李朝旭
- 作品数：30 被引量：115H指数：8
- 供职机构：桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金桂林市科学研究与技术开发项目更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程机械工程更多>>
- γδT细胞经唑来膦酸刺激后对骨肉瘤细胞的杀伤作用被引量：8
- 2010年
- 目的:探讨外周血γδT细胞经唑来膦酸刺激后对骨肉瘤细胞株HOS的体内外杀伤作用及相关机制。方法:取健康人外周血5 mL,经唑来膦酸刺激后,在含IL-2的培养液中,培养14 d。用流式细胞仪测定γδT细胞所占的比例,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测其对骨肉瘤细胞株HOS的体外杀伤作用,并用抗人γδTCR抗体、抗人NKG2D抗体和穿孔素/颗粒酶阻滞剂CMA分别预处理γδT细胞,观察杀伤作用的变化。另用骨肉瘤细胞株HOS注入BALB/c裸鼠皮下建立骨肉瘤裸鼠种植瘤模型。随机将裸鼠分为2组,分别为未治疗组、γδT细胞治疗组。观察裸鼠瘤体大小及称量瘤重。结果:PBMCs经唑来膦酸刺激14 d后γδT细胞阳性率达到(95±3)%。当效靶细胞比为6∶1、12∶1、25∶1、50∶1时,对HOS细胞的杀伤率分别为26.8%、31.5%、37.8%、40.9%。用Anti-γδTCR抗体、Anti-NKG2D抗体及CMA预处理γδT细胞后,当效靶细胞比为25∶1时,对HOS的杀伤率分别为32.3%、4.7%、16.7%。体内抑瘤实验中,γδT细胞治疗组的肿瘤生长抑制率为42.78%。结论:PBMCs经唑来膦酸刺激后,可获得高纯度的γδT细胞,在体内外其对骨肉瘤细胞株HOS有较强的杀伤作用。
- 蒋晖徐强杨超曹贞国李朝旭叶招明
- 关键词：ΓΔT细胞唑来膦酸细胞毒活性裸鼠
- 丙戊酸钠增强γδT细胞对骨肉瘤的杀伤被引量：3
- 2016年
- 目的观察丙戊酸钠（VPA）对γδT细胞杀伤骨肉瘤（OS）作用的影响。方法2mmol／L VPA预处理OS细胞株HOS和U2OS细胞±8h，乳酸脱氢酶（LDH）实验检测γδT细胞对OS细胞的杀伤活性，流式细胞术检测细胞表面主要组织相容性复合体I链相关分子A／B（MICA／B）的表达，应用抗自然杀伤细胞受体2D抗体（NKG2D）确定VPA增强γδT细胞识别、杀伤OS细胞的途径。结果HOS和U2OS细胞表面MICA／B的平均荧光强度（MFI）分别为1007．3±251．±和923．7±148．0，VPA预处理OS细胞株HOS和U2OS细胞分别达到1523．1±201．0和1236．9±178．0。在效靶细胞比为1．5：1．0、3．0：1．0、6．0：1．0和12．0：1．0，γδT细胞对0S细胞株HOS和U2OS的杀伤率分别为（11．3±1.6）％、（21．7±2．8）％、（33．8±3．7）％、（±8．4±2．8）％和（6．3±2．6）％、（16．3±2．±）％、（2±．7±1．5）％、（35．2．±3．6）％；对VPA预处理OS细胞株HOS和U2OS细胞的杀伤率分别达到（18．3±1．5）％、（41．1±2．1）％、（56．5±2．6）％、（69．1±3．4）％和（13．2±1．8）％、（29．1±3．6）％、（38．6±2．2）％、（50．3±3．2）％。抗人NKG2D抗体阻断γδT细胞对OS细胞株HOS和U2OS的杀伤率为25．7％和27．1％；对VPA预处理OS细胞株HOS和U2OS为55．6％和52．6％。结论VPA增强γδT细胞对OS细胞的杀伤活性，其机制通过NKG2D途径实现。
- 李朝旭王锐英唐际存
- 关键词：骨肉瘤丙戊酸钠免疫治疗
- 唑来膦酸对骨肉瘤患者PBMCs来源γδT细胞抗骨肉瘤作用的影响被引量：8
- 2013年
