曹雪松
- 作品数：27 被引量：55H指数：5
- 供职机构：聊城大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生理学更多>>
- 植物可诱导基因表达系统的研究进展被引量：1
- 2022年
- 基因表达是植物分子生物学研究中的主要手段之一,在理论研究和农业应用研究中广泛应用。早期的研究因基础薄弱和工具欠缺,大多使用组成型启动子,如最常用的花椰菜花叶病毒35S启动子,介导基因过表达。随着研究的深入,人们对基因表达的分子生物学有了更多的了解,进而衍生出一些较为成熟的工具。为了更精确地对基因表达的时间、空间和数量进行调控,已发展了多个植物可诱导基因表达系统。根据诱导物的不同,常见的表达系统有四环素诱导、类固醇诱导、乙醇诱导、杀虫剂诱导及铜诱导。这些系统因所使用的因子及组分不同,而各自有不同的工作原理;同时,他们也有明显的共性,即通常含有两个元件,激活元件和响应元件。本研究对上述植物可诱导表达系统的基本组成、工作原理及其特点进行了分析、评述和展望。
- 张壮张钱钱张萌萌董子健孙雯雯曹雪松胡全安
- 关键词：植物基因表达转录因子激活元件
- 大麦黄矮病毒运动蛋白是RNA沉默抑制因子被引量：2
- 2012年
- 大麦黄矮病毒(barley yellow dwarf virus, BYDV)属黄症病毒科家族, 其基因组包含6个开放阅读框(open readingframes, ORFs)。将BYDV的6个基因分别克隆到pWEIMING101载体上, 得到重组基因。电击转化农杆菌后, 利用农杆菌瞬时表达方法渗透注射转GFP基因的本氏烟草16c植株的叶片, 在长波长紫外灯下观察GFP的表达, 并通过Northern blot证明所得现象。研究结果表明, BYDV的PAV株系ORF4编码的运动蛋白(movement protein, MP)是RNA沉默抑制因子, 其表达可以抑制局部和系统RNA沉默。BYDV-MP与GFP的双链RNA(dsGFP)共表达后仍能抑制RNA沉默, 荧光强度与叶片中GFP的mRNA和其沉默降解形成的siRNA的量有对应关系, 其N端核定位序列对抑制局部基因沉默起主要作用, 第5、6位氨基酸是抑制基因沉默的关键氨基酸。BYDV-MP单独渗透注射的部位均产生细胞死亡。
- 申永梅刘国富杨纪君霍晓辉曹雪松
- 关键词：大麦黄矮病毒运动蛋白RNA沉默
- 病毒诱导的植物抗性机制及其应用的研究被引量：1
- 2003年
- 病毒的多种基因产物可引起植物的病源诱导抗性,如外壳蛋白、复制酶、运动蛋白缺陷的干涉RNA和DNA以及非翻译RNA等.对植物病源诱导抗性的研究有助于阐明病毒的致病机理并对植物抗病的应用具有重要的理论和应用价值.
- 曹雪松
- 关键词：PDR外壳蛋白运动蛋白病毒致病机理抗病机制
- 保护生物学研究进展及其与可持续发展的关系被引量：5
- 2003年
- 保护生物学是一门年轻的综合性学科,其目的是研究生物多样性保护的方法和途径.在人类面临世界物种与生境大灭绝的背景下的今天,保护生物学显得尤其重要.文章分析介绍了保护生物学的兴起与发展、主要理论架构和发展趋势,概述了保护生物学的两个主要研究内容保护遗传学和种群生存力研究概况以及保护生物学研究的热点问题,并论述了保护生物学与可持续发展之间的关系.
