李泉江
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 供职机构：第二军医大学附属长海医院更多>>
- 发文基金：上海市重大科技攻关项目国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学电子电信更多>>
- 小檗碱治疗腹泻的分子机制研究被引量：12
- 2010年
- 目的:探讨小檗碱治疗腹泻的可能分子机制。方法:利用番泻苷A诱导建立BALB/c小鼠的腹泻模型,给予小檗碱治疗处理,采用半定量RT-PCR检测影响肠管钠水吸收的钠-氢交换体1(NHE1)和钠-氢交换体3(NHE3)的表达情况;利用免疫组织化学的方法,作进一步证实。结果:半定量RT-PCR表明小檗碱处理组NHE3mRNA的表达水平较腹泻组小鼠明显增高,但与正常对照组相比,无显著性差异;而NHE1mRNA的表达水平在三组间并无明显差异。免疫组化的结果也证实,与正常对照组和处理组小鼠相比,腹泻组小鼠NHE3的表达水平明显下调。结论:小檗碱可通过上调NHE3mRNA和蛋白的表达而不是NHE1的表达,进而增强肠管对钠水的吸收,从而发挥治疗腹泻的作用。
- 张永国王新刘霖柴娜李泉江吴开春
- 关键词：免疫组织化学
- 肽核酸钳制-PCR/K-ras突变检测方法在结直肠癌组织中的诊断应用
- 2013年
- 目的确定本实验室建立的肽核酸钳制(PNA)-PCR/K-ras突变检测方法的阳性判断标准,并评价其对结直肠癌组织的诊断价值。方法将含K-ras基因12密码子突变的质粒和野生质粒以不同比例(突变/总体:0,1/3 200,1/1600,1/800,1/400,1/200,1/100)混合作为标准样品,独立配制6个批次并分别进行PNA-PCR/K-ras突变检测,收集Kras突变CT值及K-ras总体CT值,计算ΔCT值(突变CT值-总体CT值),采用ROC曲线分析突变CT值和ΔCT值诊断K-ras突变的最适Cut-off值,联合两者最适Cut-off值,设定该方法的最终阳性判断标准。分别采用该方法和直接测序法对35例结直肠癌组织及对应癌旁组织进行K-ras突变检测并比较分析。结果突变模板浓度为1/800及以上的标准样品突变CT值和ΔCT值与阴性标准品之间差异存在统计学意义(P<0.05);突变CT值和ΔCT值的最适Cut-off值分别为41.7和15.4。最终阳性判断标准为突变CT值≤41.7或ΔCT值≤15.4,对应的ROC曲线下面积为0.955(P=0.001),以此判断标准,各标准样品(0,1/3 200,1/1 600,1/800,1/400,1/200,1/100)的阳性检测率分别为0%、66.7%、83.3%、100%、100%、100%、100%,检测下限为1/800。在结直肠癌及癌旁组织标本中,该方法阳性检测率为45.7%(32/70),与直接测序法(18.6%,13/70)比较差异具有统计学意义(P=0.000)。结论 PNA-PCR/K-ras突变检测方法具有较高的检测灵敏度,在结直肠癌组织样本中具有较直接测序法更高的阳性检出率。
- 李泉江胡佳佳金晶吴洪玉满晓华朱玲高军李兆申
- 关键词：K-RAS基因突变
- 精确定量胃癌相关抗原MG7Ag的Immuno-Realtime PCR检测方法的建立
- 陈峥洪流李泉江贴君乔太东吴开春樊代明
- 文献传递
- 肿瘤标记物在胰腺癌早期诊断中的应用被引量：3
- 2014年
- 胰腺癌是一种死亡率极高的恶性肿瘤,早期症状缺乏特异性。当疑似此病时,多数已处于晚期,所以提高胰腺癌的早期诊断率尤为重要。最近几年,许多研究聚焦于胰腺癌早期阶段存在的相关标记物,包括肿瘤组织中的标记物、体液中的肿瘤标记物和粪便标记物。本文就目前胰腺癌肿瘤标记物的诊断应用研究做一综述。
