朱元
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 供职机构：上海市普陀区人民医院更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金上海市普陀区卫生系统自主创新科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乳腺癌组织及癌旁组织HER2基因CpG岛甲基化水平及其mRNA表达的研究被引量：5
- 2020年
- 目的探讨乳腺癌组织及癌旁组织人类表皮生长因子受体2(HER2)基因CpG岛甲基化率和HER2mRNA表达的差异。方法收集经病理确诊的50份乳腺癌组织和对应的癌旁组织样本,采用焦磷酸测序法、实时聚合酶链反应(PCR)和免疫组化法分别检测HER2启动子CpG岛甲基化率、HER2 mRNA表达和HER2蛋白表达。结果HER2阳性乳腺癌组织HER2 mRNA相对表达量高于HER2阴性癌组织(P<0.05),但HER2启动子CpG岛甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。HER2阴性乳腺癌组织HER2基因启动子CpG岛甲基化率显著高于对应的癌旁组织(P<0.05),而HER2 mRNA表达则低于对应的癌旁组织(P<0.05)。HER2阳性的乳腺癌组织与其对应的癌旁组织之间以及HER2阳性与阴性癌旁组织之间,HER2基因启动子CpG岛甲基化率和HER2 mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在HER2阴性的乳腺癌癌旁组织中,HER2基因启动子CpG岛的低甲基化可能是HER2 mRNA高表达的机制之一。
- 金姝朱琪朱元袁亚蔡骁垚张骥闫佩毅
- 关键词：人类表皮生长因子受体2CPG岛甲基化乳腺癌
- 流式细胞术检测抗中性粒细胞抗体方法的建立及临床初步应用被引量：2
- 2011年
- 目的建立适用于临床的流式细胞术(FCM)检测抗中性粒细胞抗体(ANA)的方法,并作临床初步应用。方法采用FCM,以前向散射和侧向散射参数区分全血标本中的淋巴细胞和粒细胞,设定粒细胞门,用CD16b-藻红蛋白(PE)和CD177-别藻蓝蛋白(APC)单克隆抗体分别检测中性粒细胞中表面表达CD16b和CD177抗原细胞的百分率。用所建方法检测健康对照32名,确定参考范围,以此作为判断受检者血液中抗CD16b或CD177抗体存在与否的依据。检测外周血白细胞(WBC)总数<4.0×109/L且中性粒细胞绝对计数(ANC)<2.8×109/L的59例患者的CD16b和CD177百分率,并对其中中性粒细胞表达CD16b和/或CD177百分率低于参考范围(即判为相应抗体阳性)的患者给予激素治疗,观察疗效。结果健康人群中性粒细胞中表达CD16b和CD177的百分率分别为98.36%±1.53%和74.95%±11.07%,据此分别确定了健康人群中性粒细胞表达CD16b和CD177的参考范围分别为CD16b>95.36%、CD177>53.25%(即>x珋-1.96s)。59例患者中有23例(39.0%)ANA阳性,其中ANC<2.0×109/L患者的ANA阳性率(50.0%)远高于ANC>2.0×109/L患者(27.6%)。ANA阳性患者经激素治疗后,WBC和ANC上升。结论 FCM检测抗中性粒细胞CD16b和CD177抗体是自身免疫性中性粒细胞减少症(AIN)实验简便、快捷的诊断方法,有助于AIN的诊断、鉴别诊断和疗效判断。
- 闫佩毅张文龙张骥朱元王旋邹玉涵金姝朱晴晖
- 关键词：抗中性粒细胞抗体流式细胞术
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的真核表达及其在抗体鉴定中的应用
- 2012年
- 目的利用杆状病毒表达系统表达耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2a（PBP2a）。方法用EcoRI和BamHI双酶切pGEMT-meeA重组质粒DNA，回收目的基因mecA，与pFastBacl质粒连接转化入含有穿梭载体bacmid的大肠埃希菌DHl0Bac中，筛选重组穿梭载体Bacmid-mecA并转染Sf9细胞，获取完整的重组杆状病毒。用免疫荧光（IFA），Westernblot法进行蛋白鉴定。结果成功地获得含mecA基因的重组杆状病毒。杆状病毒感染Sf9细胞形态变化明显，能够表达出与PBP2a多克隆抗体相结合的蛋白。结论利用Bac—to—Bac杆状病毒表达系统成功地表达了PBP2a蛋白。
- 邹玉涵朱祖怀闫佩毅朱元黄德魁朱晴晖金姝
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌青霉素结合蛋白2A真核表达
- 乳腺癌C-erbB-2蛋白表达与基因CpG岛甲基化状态和mRNA表达的关系被引量：2
- 2011年
- 目的探讨乳腺癌C-erbB-2蛋白表达与基因CpG岛甲基化状态和mRNA表达的关系。方法取经病理确诊的52例乳腺癌组织,分别用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)、免疫组织化学法(IHC)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测C-erbB-2启动子CpG岛甲基化状态、C-erbB-2蛋白表达水平和C-erbB-2 mRNA的表达。结果 C-erbB-2蛋白阴性和阳性的2组乳腺癌组织的非甲基化率分别为0%和23.5%,CpG岛低甲基化与C-erbB-2蛋白表达呈显著正相关(r=0.413,P=0.03)。C-erbB-2蛋白阴性和阳性组织中C-erbB-2 mRNA表达量分别为0.098±0.041和0.20±0.062,与C-erbB-2蛋白表达呈显著正相关(r=0.356,P=0.03)。结论 C-erbB-2启动子CpG岛的低甲基化和C-erbB-2 mRNA的表达均与C-erbB-2蛋白的高表达相关,C-erbB-2基因启动子的低甲基化可能在C-erbB-2蛋白过度表达中起一定作用。
- 金姝朱琪秦华晖闫佩毅邹玉涵朱元袁亚朱晴晖
- 关键词：CPG岛甲基化甲基化特异性聚合酶链反应乳腺癌
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：3
- 2012年
- 目的研究耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的原核表达,及PBP2a多克隆抗体的制备。方法根据基因文库登录的mecA基因的编码序列,设计合成了1对寡核苷酸引物,应用PCR法从MRSA基因组中获得编码PBP2a全长的DNA,将此目的基因片段克隆至pET32a(+)载体,转化E.coliBL21(DE3);经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,利用Ni2+亲和层析技术纯化目的蛋白;用目的蛋白免疫小鼠3～8次后,收获血清并鉴定。结果成功构建了PBP2a原核表达载体,并获得了高效表达;利用纯化的蛋白制备了理想的多克隆抗体。结论利用分子克隆技术,获得了高纯度的PBP2a蛋白并制备了多克隆抗体,为其进一步研究奠定了基础。
- 金姝朱祖怀闫佩毅邹玉涵朱元黄德魁朱晴晖
- 关键词：原核表达
