浅析
- 2017年
- 花器官的发育不仅影响农作物的生产,通过性别决定产生单性花的机制亦是重要的基础理论问题。TASSELSEED2基因是与JA合成有关的调控玉米单性雄花产生的性别决定基因,对一些植物中TS2同源基因的表达分析表明TS2蛋白可能在进化过程中产生了功能歧化。为探究TS2蛋白在进化过程中其功能是否发生了歧化,首先通过生物信息学手段对水稻和玉米的TS2基因进行了比较分析,分子进化分析表明,TS2基因在一些植物中可能并不仅仅局限于抑制雌蕊发育的性别决定功能。因此,猜测两性花植物水稻中的TS2可能具有其他功能。利用蛋白质三维结构预测软件,发现水稻TS2基因编码典型的SDR蛋白,含有保守的GASGIG和YTASK基序,其作用底物可能与玉米TS2蛋白类似。启动子分析表明OsTS2和玉米TS2的激素应答元件存在差别。随后,利用RNA-seq数据进行了OsTS2与玉米TS2的组织器官表达分析,并利用实时荧光定量技术考察外源Me JA喷施处理对OsTS2与玉米TS2基因表达的影响。结果表明,OsTS2主要在花序中表达,经外源MeJA处理后其表达量明显升高;而玉米TS2在雄穗分化关键期的叶片中表达量最高,其表达量基本不受外源Me JA影响。OsTS2与玉米TS2表达方面的差异提示水稻TS2可能具有与玉米TS2不同的功能,为深入了解TS2在两性花植物中的功能提供了线索。
- 郭盈盈候志鹏钟鸣陈丽静马慧张丽徐正进李浩戈
- 关键词：水稻玉米茉莉酸甲酯
- 加强农业院校生物技术专业建设的思考被引量：6
- 2002年
- 本文论述了生物技术在农业院校学科建设、农业产业发展中的地位 ,就改进生物技术专业理论与实践教学、加强师资队伍建设等提出建议。
- 钟鸣李浩戈陈丽静
- 关键词：农业院校生物技术学科建设
- 玉米MADS-box基因ZAG3的表达及功能分析
- 2012年
- 为了解MADS-box蛋白中AGL6亚家族基因ZAG3在玉米花发育中的功能,对ZAG3基因进行序列分析显示,该基因开放阅读框为768 bp,编码255个氨基酸的MADS-box蛋白。亚细胞定位预测显示,ZAG3定位于细胞核中。启动子预测分析表明,ZAG3基因启动子区具有启动子的核心组件、分生组织表达的组件和脱落酸、赤霉素等植物激素应答组件,但没有与茉莉酸相关的应答组件。此外,实时荧光定量PCR表达分析显示,喷施茉莉酸甲酯可以使ZAG3基因在玉米雄穗中的表达明显提高,暗示了该基因与JA介导的雄穗性别决定过程是有关系的。
- 李浩戈刘彦飞钟鸣陈丽静张丽林景卫崔振海
- 关键词：玉米性别决定茉莉酸
- 一种防治百合田间土传病害的组合物及使用方法
- 本发明提供了一种防治百合田间土传病害的组合物，属于百合种植技术领域，所述组合物包括以下重量份的组份：15％恶霉灵300～600倍液2～8份，多菌灵400～800倍液2～8份和重茬1号2～8份。本发明通过将15％恶霉灵30...
- 陈丽静张丽殷晓娟林景卫李浩戈宋婷李薇刘少霞
- 文献传递
- 金针菇免疫调节蛋白基因fip-fve在毕赤酵母GS115中诱导型和组成型表达被引量：4
- 2014年
- 为获得稳定来源并且具有生物学活性的重组金针菇免疫调节蛋白(Fip-fve),将fip-fve基因转至毕赤酵母GS115中进行诱导型和组成型表达。用PCR方法从金针菇子实体基因组DNA中扩增fip-fve基因,连接至pPIC9构建诱导型表达载体pPIC9-FIP-fve,从毕赤酵母基因组DNA中扩增三磷酸甘油醛脱氢酶启动子(pgap),替换pPIC9-FIP-fve上乙醇氧化酶启动子(paox1)构建组成型表达载体pPIC9-PGAP-FIP-fve。将线性化的两种表达载体用PEG法转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺失培养基筛选和酵母菌落PCR鉴定后进行表达。结果表明,重组Fip-fve在以甲醇(1%,V/V)为碳源进行诱导型表达4 d达到最高,粗蛋白表达量为158.2 mg/L,在以葡萄糖(10%)和甘油(1%,V/V)为碳源进行组成型分别在表达第4天和第5天达到最高,粗蛋白分别为46.3 mg/L和29.5 mg/L。SDS-PAGE及Western blotting证明重组Fip-fve已正确表达,血细胞凝集活性检测初步证明重组Fip-fve具有良好生物学活性。
- 林景卫贾佳钟鸣陈丽静李浩戈郭志富齐明芳刘立侠李天来
- 关键词：金针菇毕赤酵母组成型表达
- 芘高效降解菌ZQ_5的培养条件及无机元素对其降解效率的影响被引量：4
- 2012年
- 以从我国最大的石油污水灌区之一——沈抚灌区污染土壤分离到的以芘为惟一碳源、能源生长的高效降解菌株ZQ5为实验材料,通过对菌株ZQ5培养条件的优化,以及采用摇瓶振荡培养方法测定菌株ZQ5对不同浓度芘的降解率,表明:菌株ZQ5在30℃振荡培养16 d后对150 mg/L芘的降解率为90.31%。通过模拟稻田施用N、P和K肥等的土壤环境,探索了无机营养元素对降解菌ZQ5降解能力的影响,发现土壤中混合加入N、P和K无机营养元素的降解率能达到82%以上,比单加某种营养元素对降解菌ZQ5的降解效果好。本研究结果可以指导稻田PAHs的原位生物修复。
- 白鹏钟鸣赵媛媛杨峰林景卫李浩戈马慧
- 关键词：多环芳烃降解效率生物修复
