李丽莉
- 作品数：7 被引量：42H指数：3
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区教育厅基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 合成U3snRNA基因上游启动区构建ACC合成酶反义RNA-核酶嵌合基因的植物表达载体被引量：3
- 2002年
- 利用反义 RNA和核酶进行基因表达调控是当今植物分子生物学的研究热点之一 .但在转基因植物中 ,利用 RNA聚合酶 型启动区表达效率不高 .番茄 U3sn RNA基因由 RNA聚合酶 来转录 ,具有较高的转录效率 ,为一般转录效率的 1 0 0～ 1 0 0 0倍 .我们人工合成了番茄 U3sn RNA基因上游启动区 ( 1 5 2 bp) ,构建到番茄 ACC合成酶的反义 RNA-核酶嵌合 DNA序列的上游 ,然后将“启动区 -反义 RNA-核酶嵌合 DNA序列”插入到植物双元表达载体p GA6 4 3中 ,并用三亲融合法导入农杆菌 LBA4 40 4中 ,为研究 U 3sn RNA上游启动区增强反义
- 鲍国强扈廷茂海燕李丽莉
- 关键词：反义RNA植物分子生物学植物表达载体
- 利用番茄U3snRNA基因上游启动区构建植物表达载体及对烟草的转化被引量：4
- 2005年
- 利用番茄U3snRNA基因上游启动区和ACC合成酶反义RNA-核酶嵌合基因DNA片段,构建含U3snRNA基因上游启动区-ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合序列的表达载体,重组于植物双元表达载体pGA643中,得到pGU3R.用三亲融合法导入农杆菌LBA4404中,采用叶盘法转化烟草,诱导再生小植株,获得了卡那霉素的抗性植株.提取抗性植株总DNA,通过PCR、PCRSouthern杂交检测并分别用启动区序列和ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合序列作探针,通过Southern杂交检测,已筛选出整合有外源基因的转化植株.为进一步研究U3snRNA上游启动区增强反义RNA-核酶基因的表达奠定了基础.
- 李丽莉扈廷茂扈会平刘明秋苏慧敏
- 关键词：烟草反义RNA核酶
- 番茄ACC合成酶基因的反义RNA-核酶嵌合基因植物表达载体的构建及对番茄的转化被引量：24
- 2001年
- 将克隆的番茄 ACC合成酶基因的反义 RNA-核酶嵌合的 DNA序列用 Hind 和 Kpn I切割后重组于植物表达载体 p GA643中 ,用三亲融合法导入农杆菌 LBA4 40 4中 ,采用叶盘法转化番茄子叶 ,诱导出再生小植株 ,获得了卡那霉素的抗性植株 .提取植物总 DNA,用p GA643作探针 ,通过斑点杂交 ,已筛选出整合有外源基因的工程植株 .为进一步研究该嵌合基因对 ACC合成酶基因表达的影响及获得商品化的转基因番茄奠定了基础 .
- 张晓海扈廷茂海燕李丽莉王永胜
- 关键词：转基因番茄ACC合成酶反义RNA
- 利用U3RNA基因上游启动区构建高效表达载体对烟草的转化
- 番茄U3RNA基因由RNA聚合酶Ⅲ来转录,具有较高的转录效率,为一般转录效率的100-1000倍.分别将U3RNA基因上游启动区-ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合序列和ACC合成酶的反义RNA-核酶嵌合序列克隆到植物双...
- 李丽莉
- 关键词：转基因烟草反义RNA核酶
- 文献传递
- 利用番茄U3snRNA基因启动区构建植物表达载体及其对烟草的转化
- 目的:近年来,国外有人利用U6snRNA基因的RNA聚合酶Ⅲ型的启动区来增强寡核苷酸链的表达,用以进行对转基因动物的反义调控,其合成效率为一般基因表达的100～1000倍。而U3snRNA基因同属于RNA聚合酶Ⅲ启动转录...
- 刘明秋李丽莉扈廷茂
- 文献传递
- 一种简捷的质粒DNA提取及纯化方法被引量：8
- 2000年
- 介绍一种快速获取高纯度质粒 DNA方法 ,在碱裂解法快速获取质粒 DNA粗制品的基础上 ,利用一种不溶解蛋白质而溶解 DNA的溶液 TES纯化质粒 DNA,同时对本法所提取的质粒的 DNA的回收率、纯度及可能的用途进行验证。此法简易 ,所得样品纯度高 ,可以直接用于转化、酶切和基因克隆。
- 李云峰邵国苏燕李丽莉
- 关键词：质粒脱氧核糖核酸纯化
- 马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因转化烟草研究被引量：3
- 2000年
- 将马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因由重组质粒 pAPI189中亚克隆到双元表达载体 pGA643的XbaI和KpnI位点之间 ,构建成高效表达重组质粒pGAPI3。三亲融合法将其转移至农杆菌LB4404。通过叶盘法利用此融合后的含有目的基因的农杆菌转化烟草叶圆片 ,在含有Km的培养基上筛选抗性芽。将抗性芽接种到生根培养基至长成完整植株后再移栽到土质中以获得转基因植株。通过目的基因的特异引物进行PCR检测以及目的基因的片段为探针进行South ern杂交检测 ,证实已获得马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的转基因烟草植株。
- 王永胜扈廷茂刘明秋李丽莉孔威
- 关键词：马铃薯转基因烟草
