李敏伟
- 作品数：90 被引量：441H指数：12
- 供职机构：浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同结合臂长10-23 DNAzymes对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用
- 目的:探讨不同结合臂长10-23 DNAzymes在2．2．15细胞内对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用。方法:设计并合成不同结合臂长的10-23 DNAzymes,能分别针对乙型肝炎病毒S 基因和C基因开放阅读...
- 沃健儿侯伟刘克洲李敏伟陈离伟胡中荣刘荣华胡敏君
- 文献传递
- 慢性HCV感染者外周血淋巴细胞化学趋化因子受体CCR6表达及意义被引量：1
- 2003年
- 目的 探讨化学趋化因子受体CCR6在慢性丙型肝炎病毒 (HCV)感染者外周血淋巴细胞中表达状况及意义。方法 对中国大陆北、中、南三个区域的部分地区进行随机抽样后 ,采集 2 0 4例慢性HCV感染者外周抗凝血 ,用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CCR6表达情况。结果 与正常人比较 ,慢性HCV感染者CCR6的表达明显升高 ,差异有显著性 (P <0 .0 1 ) ;肝功能异常者CCR6的表达低于肝功能正常者 ,差异亦有显著性 (P <0 .0 1 )。结论 慢性HCV感染者外周血淋巴细胞被激活 ,部分激活的效应性T细胞在CCR6介导下迁移至肝脏 ,引起局部免疫 。
- 张萍陈智陈峰李敏伟
- 关键词：慢性HCV感染外周血淋巴细胞趋化因子受体CCR6慢性丙型肝炎
- HBx-siRNA快速筛选体系的建立和应用被引量：5
- 2004年
- 目的 :建立针对 HBx的小干扰 RNA(si RNA)快速筛选体系。方法 :1构建 HBx与增强型绿色荧光蛋白(EGFP) N端融合表达质粒 ;2用一步 PCR法 ,制备针对 HBx m RNA的 RNA多聚酶启动子 - si RNA表达框(SEC) ;3将 SEC转染 HBx- EGFP瞬时表达的 AD2 93细胞 ,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察分析 SEC对 HBx- EGFP荧光表达的抑制效果 ,从而确定有效 si RNA。结果 :1成功构建 HBx- EGFP融合表达质粒 p HBx- EGFP,在瞬时表达细胞中 ,HBx- EGFP绿色荧光主要呈颗粒状 ,聚集在核膜与核膜外周或细胞浆 ;2共转染 SEC能有效抑制 HBx- EGFP的瞬时表达。与 si HBx2 71相比 ,si HBx388是一高效 si RNA位点 ,并且该位点与 t RNAVal和 H1启动子搭配更有效。结论 :成功建立表达 HBx的荧光蛋白报告体系 ,结合快速制备 SEC的方法 ,可用于进行 HBx有效 si
- 倪勤刘克洲羊正纲姚航平爱德华李敏伟陈智
- 关键词：发光蛋白质类HBX增强型绿色荧光蛋白小干扰RNA
- 慢性乙型肝炎患者抗病毒中调节性T细胞、辅助性T细胞17表达特点及与疾病进展关系被引量：3
- 2015年
- 目的 了解慢性乙型肝炎（CHB）患者抗病毒中调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞（Th）17的表达水平,分析Treg/Th 17与疾病进展的相关性,并探讨其在CHB发病中的作用.方法 选择53例CHB患者（CHB组）和21例健康体检者（健康对照组）,CHB轻度18例,中度16例,重度19例,采用流式细胞术检测Treg和Th17表达水平,并比较;采用全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、胆碱酯酶、白蛋白,并进行相关性分析.结果 CHB组治疗前、治疗24周后及健康对照组Th17、Treg、Treg/Th 17分别为（2.13±0.65）％,（2.99±0.68）％,（3.59±0.75）％和（6.07±1.18）％,（5.14±0.96）％,（4.02±0.77）％和2.86±0.67,1.73±0.45,1.04±0.34,三者比较差异均有统计学意义（F=14.78,10.12,17.19;P＜ 0.01）.Th17表达水平在CHB轻度、中度和重度患者逐渐下降,但差异无统计学意义（F=1.10,P=0.337）.Treg表达水平在CHB轻度、中度和重度患者逐渐上升,但差异也无统计学意义（F=0.54,P=0.585）.Treg/Th 17随疾病的加重而升高（2.58±0.59,2.76±0.63,3.21±0.71）,差异有统计学意义（F=3.15,P＜0.01）,重度与轻度、中度比较差异有统计学意义（P＜0.05）,且Treg/Th 17与ALT、TBIL水平呈正相关（r=0.272,P=0.000;r=0.226,P=0.000）.结论 Treg/Th 17平衡不仅与CHB致病机制相关,而且还与肝组织免疫炎性反应相关.
