朱慧芳
- 作品数：13 被引量：38H指数：3
- 供职机构：新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省高校杰出科研人才创新工程基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Calphostin C对乳腺癌细胞增殖的抑制作用及相关机制被引量：3
- 2009年
- 目的研究Calphostin C对乳腺癌细胞MDA-MB-435S增殖的影响及初步机制。方法通过观察Calphostin C处理MDA-MB-435S细胞前后细胞的生长速度、倍增时间、克隆形成率和细胞周期分布等变化,探讨Calphostin C对MDA-MB-435S细胞增殖的影响;通过Western blotting、免疫细胞化学染色和RT-PCR等方法探讨Calphostin C影响MDA-MB-435S细胞增殖的初步机制。结果与MDA-MB-435S亲本细胞(对照组)相比,Calphostin C处理的MDA-MB-435S细胞(实验组)生长速度明显减慢,倍增时间明显延长(P<0.01),并且呈现浓度和时间依赖性;对照组和实验组细胞克隆形成率分别为(82.33±6.81)%和(22.00±1.73)%,差异有统计学意义(P<0.01);实验组细胞周期出现明显的G1期阻滞(P<0.01)。Western blotting和免疫细胞化学染色结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞中蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)表达没有明显变化,但活性状态(胞质转位至胞膜)的PKCα显著减少。West-ern blotting和RT-PCR结果显示,与对照组细胞相比,实验组细胞中p53、Cyclin A和Cyclin B表达没有明显变化,但p21表达上调,Cyclin E表达下调。结论Calphostin C可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435S的增殖,该作用可能与其抑制PKCα活性、上调p21表达和下调Cyclin E表达有关。
- 千新来崔静任峰赵杰冶亚平贺国洋李新强朱慧芳韩芳毅杨慧林王霞原志庆
- 关键词：蛋白激酶C乳腺癌增殖
- 血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法体外培养HUVECs,取对数生长期HUVECs细胞接种96孔培养板中,常规培养细胞24 h后,弃掉旧培养基,加入新Ham′s F12k培养基,并分别加入AngⅡ,使其终浓度分别为0μmol.L-1、0.01μmol.L-1、0.1μmol.L-1、1μmol.L-1和10μmol.L-1,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测不同浓度AngⅡ在不同时间点的细胞活性,琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果MTT结果:与对照组相比,1μmol.L-1AngⅡ组作用24 h和10μmol.L-1AngⅡ组作用12 h、18 h和24 h的HUVECs的细胞活性均显著下降(P<0.05或P<0.01),并呈现时间依赖性;其余各组差异均无统计学意义(P>0.05)。琼脂糖凝胶电泳结果:10μmol.L-1AngⅡ组作用18 h的HUVECs呈现明显的"梯状"DNA断裂条带。流式细胞术结果:对照组和10μmol.L-1AngⅡ组作用18 h的HUVECs细胞凋亡率分别为(1.11±0.54)%和(19.87±3.18)%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论10μmol.L-1AngⅡ可通过诱导细胞凋亡引起HUVECs损伤,从而可能在动脉粥样硬化发生发展中发挥作用。
- 贺国洋李巍冶亚平朱慧芳韩芳毅
- 关键词：人脐静脉内皮细胞凋亡
- 骨唾液酸蛋白对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移能力的影响
- 2008年
- 目的研究骨唾液酸蛋白（BSP）对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移能力的影响及机制。方法通过划痕试验、Transwell侵袭实验、细胞黏附实验和反转录-聚合酶链反应等观察BSP对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移能力的影响。结果BSP稳定高表达可使MCF-7细胞的侵袭能力明显增加。稳定高表达BSP的MCF-7-BSP细胞与胶原和纤维连接蛋白的黏附性增加,其基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9表达也增强。结论BSP可以促进MCF-7细胞侵袭转移能力,其可能的机制是通过增加细胞的黏附性、促进MMP-2和uPA表达等。
- 张洁常海敏赵杰朱慧芳韩芳毅千新来
- 关键词：骨唾液酸蛋白乳腺癌
- 人参皂苷Rg1抗血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的机制被引量：2
- 2012年
