施华中
- 作品数：11 被引量：62H指数：5
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 根癌农杆菌的高效电激转化被引量：11
- 1995年
- 利用电激法将双元载体质粒ＰＢＩ１２１导入根癌农杆菌ＡＧＬ－１并获得较高转化效率．探讨了不同电激条件对转化效率的影响，并检测了ＣａＭＶ３５Ｓ启动子启动ＧＵＳ基因在根癌农杆菌中的表达．结果表明：根癌农杆菌电激转化的最适电激条件为１１ｋＶ／ｃｍ，２１．５μＦ，电场强度是影响转化效率的关键因素．当质粒ＤＮＡ浓度从０．２ｍｇ／Ｌ增加至０．６ｍｇ／Ｌ时，转化效率呈线性增加．细菌密度对转化效率也有一定影响．最高转化效率为每μｇ质粒ＤＮＡ１．７×１０５转化子．组织化学反应证实ＣａＭＶ３５Ｓ能启动ＧＵＳ基因在根癌农杆菌中表达．
- 施华中杨弘远周嫦陈正华
- 关键词：根癌农杆菌农杆菌介导法
- 水稻卵细胞与合子的分离被引量：11
- 1998年
- 水稻卵细胞与合子的分离韩红梅赵洁施华中杨弘远周嫦（武汉大学生命科学学院植物生殖生物学研究室武汉４３００７２）关键词水稻，卵细胞，合子，分离ＩＳＯＬＡＴＩＯＮＯＦＥＧＧＣＥＬＬＳＡＮＤＺＹＧＯＴＥＳＩＮＯＲＹＺＡＳＡＴＩＶＡＨＡＮＨｏｎｇＭｅｉＺ...
- 韩红梅赵洁施华中杨弘远周嫦
- 关键词：水稻卵细胞合子
- 花粉作为外源基因媒介的植物遗传转化被引量：15
- 1998年
- 以花粉作为外源ＤＮＡ的媒介，获得转基因植株是有潜力的遗传转化体系。它可避免离体培养过程中的遗传变异和转基因植株的嵌合现象。本文介绍以花粉为外源基因的载体，利用植物有性生殖过程和小孢子胚胎发生两条途径进行植物遗传转化的研究进展。
- 施华中
- 关键词：花粉媒介外源基因植物
- 被子植物的离体受精与早期胚胎发生被引量：1
- 1997年
- 就近年来有关被子植物的离体受精、合子的离体发育以及受精与早期胚胎发育过程中的基因表达的研究情况作了介绍。
- 施华中
- 关键词：被子植物离体受精胚胎发生
- 烟草花粉发育过程及不同组织中的内源GUS活性被引量：3
- 1995年
- 以 X- gluc作为葡糖苷酸酶 ( GUS)酶反应底物 ,用酶组织化学方法检测了烟草 ( Nicotianatabacum L.)不同组织细胞的内源 GUS。在幼苗的根、茎、叶不同发育时期的花药壁、柱头、胚珠分离的生殖细胞和胚囊中 ,均未检测到内源 GUS活性。不同发育时期的烟草花粉内源GUS活性存在差异 ,在小孢子分裂前后和成熟花粉萌发前后有两个活性高峰。检测花粉内源GUS活性的适宜 p H为 5 .0 ;p H7.0的条件下未检测到内源 GUS。用 2 0 %甲醇或 0 .2mmol/L葡糖二酸内酯处理不能完全抑制内源
- 施华中杨弘远周嫦
- 关键词：花粉烟草发育
- 烟草脱外壁花粉与完整花粉电激导入效果的比较研究
- 1998年
- 利用膜不通透的荧光染料钙黄素作为指示剂，比较了烟草脱外壁花粉与完整的未萌发花粉和萌发花粉电激导入的效果．研究了电激过程中的电场强度、脉冲持续时间、电激液的介质成分和浓度对三者的导入率及电激后花粉萌发率的影响．结果表明，从未萌发花粉、萌发花粉到脱外壁花粉，导入率逐渐升高，证实了脱外壁花粉由于摆脱了外壁的阻碍而有利于外源物质的电激导入．但电激后花粉萌发率的变化规律相反．荧光指示剂的应用便于优化选择适宜电激参数，为外源基因的导入实验提供了参考依据．
- 王劲施华中周嫦杨弘远
- 关键词：烟草
- 紫菜苔花粉原生质体的电激转化及Zm13-260-GUS-NOS融合基因的时序表达被引量：4
- 1995年
- 利用花粉作为外源基因的媒介进行植物遗传转化是一个活跃的研究方向,而将外源基因导入花粉是这一转化体系的重要环节.但因花粉壁厚,导入外源DNA比较困难,而脱壁后的花粉原生质体则理应相对优越.近年花粉原生质体的分离与培养已取得了一定进展,以花粉原生质体作为转化受体已成为可能.为此,我们以花粉特异启动子Zm13-260控制的GUS基因作为报告基因,用电激法分别转化紫菜苔花粉原生质体和花粉粒,通过瞬间表达检测,比较了二者的转化效果,并探讨了GUS基因在不同发育时期花粉原生质体中的时序表达特性.
