朱弘焱
- 作品数：50 被引量：52H指数：4
- 供职机构：辽宁医学院畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高校重点实验室项目辽宁省科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生航空宇航科学技术更多>>
- MEF2C基因RNA干扰质粒的构建及干扰效率测定
- 2015年
- 为了构建猪MEF2C基因的RNA干扰重组质粒,并筛选出最佳干扰效率的序列,本试验采用RNAi技术,设计并合成了3条针对猪MEF2C基因的RNA干扰序列,构建了RNA干扰重组质粒(命名为siRNA-1,siRNA-2,siRNA-3),将其转染到小鼠C2C12细胞,并用实时定量PCR检测细胞中MEF2C基因mRNA的表达,Western blot测定细胞中MEF2C基因蛋白的表达。结果表明:重组质粒经PCR扩增后显示产物大小与预期一致,产物经双酶切及测序鉴定该序列与NCBI提供的序列一致。重组质粒转染C2C12细胞后,MEF2C基因mRNA表达受到不同程度抑制,抑制率分别为(33.67±2.51)%、(21.00±3.60)%、(71.67±4.04)%。Western blot结果表明MEF2C基因蛋白表达受到不同程度抑制,抑制率分别为(47.33±0.05)%、(38.25±0.16)%、(67.27±0.12)%。本试验成功构建猪MEF2C基因干扰重组质粒,最终确定干扰质粒(siRNA-3)具有最佳干扰效果,证实MEF2C基因的干扰质粒能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达,为探讨该基因与肌肉肉质性状的关系提供理论基础。
- 曾阳阳朱弘焱田玉民苏玉虹
- 关键词：C2C12重组质粒转染
- 稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞株构建及鉴定被引量：2
- 2015年
- 为了获得稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞C2C12细胞株,将猪skMLCK基因cDNA序列T-A克隆至pMD-18T载体;重组质粒经双酶切后,定向克隆至真核表达载体,获得表达重组质粒pEGFP-N1-skMLCK;经脂质体介导,重组质粒稳定转染入C2C12细胞中;通过实时定量PCR方法检测skMLCK基因的表达水平,以及其他相关基因的表达情况。结果:获得了稳定表达猪skMLCK基因的C2C12细胞株;连续培养30d后,用实时定量PCR方法检测到skMLCK基因高表达,同时发现CFL2b和MEF2C基因表达下调。试验表明稳定表达猪skMLCK基因的小鼠成肌细胞系构建成功,为猪skMLCK基因功能的进一步研究提供了前期工作基础。
- 丛玲田玉民张尚松朱弘焱苏玉虹
- 鸡刺鼠相关蛋白多肽抗体的制备与鉴定
- 鸡刺鼠相关蛋白(agouti-related protein,AgRP)多肽抗体并鉴定,根据GenBank中报道的AgRP一级结构信息,用TMHMM2.0和DNA star软件分析其蛋白跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水...
- 毕雪郎斌王佳美朱弘焱解放苏玉虹田玉民
- 关键词：多肽抗体特异性鉴定
- 辽宁种猪氟烷基因位点多态性分析被引量：5
- 2010年
- 采用PCR-RFLP技术分析辽宁种猪氟烷基因(RYR1)多态性基因多态性,3个外国猪种氟烷基因HhaI酶切位点上都显示多态性,荷包猪未检测到多态性,优势基因型均为NN。试验结果表明,荷包猪群体均为氟烷阴性纯合子,外来猪种可见杂合子。
- 丛玲朱弘焱苏玉虹
- 关键词：氟烷基因多态性PCR-RFLP
- 辽宁种猪ESR和FSHβ基因多态性及其与产仔性能的关联分析
- 目的：分析辽宁种猪ESR和FSHβ基因多态性及其与产仔性状的关系.方法：提取猪耳组织DNA,采用PCR-RFLP技术分析辽宁种猪ESR和FSHβ基因多态性,并分析基因型与产仔数的相关关系.结果：种猪ESR和FSHβ基因可...
