李娟娟
- 作品数：15 被引量：19H指数：3
- 供职机构：西南交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学交通运输工程更多>>
- 一种酶法合成阿魏酸的方法
- 本发明公开了一种酶法合成阿魏酸的方法，将S-腺苷甲硫氨酸(SAM)上的甲基转移至咖啡酸上，最终形成产物阿魏酸，包括以下步骤:a)通过大肠杆菌的发酵高效表达川芎咖啡酸-O甲基转移酶COMT，通过离心收集菌体，用Tris-H...
- 廖海周嘉裕张赶李娟娟俞继华李洋洋黄新河
- 文献传递
- 内撑式条形深基坑支护结构的优化研究
- 本文通过处理分析哈尔滨地铁车站基坑的施工现场监测数据，发现支护结构的实测位移、地表沉降等比原设计方案都偏小，得出支护结构设计偏保守的结论。设计过于安全、保守会造成经济上的浪费，因此有必要对其支护结构进行优化研究。基坑支护...
- 李娟娟
- 关键词：地铁车站施工现场支护结构优化设计
- 决明Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因(CoTI2)的克隆、表达与分析
- 决明(Cassia obtusifolia L.)是豆科一年生植物，作为传统药食同源的中草药，其干燥成熟种子即为决明子，是主要的药用部位。前期研究表明，决明中含有胰蛋白酶抑制剂，具有抗鳞翅目害虫的活性。本文首先通过对决明...
- 李娟娟
- 关键词：决明基因克隆基因表达
- 决明COKI基因在提高植物耐盐及抗旱性中的应用
- 本发明提供了一种决明COKI基因在提高植物耐盐及抗旱性中的应用，该基因核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明首次发现决明COKI基因具有促进植物在盐及干旱胁迫环境下快速生长的用途，本发明也通过实验证明转入COKI...
- 廖海周嘉裕向缅李娟娟廖东颖
- 文献传递
- Kunitz蛋白酶抑制剂基因的密码子偏好性分析被引量：2
- 2014年
- 目的:分析豆科植物的Kunitz蛋白酶抑制剂(KTI)基因密码子偏好性,确定最适模式植物与外源表达系统。方法:运用Codon W等程序分析密码子偏好性,并用决明KTI基因验证分析结果的可信度。通过聚类分析,确定研究KTI基因功能的最适模式植物,比较决明KTI基因与酵母和大肠杆菌的基因组密码子偏好性,选择最优外源表达系统。结果:KTI基因对以A或U结尾的密码子偏好性强。豆科与茄科植物聚为一簇,表明烟草是研究KTI基因功能的最适模式植物。决明KTI基因和大肠杆菌、酵母基因组对比,有较大密码子使用频率差异的各有28、24个,表明酵母是最优外源表达系统。结论:确定研究KTI基因功能的最佳模式植物是烟草,酵母是最优外源表达系统,对基因改良与育种具有指导意义。
- 李娟娟黄宇刘祖碧朱乾坤宋涛周嘉裕廖海
- 关键词：密码子偏好性聚类分析
- 决明胰蛋白酶抑制剂1活性相关残基的定点突变与抑制活性分析被引量：2
- 2016年
- 决明胰蛋白酶抑制剂1(Co TI1)属于Kunitz胰蛋白酶抑制剂家族成员,通过序列比对预测Arg86、Leu84和Thr88等3个氨基酸残基可能是Co TI1发挥抑制作用的关键残基。通过定点突变的方法将Arg86、Leu84与Thr88残基分别突变为Asp残基,并考察各突变体对胰蛋白酶及棉铃虫等鳞翅目害虫消化酶的抑制作用。与Co TI1相比,Co TI1^(R86D)、CoTI1^(T88D)与CoTI1^(L84D)突变体对胰蛋白酶的抑制活性分别下降了93%、64%与59%;对棉铃虫、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾等3种鳞翅目害虫消化酶的平均抑制活性分别下降了88.7%、57%与60.7%。以上结果表明Arg86、Leu84与Thr88是Co TI1发挥抑制作用的关键残基,这为Co TI1的抑制分子机制及抗虫研究提供了重要的理论依据。
- 向缅朱建全俞继华李洋洋李娟娟刘祖碧王万军廖海周嘉裕
- 关键词：决明胰蛋白酶抑制剂定点突变
- 川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶的同源建模与分子模拟对接被引量：4
- 2015年