- 目的探讨唑来膦酸对骨肉瘤患者外周血单个核细胞(PBMCs)来源γδT细胞杀伤骨肉瘤作用的影响。方法使用唑来膦酸联合IL-2体外扩增原发性、复发性和转移性骨肉瘤患者PBMCs来源γδT细胞,LDH法检测γδT细胞的杀伤活性,ELISA法检测γδT细胞分泌IFN-γ情况,并应用不同的抗体确定γδT细胞识别、杀伤骨肉瘤细胞的途径。建立裸鼠HOS骨肉瘤移植瘤模型,尾静脉分别注射生理盐水、唑来膦酸、γδT细胞及唑来膦酸联合γδT细胞,观察并比较不同方法对裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果骨肉瘤患者PBMCs体外经过唑来膦酸联合IL-2刺激可高度选择性扩增γδT细胞,并且扩增后的γδT细胞具有杀伤骨肉瘤细胞的能力。唑来膦酸预处理骨肉瘤细胞后可显著增强γδT细胞的杀伤活性,γδT细胞识别、杀伤唑来膦酸预处理骨肉瘤细胞主要通过TCR途径和穿孔素-纤溶酶途径,NKG2D途径和TRAIL途径发挥作用较小。体内实验表明,唑来膦酸联合γδT细胞治疗对肿瘤生长的抑制作用强烈而持久,显著优于单独唑来膦酸治疗组和单独γδT细胞治疗组。结论唑来膦酸能够促进骨肉瘤患者PBMCs来源γδT细胞的增殖,并能够增强γδT细胞的抗骨肉瘤作用。
- 李朝旭唐际存孙凌凌叶招明
- 关键词：骨肉瘤ΓΔT细胞唑来膦酸细胞毒活性免疫治疗
- γδT细胞对耐甲氨蝶呤骨肉瘤细胞株U20S的杀伤作用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨γδT细胞对耐甲氨蝶呤（MTX）骨肉瘤（OS）细胞的杀伤作用。方法以MTX为诱导剂，采用逐步增加药物剂量冲击诱导方法，诱导建立人耐MTXOS细胞株U20S／MTX细胞。使用唑来膦酸（ZOL）联合IL-2体外扩增人γδT细胞，乳酸脱氢酶释放法（LDH）检测16T细胞对U20S／MTX细胞株的杀伤活性，流式细胞技术检测78T细胞表面CD69的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测γδT细胞IFN-γ的分泌。结果健康人外周血单个核细胞（PBMC）来源的16T细胞具有杀伤U20S／MTX耐药细胞株的能力。经过ZOL（1μmol／L）24h预处理U20S／MTX耐药细胞株，78T细胞杀伤U20S／MTX耐药细胞株的能力显著增加（P〈0．01）。U20S和U20S／MTX耐药细胞株均能提高γδT细胞表面CD69的表达和IFN-γ的分泌（P〈0．05）；ZOL（1μmol／L）24h预处理U20S／MTX耐药细胞株后可显著增强78T细胞表面CD69的表达和IFN-1的分泌（P〈0．01）。结论75T细胞对人0S细胞株U20S／MTX具有杀伤作用，ZOL能增强γδT细胞对人OS细胞株U20S／MTX的杀伤作用。
- 李朝旭王锐英唐际存
- 关键词：骨肉瘤ΓΔT细胞免疫治疗甲氨蝶呤
- γδT细胞过继细胞免疫治疗恶性实体肿瘤研究进展被引量：11
- 2015年
- 近年来对恶性实体瘤的治疗效果有了显著提高,但发生复发和转移的比例仍较高。免疫治疗是恶性肿瘤治疗的有效方法之一,其中过继免疫细胞治疗是目前研究的热点。与需要抗原提呈并具有主要组织相容性复合体(MHC)限制性的αβT细胞不同,γδT细胞对肿瘤细胞的识别、杀伤显现出MHC非限制性,因此γδT细胞作为种子细胞的过继免疫治疗得到了人们的关注。目前已证实γδT细胞针对多种恶性实体瘤具有杀伤作用,尤其重要的是临床验证了γδT细胞对部分恶性实体瘤的有效性。本文综述了γδT细胞的分型、作用机制和应用现状,重要的是,讨论了γδT细胞联合双磷酸盐、基因调整的αβTCR转染γδT细胞治疗恶性实体瘤的可能策略。
- 李朝旭唐际存
- 关键词：T细胞免疫治疗过继肿瘤
- 弹性髓内钉治疗儿童桡骨颈骨折被引量：9
- 2013年
- 目的：探讨应用弹性髓内钉治疗儿童桡骨颈骨折的疗效。方法：2006年7月至2011年12月，采用弹性髓内钉治疗25例桡骨颈骨折患者，其中男16例，女9例；年龄7～15岁，平均10．7岁；按照Judet分型：Ⅱ型6例，Ⅲ型17例，Ⅳ型2例（Ⅳa型1例，1Vb型1例）。术后记录患儿桡骨颈骨折愈合情况，肘关节的疼痛、畸形和活动范围。结果：所有患儿获随访，时间6～24个月，平均14个月。25倒桡骨颈骨折均获得良好愈合。按照Tibone-Stoltz的临床功能评定标准，优18例，良4例，中3例。结论：弹性髓内钉治疗儿童桡骨颈骨折手术操作简单，创伤小，疗效良好。
- 姚陆丰叶招明李朝旭仲肇平徐荣明
- 关键词：桡骨骨折骨折固定术髓内儿童
- 锁骨恶性肿瘤切除术后疗效及功能评价
- 目的锁骨恶性肿瘤发病率较低,临床由于发病隐袭,容易漏诊.评价锁骨恶性肿瘤切除术后肿瘤疗效及肩关节功能评分.方法对2000年1月-2010年12月在我院行手术锁骨全切除治疗的锁骨恶性肿瘤9例患者资料进行分析.结果随访所有9...