- 邹剑戎朱弘焱苏玉虹
- 关键词：ESR基因FSHΒ基因多态性产仔性能
- 东北荷包猪FUT1基因多态性及其与产仔性能的关联分析(摘要)(英文)被引量：1
- 2009年
- [目的]分析荷包猪FUT1基因多态性及其与产仔性能的关系,为荷包猪资源保存、品种选育和开发利用提供参考依据。[方法]提取猪耳组织DNA,采用PCR-RFLP技术分析荷包猪FUT1的基因多态性,并分析其基因型与产仔数的相关关系。基因型及基因型频率按基因计数法计算,并用χ2值检验基因型的观察值和期望值之间是否符合Hardy-Weinberg平衡。构建单因素最小二乘模型:性状观察值=群体均值+基因型效应+随机残差效应,利用SPSS15.0软件的广义线性模型,分析基因型与产仔数之间的关系。[结果]用Hin6I限制性内切酶对扩增片段进行酶切,酶切后产生GG基因型(117bp和44bp);当307位点发生G→A突变后,由于酶切位点的丢失,Hin6I不能对其消化,形成AA基因型(161bp);当2个等位基因同时存在时产生AG基因型(161、117和44bp)。5种猪FUT1基因307位点的优势基因型为GG型,频率达79.71%。χ2适合性检验,发现该位点分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。将荷包猪FUT1基因M307基因型与1～5胎每个胎次的总产仔数进行相关分析,其中抗性纯合子AA型个体1～5各胎次产仔数均值均高于AG和GG型个体,且第3胎和第4胎的产仔数均值显著高于AG型和GG型个体(P<0.05)。[结论]荷包猪FUT1基因具有多态性;其基因频率与国外杜洛克猪基本一致,与国外长白、大白和两者杂交猪差别较大;AA基因型对产仔性能而言是有益基因型。
- 朱弘焱赵颂赵微苏玉虹
- 关键词：荷包猪FUT1基因多态性产仔性能
- 猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化研究
- 2015年
- 运用生物信息学方法对猪CFL2基因启动子区CpG岛进行预测,并采用甲基化特异性PCR （MSP）和重亚硫酸盐测序（BSP）分析猪CFL2基因启动子区CpG岛的甲基化状态.生物信息学研究发现,猪CFL2基因启动子区存在CpG岛,并且在启动子区的995 ～2 045 bp区域的GC分布密集.通过BSP法证明了长白猪CFL2基因启动子区CpG岛出现甲基化,MSP法出现部分甲基化,提示只有1条链被甲基化,为猪CFL2基因在肌肉组织中的表达可能受甲基化调节提供了理论基础。
- 解放王佳美朱弘焱郎斌丛玲毕雪苏玉虹
- 关键词：CPG岛甲基化MSPBSP
- 猪乳糖酶基因5'非编码区多态性分析
- 朱弘焱杜海廷赵微巴彩凤田玉民苏玉虹
- 鼠skMLCK多肽抗体的制备与鉴定
- 2015年
- 为制备鼠骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(sk MLCK)多肽抗体,根据NCBI Gen Bank中报道的sk MLCK的一级结构信息,利用TMHMM2.0和DNA Star软件分析此蛋白的跨膜结构域、二级结构、亲水性、疏水性等,以及综合分析考虑抗体设计的其他相关因素,设计出一段14个氨基酸的多肽。将合成后的多肽同牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,将BSA偶联后的sk MLCK多肽免疫新西兰大白兔,3个月后采集血清,亲和纯化抗sk MLCK多肽抗体。ELISA法检测效价,Western blot和免疫荧光法检测抗体特异性。结果得到了高效价和高特异性的鼠sk MLCK多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,并可用于免疫荧光和Western blot的研究,为后续研究sk MLCK基因提供物质基础。
- 许晶朱弘焱田玉民苏玉虹
- 关键词：多肽抗体特异性
- 不同饲养方式对荷包猪肥育性能及胴体品质的影响被引量：2
- 2013年
- 选用断奶仔猪40头,按窝别分成舍饲组和放牧组,体重均达50 kg后两组饲喂相同的日粮。在达到80 kg体重时,两组增重效果没有明显差异(P>0.05);在胴体品质方面尤其是花板油以及瘦肉率,两组差异显著(P<0.05);氨基酸总量以及必需氨基酸总量两组差异显著(P<0.05)。
- 宋恒元朱弘焱
- 关键词：荷包猪饲养方式肥育性能胴体品质