- 目的探讨人参皂苷Rg1抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEGs)凋亡的相关机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,免疫细胞化学方法检测NF-κB p65细胞内分布状态,分别用逆转录聚合酶链反应和Western blotting分析各组NF-κB p65 mRNA和蛋白质的表达情况。结果免疫细胞化学结果显示,对照组和Rg1组中,NF-κB p65主要分布于胞质;而AngⅡ组NF-κB p65主要分布于胞核,出现明显的核移位;与AngⅡ组比较,AngⅡ+Rg1组NF-κB p65胞质分布增多,胞核分布减少,Rg1组可明显阻止AngⅡ诱导的NF-κB p65核移位;逆转录聚合酶链反应和Western blotting结果显示:对照组、Rg1组、AngⅡ组和AngⅡ+Rg1组NF-κB p65 mRNA水平和蛋白水平表达均无明显变化(P>0.05)。结论人参皂苷Rg1可一定程度逆转AngⅡ诱导的HUVECs凋亡,其机制可能与其阻止AngⅡ诱导的NF-κB p65核移位密切相关。
- 贺国洋李娜朱慧芳千新来
- 关键词：人参皂苷RG1凋亡核因子-ΚBP65
- 人参皂甙Rg1对同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的逆转作用被引量：2
- 2010年
- 目的人参皂甙Rg1对同型半胱氨酸(homocy steine,Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的逆转作用。方法体外培养HUVECs,采用台盼蓝染色方法筛选人参皂甙Rg1最适浓度。将细胞分为对照组(无任何诱导物)、Hcy组(10μmol·L-1Hcy)、Hcy+Rg1组(10μmol·L-1Hcy和40mg·L-1Rg1)和Rg1组(单独用40mg·L-1Rg1处理的细胞),作用时间为24h。琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况。结果台盼蓝染色结果显示:人参皂甙Rg1的最适浓度40mg·L-1。琼脂糖凝胶电泳结果显示:对照组和Rg1组未见凋亡条带,Hcy组可见清楚的细胞凋亡特征性的"梯状"条带,而Hcy+Rg1组可见不明显的细胞凋亡特征性的"梯状"DNA断裂条带。TUNEL染色结果显示:与对照组和Rg1组相比,Hcy组细胞凋亡数量显著增加(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+Rg1组细胞凋亡数量显著减少(P<0.01),凋亡百分比由33.733%下降至9.200%,但仍高于对照组和Rg1组(P<0.01)。结论 40mg·L-1人参皂甙Rg1可一定程度逆转Hcy诱导的HUVECs凋亡。
- 贺国洋李新强李永真朱慧芳韩芳毅
- 关键词：人参皂甙RG1同型半胱氨酸人脐静脉内皮细胞凋亡
- 乳腺良、恶性病变组织中人乳头瘤病毒检测和分型被引量：4
- 2009年
- 目的:研究乳腺良、恶性病变组织中人乳头瘤病毒(HPVs)感染情况。方法:收集新鲜乳癌组织标本73例和乳腺良性病变组织标本84例,采用PCR方法对乳腺良、恶性病变组织中HPVs进行检测和分型。结果:73例乳癌组织中,HPV16阳性率为76.7%(56/73),高危型HPVs(HPV16和59)总阳性率76.7%(56/73);其中HPV16单独感染20例,HPV16、59混合感染6例,HPV16、6/11混和感染28例,3者混和感染2例。84例乳腺良性病变组织中,HPV16阳性率为48.8%(41/84),高危型HPVs总阳性率为51.2%(43/84);其中HPV16单独感染15例,HPV59单独感染2例,HPV6/11单独感染2例,HPV16、6/11混和感染24例,3者混和感染2例。乳腺良、恶性病变组织中均未检测到HPV18、31、33、52和58。乳癌组织中HPV16阳性率和高危型HPVs总阳性率高于乳腺良性病变(χ2分别为12.879,10.921,P<0.01)。浸润性导管癌组织中HPV16阳性率为86.0%(43/50),高于浸润性小叶癌组织中的56.6%(13/23)(χ2=7.663,P<0.01)。结论:HPV16在乳癌发生发展中可能具有重要作用,与乳癌组织学类型有关;其与其他HPVs亚型的混合感染值得重视。
- 千新来崔静冶亚平张洁张钢常海敏李新强贺国洋赵杰朱慧芳韩芳毅杨慧林王霞原志庆
- 关键词：人乳头瘤病毒乳癌乳腺良性病变
- 人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的作用及相关机制研究被引量：13
- 2011年
- 目的探讨人参皂苷Rg1抗同型半胱氨酸(Hcy)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的作用及相关机制。方法体外培养HUVECs细胞,采用琼脂糖凝胶电泳和末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测细胞凋亡情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting分析各组内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和蛋白质的表达。结果琼脂糖凝胶电泳显示:与对照组和Rg1组比较,Hcy组可见特征性DNA的"梯状"条带。