- 丁佳寅李泉江姜瀚高军李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤肿瘤标记体液粪便
- 胰腺癌及相关胰腺疾病组织中K-ras12、13密码子突变的检测及其临床诊断价值被引量：3
- 2012年
- 目的研究K-ras基因第12、13位密码子突变在胰腺导管腺癌及相关胰腺疾病组织中的定量检测及其临床意义。方法收集经手术切除的130例（胰腺导管腺癌105例，胰腺腺鳞癌8例，胰腺黏液腺癌2例，内分泌癌3例，十二指肠及壶腹部恶性肿瘤6例，胰腺良性疾病6例）有明确病理诊断的组织标本及临床资料，应用双荧光探针联合肽核酸钳制实时定量PCR方法检测组织中K-ras基因第12、13密码子的突变量，以突变量〉100拷贝为阳性计算突变阳性率。结果胰腺导管腺癌、腺鳞癌、黏液腺癌、内分泌癌、十二指肠及壶腹部恶性肿瘤、胰腺良性疾病的K-ras12密码子突变量的中位数及四分位数分别为4062（495，10800）、238（45，8420）、15（9，21）、3（3，16）、2283（73，5037）和21（8，56）；突变阳性率分别为84．8％（89／105）、50．0％（4／8）、0、0、66．7％（4／6）和16．7％（1／6）。胰腺导管腺癌的K-ras12密码子突变量及阳性率与胰腺腺鳞癌、十二指肠及壶腹部恶性肿瘤差异无统计学意义，而较胰腺黏液腺癌、内分泌癌、胰腺良性疾病显著增加（P值均〈0．05）。通过接受者操作特征（ROC）曲线分析，胰腺导管腺癌K-ras12密码子突变的曲线下面积为0．727，诊断胰腺导管腺癌的敏感性及特异性分别为84．8％、64．0％。胰腺导管腺癌的K-ras基因第12密码子突变量与患者生存期显著相关。胰腺导管腺癌的K-ras13密码子突变量及阳性率与其他胰腺疾病的差异无统计学意义。结论K-ras12密码子基因突变对胰腺癌有较好的鉴别诊断及患者预后判断价值。
- 朱艳平李泉江高军顾俊俊黄浩杰李兆申
- 关键词：K-RAS基因密码子
- 检测K-ras基因突变的探针、引物、试剂盒及方法
- 本发明公开一种检测K-ras基因突变的探针，该探针是与K-ras基因第13位密码子的突变型序列特异性结合的Taqman MGB荧光探针。本发明还公开了一种检测K-ras基因突变的引物及试剂盒，该试剂盒包括：与K-ras基...
- 李兆申高军金晶李泉江唐旖旎朱艳萍丁佳寅诸娴王玉琼
- 文献传递
- 胰腺癌高危人群外周血K-ras12密码子和K-ras13密码子突变的定量检测和意义
- 2013年
- 目的探讨胰腺癌高危人群外周血K—rasl2密码子和K—rasl3密码子突变量检测的临床价值。方法收集2010年5月至2011年11月有胰腺癌高危因素且诊断明确者160例，其中最终确诊胰腺癌36例，慢性胰腺炎（CP）36例，自身免疫性胰腺炎（AIP）6例，其他恶性肿瘤16例，胰腺良性肿瘤13例，胆总管结石13例，其他良性疾病40例。采集所有入选者的空腹外周静脉血，以肽核酸钳制实时荧光定量PCR法检测K—rasl2密码子和Krasl3密码子突变量。两组间突变量的比较采用Mann—WhitneyU检验，率的比较采用卡方检验。根据ROC曲线计算K—rasl2和K—rasl3突变阳性判定值和突变阳性率。结果胰腺癌组K—rasl2密码子突变量[i154（2207）]与其他良性疾病组[-476（973）]、CP组[-446（808）]、胆总管结石组[357（568）]比较差异均有统计学意义（u=502、446、117，P均d0．05）。