- 顾利江王雪芬李敏伟
- 关键词：调节性T细胞辅助性T细胞17疾病进展HELP
- 不同结合臂长10-23DNAzymes对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用被引量：3
- 2006年
- 目的探讨不同结合臂长1023DNAzymes在2.2.15细胞内对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达的抑制作用。方法设计并合成不同结合臂长的1023DNAzymes,能分别针对乙型肝炎病毒S基因和C基因开放阅读框A157UG和A1816UG。不同的1023DNAzymes分别转染2.2.15细胞,放射免疫分析法测定2.2.15细胞培养上清中HBsAg和HBeAg水平,实时荧光定量PCR法测定2.2.15细胞培养上清中HBVDNA水平。MTT法检测细胞毒性。结果不同结合臂长的1023DNAzymes在0.1～2.5μmol/L浓度范围内均能有效抑制HBsAg和HBeAg的表达,抑制效应可长达72h。在同一剂量相同转染时间的条件下,不同结合臂长的1023DNAzymes对HBsAg和HBeAg表达的抑制率呈以下关系:DrzBS9>DrzBS8>DrzBS7;DrzBC9>DrzBC8>DrzBC7。DrzBS9和DrzBC9在2.5μmol/L剂量条件下,转染48h后对HBsAg和HBeAg表达的抑制率可分别高达95%和92%。不同结合臂长的1023DNAzymes对2.2.15细胞培养上清中HBVDNA水平并无明显影响。MTT细胞毒性检测表明,在0.1～2.5μmol/L浓度范围内未见1023DNAzymes对2.2.15细胞的毒性作用。结论不同结合臂长1023DNAzymes在2.2.15细胞内对乙型肝炎病毒S基因和C基因表达均有一定的抑制作用,DrzBS9和DrzBC9的抑制作用较强。
- 侯伟沃健儿刘克洲李敏伟陈离伟胡中荣刘荣华胡敏君
- 关键词：DNAZYMES基因C基因乙型肝炎病毒
- 26例急性脑梗死患者血小板功能观察被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨急性脑梗死患者血小板活性的改变。方法 选用26例急性脑梗死患者(70.5±9.2岁,男/女:16/10例),在发病第一周内留取血样,其中10例患者第二周再次取血;20例健康体检者(68.3±11.2岁,男/女:11/9)为正常对照组。使用全血流式细胞仪法检测血小板表面CD62p分子阳性的血小板百分数。结果CD62p^+血小板百分数在急性脑梗死发病第一、二周,以及正常对照组分别为4.46±2.51、2.35±1.52和0.73±0.47,t检验示脑梗死组较对照组高(第一周;t=7.42,P=0.00;第二周:t=3.29,P=0.00;10例患者发病第一周较第二周CD62p^+血小板百分数明显高(4.93±2.81和2.35±1.52％,t=3.54,P=0.06);第一周CD62p^+血小板百分数与年龄、性别、高血压、糖尿病和吸烟的多元回归分析,未发现与血小板激活显著相关的因素。结论 急性脑梗死发病初期血小板活性最高,然后急剧下降,但仍较正常明显增高。
- 方亚平李敏伟郑旭宁朱雄超柳扬
- 关键词：急性脑梗死血小板功能流式细胞仪
- 10-23 DNAzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的切割活性
- 目的:探讨10-23 DNAzyme对乙型肝炎病毒C基因体外转录产物的特异切割活性。方法:设计并合成3 种能针对乙型肝炎病毒C基因开放读码框(ORF)A1816UG的特异性10-23 DNAzymes,分别命名为DrzB...
- 沃健儿刘克洲侯伟李敏伟
- 文献传递
- 乙型肝炎患者CD4+、CD8+淋巴细胞TNF相关凋亡诱导配体上调与肝损伤相关性的研究
- 目的:探索乙型肝炎患者的T淋巴细胞肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)上调参与肝脏免疫病理的机制。方法:采用流式细胞技术及夹心酶联免疫吸附分析58例慢性乙型肝炎患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞膜TR...
- 陈公英何剑琴吕国才李敏伟徐陈槐范维薇陈智
- 关键词：T淋巴细胞CD8+CD4+肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- 文献传递
- 聚合物高分子材料表面改性的方法
- 本发明公开的聚合物高分子材料表面改性的方法，是以清洁后的聚合物高分子材料为衬底，将其置于脉冲激发等离子体化学气相沉积装置的反应室中，先向反应室通入氩气和氢气，用产生的等离子体对室温或加热至50-100℃的衬底进行活化处理...
- 张溪文李敏伟
- 文献传递
- 一种制备非晶氢硅薄膜的装置
- 本实用新型公开的制备非晶氢硅薄膜的装置，包括绝缘陶瓷制的反应室，反应室的相对两壁设有对称的平面狭缝式进气通道和出气通道，反应室内有两块上下平行的电极，上电极与高压脉冲电源相连，其下表面覆盖厚度2mm以下的陶瓷板，下电极固...
- 张溪文李敏伟
- 文献传递
