曾莉
- 作品数:4 被引量:28H指数:1
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 实验啮齿类动物行为学评估被引量:27
- 2008年
- 曾莉张旻卜碧涛
- 关键词:啮齿类动物
- 小鼠TNF-α基因RNAi慢病毒载体的构建及体外研究被引量:1
- 2009年
- 目的为探讨TNF-α在C型Niemann-Pick病(NPC)神经变性中的作用,构建携带小鼠TNF-α-si RNA的慢病毒载体并进行体外研究。方法设计3个TNF-α-si RNA序列和1个无关对照序列,克隆到酶切的pSI H1-H1-copGFP si RNA载体;重组质粒转染293T细胞,通过实时定量PCR检测筛选出干扰效果最佳的TNF-α-si RNA;筛选出的pSI H-si RNA、pSI H-negative分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成慢病毒;慢病毒感染BV-2细胞和星形胶质细胞,采用RT-PCR以及Elisa检测TNF-α-si RNA的沉默效果。结果成功构建携带TNF-α-si RNA的慢病毒载体,滴度达2×108ifu/L;慢病毒感染BV-2和星形胶质细胞,表达GFP且可下调TNF-α表达。结论TNF-α-si RNA能明显下调TNF-α的表达,为研究和治疗神经变性疾病以及TNF-α相关疾病提供了有力的工具。
- 王雪贞曾莉降风唐荣华张旻卜碧涛
- 关键词:慢病毒载体神经系统变性疾病RNA干扰
- C型Niemann-Pick病小鼠小脑Purkinje细胞的电生理特性研究
- 2012年
- 目的:比较C型Niemann-Pick病(NPC)小鼠与野生型小鼠小脑Purkinje细胞膜电生理特性和钙电流的差异。方法:制备新鲜小鼠小脑脑片,利用组织膜片钳全细胞记录法记录出生后20~24d(P20~24)、出生后5周(P5w)小鼠Purkinje细胞膜的电生理特性、钙通道的I-V曲线和钙电流密度。结果:不同年龄段的NPC小鼠与野生型小鼠相比,Purkinje细胞膜的电生理特性及钙电流变化无统计学差异。结论:NPC小鼠脂质代谢异常并未影响小脑Purkinje细胞的电生理特性,推测Purkinje细胞电生理特性改变在NPC小鼠Purkinje细胞变性机制中起次要作用。
- 曾莉余姗姗卜碧涛
- 关键词:C型NIEMANN-PICK病钙电流
- EphA3基因启动子区域定位表达及活性分析
- 2012年
- 目的构建含有不同长度EphA3基因启动子片段的报告基因载体,研究其在293T细胞和MEF细胞中的转录活性。方法以Balb/C小鼠基因组DNA为模板,扩增不同长度的EphA3基因启动子片段,并克隆进入荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic真核表达载体内。酶切鉴定及基因测序无误后,将重组质粒和pRL—CMV内对照质粒共转染293T和MEF细胞,分析不同长度的OhA3基因启动子片段的转录活性。结果酶切和测序鉴定表明表达载体构建成功,EphA3基因的核心启动子区域位于-279bp~+110bp之间,在293T细胞和MEF细胞中其转录活性相似。结论成功构建了荧光素报告基因重组质粒,并确定了BphA3基因的核心启动子区域。
- 曾莉卜碧涛
- 关键词:启动子转录活性