- 肖宜安时明芝李晓红曹雪松
- 关键词：保护生物学保护遗传学种群生存力可持续发展濒危机制
- 农杆菌介导的甜椒遗传转化体系的建立被引量：4
- 2019年
- 以低温渗透系甜椒CL122为材料,采用其子叶节为外植体材料,研究了农杆菌介导的甜椒遗传转化体系的主要影响因子,如卡那霉素选择压、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、侵染时间、共培养时间、激素浓度等,初步建立了一个高效的甜椒遗传转化体系。结果表明:最适的卡那霉素选择压为50mg/L,乙酰丁香酮浓度在100μmol/L时可以明显提高外植体的抗性芽数,最适合的预培养时间和共培养时间为2d,最佳侵染时间5min,外植体在MS+0.2mg/LIAA(吲哚乙酸)+400mg/L特美汀培养基上生根率最高。
- 苏振华张俊华张泽鑫李妹芳郭尚敬曹雪松冀芦沙
- 关键词：甜椒农杆菌外植体
- 大麦黄矮病毒运动蛋白在烟草中的瞬时表达被引量：2
- 2010年
- [目的]快速鉴定运动蛋白基因在烟草中的瞬时表达,进一步研究该外源基因的功能。[方法]将大麦黄矮病毒的运动蛋白基因定向克隆到马铃薯X病毒载体上,得到重组的马铃薯X病毒,电击转化农杆菌后,利用农杆菌渗透注射技术注射到本生烟草的叶片中,观察病毒对烟草的侵染状况。[结果]渗透注射后第7天观察,重组病毒载体侵染的烟草系统叶有病毒侵染症状,而对照组未有此现象。对2组试验进行逐日跟踪观察,重组病毒载体侵染的烟草有较严重的病毒侵染症状和叶片卷曲现象,后期引起注射叶及系统叶坏死。而空病毒载体侵染的烟草只有轻微的病毒侵染症状,并能够恢复健康。对侵染的烟草进行RT-PCR检测,结果表明外源基因BYDV-MP在烟草体内进行了正常的转录和表达。[结论]BYDV-MP蛋白促进了PVX的系统侵染速度,加重了系统侵染的病毒症状,是病毒病症的决定因子;利用PVX表达载体表达异源MP的方法是可行的。
- 王媛媛李芳芳刘国富曹雪松
- 关键词：马铃薯X病毒烟草侵染
- 重组人心房利钠肽(ANP)的原核表达、纯化及鉴定被引量：1
- 2016年
- 为提高重组人心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)的表达量,将3个ANP通过赖氨酸(Lysine,K)串联,并构建相对应的重组表达载体p ET28a(+)/ANP3。转染大肠杆菌进行诱导表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的60%。经过包涵体变复性,赖氨酸酶(Lys-C)和羧肽酶(CPB)水解,以及一系列层析纯化,每升培养液可获得约16 mg的ANP蛋白。最终,纯化后的ANP经UPLC及Tricine SDS-PAGE鉴定,纯度大于90%,LC-MS鉴定显示其分子量为3 080 Da,且为二硫键正确形成的ANP单体,通过ELISA试剂盒检测,其具有和参比品一致活性。本研究为ANP的大规模制备打下了基础。同时,所采用的串联表达技术也为其他多肽类药物的重组表达提供了新的思路。
- 陈晨辉赵自叶徐进曹雪松郭尚敬李军王皓侯盛
- 关键词：心房利钠肽
- 利用正向重复片段的GUS报告基因检测DNA双链断裂引起的基因重组研究
- 2018年
- 本研究建立了一种方便快捷地检测DNA双链断裂引起的基因重组的方法。传统的检测DNA双链断裂的方法较为复杂、繁琐。因此,构建简单、快速的此类检测技术是非常必要的。本研究构建了利用正向重复片段的GUS基因载体以及引导RNA和噬菌体MS2外壳蛋白偶联限制性核酸内切酶的基因组编辑系统,在GUS基因内部DNA重复区切割DNA,导致双链断裂(double-strand breaks,DSBs),DSB经同源序列引导修复(homology-directed repair,HDR)途径,引起GUS基因重组,恢复其功能。此方法可以经过GUS染色后快速、直观地检测位点特异的DSB。通过GUS与其底物的反应,以达到半定量、直观快速检测DSB的目的。
- 鲍岳张俊华苏振华曹雪松
- 关键词：GUS基因DNA双链断裂GUS染色基因重组
- 甜椒耐寒种质耐低温IL系的筛选及低温胁迫下生理应答差异被引量：5
- 2019年
- 本实验以野生甜椒(CA157)、栽培甜椒(CA52)和二者渐渗系(CL122)群体为材料,进行了耐低温IL系的筛选和低温胁迫对甜椒幼苗生理生化指标的测定。结果表明,渐渗系CL122在整个低温处理及恢复过程中与CA157表型相近,耐寒性显著高于CA52。低温胁迫下,对三种材料幼苗的相对电导率、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量、PSⅡ光化学效率、抗氧化酶活性等指标的分析发现有些指标与抗性密切相关。说明野生甜椒染色体上可能含有控制其耐寒性的关键QTL,幼苗低温应答指标可以鉴定植株的抗性,但应选择差异化较明显的时期。
- 吴杨洋郝莹超苏振华郭尚敬曹雪松冀芦沙
- 关键词：甜椒渐渗系低温胁迫生理指标
- 利用病毒研究植物的生物学功能
- 2002年
- 现代病毒分子生物学的研究为植物的生物学功能研究提供了有效的工具。这类研究使我们对植物的细胞间通讯、抗病毒和基因表达调控等机制有了更深入的了解。也为进一步的研究提出了许多新的课题。
- 曹雪松
- 关键词：胞间连丝病毒分子生物学细胞间通讯基因表达调控植物病毒