胰腺癌组Krasl3密码子突变量与其他良性疾病组、CP组、胆总管结石组、AIP组、胰腺良性肿瘤组、其他恶性肿瘤组比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。K—rasl2密码子突变量〉i000拷贝为K—rasl2突变阳性判定值时，胰腺癌和非胰腺癌的K—rasl2突变阳性率分别为55．6％（20／s6）和25．0％（31／124），以K—rasl2突变鉴别胰腺癌和非胰腺癌的ROC曲线下面积为0．664，具鉴别诊断价值（P=0．003）。以K—rasl3突变鉴别胰腺癌与非胰腺癌的ROC曲线下面积为0．522，无鉴别诊断价值（P=0．695）。吸烟者和不吸烟者的K-ram3密码子突变量[分别为943（1510）和571（964）]差异有统计学意义（u=1779，P=0．010）。结论外周血Krasl2突变或可用于胰腺癌的筛查。
- 朱艳平王丽华高军李泉江金晶李兆申
- 关键词：RAS密码子点突变流行病学研究
- 肽核酸钳制-PCR检测K-ras突变法的阳性判断阈值及检测下限的研究
- 2015年
- 目的确定肽核酸钳制-PCR（PNA-PCR）检测K-ras突变的阳性判断阈值（Cutoff）和检测下限。方法将含K-ras基因12或13密码子突变的胰腺癌细胞株PANCl、SWl990基因组DNA以不同的浓度分别与K-ras野生型的胎盘DNA混合配制成含不同突变率（0、0．1％、0．2％、0．4％、0．8％、1．6％、3．1％、6．25％、12．5％、25％、50％）的样本，并制备1％突变率PANCl细胞及30％突变率SWl990细胞DNA总量分别为50、20、5、1ng和50、10、5、1ng的样本。应用PNA-PCR方法检测样本中的K-ras基因12、13密码子突变，收集它们的突变ct值、总体ct值，并计算出ACt值（突变ct值-总体ct值）。实验重复10次。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析ACt值，确定K-ras基因突变的最适Cutoff值，计算诊断阳性率及确定诊断下限。结果所有不同突变率的PANCl细胞12密码子突变以及SWl990细胞13密码子突变的突变ct值及ACt值与阴性对照样本的差异均有统计学意义（P值均〈0．05），而总体ct值与阴性对照样本的差异无统计学意义。诊断K-ras基因12密码子突变的ROC曲线下面积（AUC）为0．926，最适Cutoff值为11，相应的敏感度和特异度为84％和100％，检出下限为0．4ng；诊断K-ras基因13密码子突变的AUC为0．906，最适Cutoff值为9．5，相应的敏感度和特异度为71％和100％，检测下限为1．5ng。固定突变率的检测结果进一步确定上述的检测下限。结论成功确立了PNA-PCR法检测K-ras基因12、13密码子突变的Cutoff值和检测下限，达到临床应用的要求。
- 丁佳寅高军李泉江金晶吴洪玉满晓华李兆申
- 关键词：突变
- 定量免疫PCR检测血清胃肿瘤相关MGAgs新方法的建立及在胃癌早期诊断中的预警价值
- 2010年
- 建立定量免疫PCR检测血清胃肿瘤相关MGAgs新方法及研究其在胃癌早期诊断中的预警价值。采用定量免疫PCR技术检测43例胃癌、37例健康献血员血清中MGAgs的含量。研究显示,血清MGAgs含量在健康对照组与胃癌组组间存在显著差异(P<0.01),应用定量免疫PCR方法检测50μL血清MGAgs的截断值相当于为5972个MKN45细胞裂解所得抗原。研究表明,定量免疫PCR技术检测血清MGAgs抗原具有较高的灵敏性和稳定性,通过对胃癌患者血清中MGAgs进行定量检测,可能用于胃癌的诊断和鉴别诊断。
- 李泉江陈峥靳斌张永国吴开春
- 关键词：胃癌