- 叶招明章淼锋李朝旭
- 文献传递
- 并联腓骨组织瓣修复足跟骨及软组织缺损被引量：8
- 2014年
- 目的 探讨应用并联腓骨组织瓣修复足跟骨及软组织缺损的临床疗效. 方法 2006年1月至2011年12月,采用并联腓骨组织瓣修复足跟骨及软组织缺损4例.致伤原因为车祸伤2例,机器绞扎伤2例.其中跟骨后1/2缺损2例,后2/3缺损2例,均伴有足跟软组织不同程度缺损和跟腱断裂.均为择期手术,采用并联腓骨组织瓣修复足跟骨及软组织缺损. 结果 术后随访24～ 72个月,自体移植腓骨均骨性愈合,未见明显吸收、感染和排斥反应等并发症.按美国AOFAS踝-足评分标准：优1例,良2例,可1例. 结论 并联腓骨组织瓣修复足跟骨及软组织缺损可较好地恢复容貌和足跟功能,提高了患者的生活质量.
- 李朝旭王锐英唐际存
- 关键词：跟骨腓骨
- Ⅰ型IFN体外增强人γδT细胞对骨肉瘤的杀伤作用被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨Ⅰ型干扰素(IFN)对人来源γδT细胞杀伤骨肉瘤作用的影响。方法:取健康人和骨肉瘤患者外周血来源的单个核细胞,分别使用唑来膦酸(Zol)、Zol和Ⅰ型IFN体外刺激扩增,流式细胞技术检测γδT细胞的纯度,计算扩增倍数。以Zol刺激体外扩增的γδT细胞为对照组,Zol联合Ⅰ型IFN刺激体外扩增的γδT细胞为实验组,LDH法检测不同方法扩增的γδT细胞的细胞毒活性,ELISA法检测γδT细胞分泌的IFN-γ。结果:Zol、Zol联合Ⅰ型IFN均可高度选择性扩增健康人和骨肉瘤患者外周血单核细胞中的γδT细胞,扩增后γδT细胞具有杀伤骨肉瘤细胞的能力。Ⅰ型IFN预处理γδT细胞后可显著增强γδT细胞的杀伤活性。结论:Ⅰ型IFN能够促进人γδT细胞的抗骨肉瘤作用。
- 李朝旭王锐英唐际存
- 关键词：骨肉瘤ΓΔT细胞细胞毒活性
- 唑来膦酸刺激健康人和骨肉瘤PBMCs体外扩增γδT细胞被引量：8
- 2012年
- 目的:探讨唑来膦酸(Zol)联合IL-2对健康人和骨肉瘤患者末梢血γδT细胞的扩增和细胞毒性作用的影响。方法:取健康人和骨肉瘤患者外周血来源的单个核细胞,分别使用IL-2和Zol联合IL-2刺激体外扩增,流式细胞技术检测γδT细胞的纯度,并计算其扩增倍数。以Daudi细胞作为阳性对照、Raji细胞为阴性对照,并以人成骨细胞系hFOB细胞作为正常对照,用LDH法检测扩增后γδT细胞的细胞毒活性的变化。结果:健康人和骨肉瘤患者外周血单核细胞经过体外14 d的培养,Zol联合IL-2组可高度选择性扩增γδT细胞,并且扩增后γδT细胞具有杀伤活性,而对正常细胞无杀伤活性。结论:健康人和骨肉瘤患者PBMCs经唑来膦酸联合IL-2刺激后,可获得高纯度具有较强的杀伤作用的γδT细胞。
- 李朝旭孙凌凌程瑞林孙正旺叶招明
- 关键词：ΓΔT细胞唑来膦酸细胞毒活性