- [目的]分析川芎咖啡酸-3-O甲基转移酶(Caffeic acid-3-Omethyltransferase,COMT)序列特征、蛋白结构和活性位点。[方法]以紫花苜蓿中COMT的晶体结构为模板,利用同源建模构建川芎(Ligusticum chuanxiong Hort)COMT的三维模型。[结果]经过动力学优化后,川芎COMT的三维模型与紫花苜蓿COMT的结构极为相似,主要由α-螺旋和β-折叠构成,其中α-螺旋占37.26%、β-折叠占10.41%、无规卷曲占52.33%。川芎COMT含有两个重要的结构域:咖啡酸结合域与S-腺苷甲硫氨酸结合域,主要通过氢键与范德华力结合,其中咖啡酸与川芎COMT分子中的Asp208和Gly210形成氢键,S-腺苷甲硫氨酸与川芎COMT分子中的Ser186、Thr213、Ala215、Thr216、Trp268及Asp272等残基形成氢键。[结论]该文得到川芎COMT的序列特征、蛋白结构和活性位点,为该类COMT的催化机理研究和分子工程改造奠定基础。
- 宋涛冯斌李娟娟唐迪王万军廖海周嘉裕谭睿
- 关键词：同源建模川芎
- 决明胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其原核表达载体构建被引量：1
- 2015年
- [目的]克隆决明胰蛋白酶抑制剂全长cDNA序列,并构建原核表达载体。[方法]从决明种子中提取胰蛋白酶抑制剂总RNA,通过RT-PCR得到胰蛋白酶抑制剂cDNA,纯化后与PMD19-T载体连接,转化至大肠杆菌DH5α,获得了决明胰蛋白酶抑制剂基因的全长序列,并将该序列克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)/COTI。[结果]决明胰蛋白酶抑制剂基因核苷酸长度为630bp,编码一条长度为209个氨基酸的多肽。决明胰蛋白酶抑制剂与不同植物来源的Kunitz蛋白酶抑制剂有高度的同源性,表明其属于Kunitz蛋白酶抑制剂家族成员。所获重组质粒pET-28a(+)/COTI经过双酶切鉴定,其含有目的片段,且重组质粒构建正确。[结论]克隆了决明胰蛋白酶抑制剂的全长cDNA序列,并成功构建了含有该基因的原核表达载体,这为该基因的进一步表达及功能鉴定奠定了基础。
- 李洋洋阿尔古丽俞继华吴鹏飞许维嘉李娟娟刘祖碧王万军周嘉裕谭睿廖海
- 关键词：决明克隆原核表达载体
- 决明不同组织莽草酸激酶基因的表达模式与蒽醌含量分析被引量：3
- 2016年
- 分析莽草酸激酶基因在决明(Cassia obtusifolia L.)不同组织中的表达模式,同时测定不同组织中总蒽醌的含量,为研究莽草酸激酶在决明蒽醌生物合成中的作用提供理论依据。提取决明种子、愈伤组织与成熟叶等10个不同组织的总RNA,反转录合成c DNA,采用荧光定量PCR检测莽草酸激酶基因在不同组织的表达情况。同时,采用超声波强化法提取决明不同组织的总蒽醌,通过分光光度法测定其含量。莽草酸激酶基因在决明的根、愈伤组织与子叶中的表达量较高,在种子、果荚与茎中表达量较低。决明的种子、果荚、花及根中蒽醌类化合物含量较高,而成熟叶和胚轴则不含。决明中蒽醌的生物合成涉及多个组织,其生物合成的早期阶段(包括莽草酸激酶催化的反应)主要发生在根与子叶等组织,形成的中间产物运输到种子等组织中,完成生物合成的后期阶段并积累蒽醌终产物,为合理利用决明不同药用部位提供理论依据。
- 李洋洋李卓彬俞继华李娟娟王万军周嘉裕廖海
- 关键词：决明总蒽醌
- 决明丙二酰CoA:ACP转酰基酶基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2015年
- [目的]克隆决明丙二酰Co A:ACP转酰基酶(MCAT)基因并做序列分析。[方法]采用RACE法从c DNA中扩增出决明丙二酰Co A:ACP转酰基酶(MCAT)的CDS全长序列,推测出MCAT基因编码的氨基酸序列并进行序列分析。[结果]分析结果显示MCAT的CDS全长1 253bp,编码405个氨基酸。通过序列比对分析发现决明MCAT蛋白包含一个酰基转移酶超家族结构域,并且发现了一段高度保守的七肽模序。[结论]获得了决明MCAT的CDS全长,其编码的蛋白可能催化丙二酰Co A的转酰基反应,为决明脂肪酸的合成通路的阐明以及后期的决明脂肪酸的基因工程研究打下了坚实的基础。
- 张赶刘祖碧李娟娟俞继华李洋洋廖海周嘉裕谭睿
- 关键词：决明