- 施华中徐秉芳杨弘远周嫦
- 关键词：花粉原生质体GUS基因
- 烟草脱外壁花粉的电激基因转移被引量：4
- 1996年
- 以 β-葡糖苷酸酶 GUS 基因作为报告基因 ,通过瞬间表达的检测 ,比较了烟草 Nicotianatabacum L . 脱外壁花粉、未萌发与萌发花粉的电激导入效果 ,探讨了不同电激条件及启动子对外源基因瞬间表达的影响 .结果表明 :当脉冲时间常数为 13 ms时 ,导致脱外壁花粉和萌发花粉生活力下降约50 %的电场强度分别为 750 V/ cm和 12 50 V/ cm,在此条件下电激 ,二者的导入效果最好 .脱外壁花粉的GUS基因表达水平约为萌发花粉的 5倍、花粉粒的 30倍 .玉米花粉特异启动子 Zm13- 2 60 能启动 GUS基因在脱外壁花粉和萌发花粉中高效表达 ,而 Ca MV
- 施华中王劲杨弘远周嫦陈正华
- 关键词：烟草基因转移
- 用基因枪法将GUS基因导入烟草脱外壁花粉及其瞬间表达被引量：5
- 1998年
- 以β—葡糖苷酸酶（β—ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ，ＧＵＳ）基因作为报告基因，用基因枪法将其导入烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）脱外壁花粉和作为对照系统的完整花粉，探讨了启动子及不同轰击条件对外源基因瞬间表达的影响，比较了二者的转化频率。结果表明：玉米花粉特异启动子能启动ＧＵＳ基因在脱外壁花粉和完整花粉中表达，而ＣａＭＶ３５Ｓ启动子则不能。靶距离越近，着弹率越高，ＧＵＳ基因瞬间表达频率越高；当进气压力为９００ｐｓｉ（ｐｏｕｎｄｓｐｅｒｓｑ．ｉｎ．）、靶距为６ｃｍ时，脱外壁花粉的瞬间表达频率达最高，为０．４５％，约为完整花粉的６倍。表达的蓝色反应花粉经ＤＡＰＩ荧光染色后细胞学观察表明，金粉粒能够打入营养核和生殖核。
- 王劲施华中周嫦周嫦张献龙杨弘远
- 关键词：基因枪GUS基因烟草
- 绞股蓝细胞培养及其某些生理生化特性被引量：10
- 1991年
- 从绞股蓝幼叶诱导并筛选出了胚性愈伤组织,其悬浮培养细胞生长曲线呈S形,生长周期中培养液pH值先降低后回升,可溶性糖含量避渐降低,培养细胞可溶性蛋白质含量及过氧化物酶活性出现两个高峰,过氧化物酶谱带数目无变化。培养细胞能合成皂苷,静止期皂苷含量最高。
- 施华中程井辰
- 关键词：绞股蓝细胞营养过氧化物酶