TUNEL染色显示:与对照组和Rg1组比较Hcy组细胞凋亡率增加差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR显示:与对照组和Rg1组相比,Hcy组eNOS mRNA水平表达降低差异有统计学意义(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+Rg1组eNOS mRNA水平表达增加差异有统计学意义(P<0.01),但仍低于对照组和Rg1组,差异有统计学意义(P<0.01)。Western blotting显示:与对照组和Rg1组相比,Hcy组eNOS蛋白水平表达降低差异有统计学意义(P<0.01);与Hcy组相比,Hcy+Rg1组eNOS蛋白水平表达增加差异有统计学意义(P<0.01),但仍低于对照组和Rg1组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论人参皂苷Rg1能够抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,此作用可能与上调血管内皮细胞eNOS水平有关。
- 贺国洋李永真李新强朱慧芳韩芳毅千新来
- 关键词：人参皂苷细胞凋亡同型半胱氨酸内皮型一氧化氮合酶
- HPV16 DNA阳性乳腺良、恶性病变组织中E6和E7蛋白的表达被引量：5
- 2009年
- 目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)DNA阳性乳腺良、恶性病变组织中E6和E7蛋白的表达情况。方法:以经PCR筛选证实的HPV16DNA阳性的56例乳癌和41例乳腺良性病变组织为研究对象,采用Westernblotting方法检测HPV16E6和E7蛋白。结果:56例HPV16DNA阳性乳癌组织中,HPV16E6、E7和E6/E7共表达阳性率分别为67.9%(38/56)、75.0%(42/56)和57.1%(32/56);41例HPV16DNA阳性乳腺良性病变组织中,HPV16E6、E7和E6/E7共表达阳性率分别为36.6%(15/41)、43.9%(18/41)和24.4%(10/41)。HPV16DNA阳性乳癌组织中E6、E7和E6/E7共表达阳性率均高于乳腺良性病变组织(χ2分别为9.34,9.70,10.34,P均<0.01)。HPV16DNA阳性乳癌组织中E6、E7和E6/E7共表达阳性率与患者年龄和肿瘤组织学类型无关(P均>0.05),但与淋巴结转移有关(χ2分别为3.88,15.86,9.34,P均<0.05)。结论:HPV16E6和E7蛋白在乳癌发生发展中具有重要作用,并与乳癌淋巴结转移有关。
- 千新来赵杰张钢张洁常海敏李新强贺国洋冶亚平朱慧芳韩芳毅杨慧林王霞原志庆
- 关键词：人乳头瘤病毒16型
- HPV16 E6蛋白阳性和阴性乳癌组织中p53基因检测被引量：2
- 2009年
- 目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6蛋白阳性(E6+)和阴性(E6-)乳癌组织中p53基因的状态和表达。方法:以经PCR筛选证实HPV16 DNA阳性的56例乳癌组织(Western blotting证实38例HPV16 E6+,18例E6-)为研究对象,PCR法扩增p53基因保守核心区DNA序列,测序后与Genbank公布的野生型p53(wtp53)基因序列比对;采用RT-PCR和Western blotting方法分别检测p53 mRNA和P53蛋白。结果:HPV16 E6+和HPV16 E6-乳癌组织中,p53基因突变率分别为15.8%(6/38)和72.2%(13/18),2者比较差异有统计学意义(χ2=17.352,P<0.001);p53基因突变主要发生在第5、6、7和8外显子;第248和273位密码子突变频率较高;除1例无义突变和1例同义突变外,其余均为错义突变。98.2%(55/56)可检测出p53 mRNA。HPV16E6+/wtp53乳癌组织中P53蛋白阳性率9.4%(3/32),低于HPV16 E6+/mtp53和E6-/wtp53乳癌组织中的5/6和4/5(P<0.01)。结论:HPV16 E6+乳癌组织中基因突变不是p53灭活的主要机制,而E6-乳癌组织中p53灭活的主要方式是基因突变;HPV16 E6可通过降解wtP53蛋白而在乳癌发生发展中发挥作用。
- 千新来孟勇常海敏贺国洋张洁李新强赵杰朱慧芳韩芳毅杨慧林王霞冶亚平原志庆
- 关键词：人乳头瘤病毒16型P53基因乳癌
- HPV16 E7蛋白阳性和阴性乳癌组织中Rb和P16蛋白的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7蛋白阳性(E7+)和阴性(E7-)乳癌组织中Rb和P16蛋白的表达及意义。方法:以经PCR筛选证实的HPV16 DNA阳性的56例乳癌组织(经Western blotting证实42例HPV16E7+,14例E7-)为研究对象,采用Western blotting方法检测癌组织中Rb和P16蛋白的表达。结果:HPV16E7+、HPV16E7-乳癌组织中,Rb蛋白阳性率分别为9.5%(4/42)、50.0%(7/14),P16蛋白阳性率分别为85.7%(36/42)、21.4%(3/14),HPV16E+和E7-乳癌组织中P16和Rb蛋白阳性率差异均有统计学意义(χ2=20.525,10.898,P均<0.001)。HPV16E7+乳癌组织中,Rb和P16蛋白表达有关(rp=0.792,P=0.003);HPV16E7-乳癌组织中,Rb和P16蛋白表达无关(P=0.182)。结论:HPV16E7可通过降解Rb,促进P16蛋白表达,从而在乳癌发生发展中发挥作用。
- 冶亚平千新来贺国洋常海敏朱慧芳韩芳毅杨慧林王霞赵杰李新强张洁
- 关键词：人乳头瘤病毒16型RB蛋白P16蛋白乳癌
