方玲
- 作品数:6 被引量:4H指数:2
- 供职机构:兰州大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 多效生长因子通过JNK信号通路负调控Schlafen2基因表达被引量:2
- 2008年
- 实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉默细胞JNK磷酸化水平的影响;应用Northern印迹分别检测JNK和p38通路特异性抑制剂对Ptn沉默细胞Slfn2基因转录水平的影响.结果发现,Ptn沉默细胞内JNK磷酸化水平高于对照细胞,外源性PTN处理后沉默细胞内JNK磷酸化水平下调;阻断JNK通路呈时间依赖性抑制Ptn沉默细胞中Slfn2基因转录,阻断p38通路对Ptn沉默细胞中Slfn2转录水平没有明显影响.结果提示,Ptn可能通过抑制其下游JNK/MAPK通路来负调控Slfn2的表达.
- 方玲胡迎春杨柳刘梦伊刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英
- 关键词:多效生长因子基因沉默
- Schlafen2基因在细胞中的表达及其生物学特性研究被引量:2
- 2008年
- 目的:建立Schlafen2(Slfn2)基因稳定表达的细胞系以进一步研究其生物学功能。方法:构建pEGFP-Slfn2真核表达载体;瞬时转染pEGFP-Slfn2载体及其对照载体于NIH/3T3细胞,观察细胞中Slfn2基因的表达及分布;稳定转染pEGFP-Slfn2及其对照空载体于NIH/3T3细胞,G418筛选获得抵制的细胞株,用Northern印迹进一步鉴定Slfn2在各细胞株中的表达情况;利用细胞生长曲线和Transwell细胞侵袭实验检测Slfn2对细胞增殖及迁移能力的影响。结果:本研究获得了稳定表达Slfn2的细胞株,该基因表达的蛋白在细胞核及细胞浆均有分布;稳定表达该基因的细胞株的增殖及迁移能力均显著降低。结论:Slfn2基因可能是一个潜在的肿瘤抑制基因。
- 刘梦伊周乔丹胡迎春方玲于雷张煦刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英
- 关键词:细胞增殖迁移转染基因表达
- 白细胞介素-1通过JNK信号通路调控Schlafen2基因的表达被引量:1
- 2008年
- 目的:在多效生长因子(Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素-1(IL-1)调控Schlafen2(Slfn2)基因表达的机制。方法:应用Northernblot检测Ptn沉默细胞Ptn-siRNAB/MEF241处于不同生长密度时Slfn2基因的表达变化,以确定Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达是否受到某种分泌性细胞因子的调控;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞,通过Northern blot检测细胞内Slfn2表达的抑制情况;用不同浓度的IL-1α中和抗体及IL-1受体拮抗剂处理Ptn沉默细胞不同时间,通过Western blot检测细胞中JNK磷酸化水平;Northern blot检测SP600125(JNK/MAPK通路抑制剂)对Ptn沉默细胞中Slfn2基因表达的影响。结果:Ptn沉默细胞中Slfn2基因的表达水平同细胞密度相关;用中和抗体和受体拮抗剂阻断IL-1通路,Slfn2表达受到显著抑制;IL-1受到抑制会影响JNK通路的活化;阻断JNK通路,Slfn2的表达受到显著抑制。结论:IL-1可以通过JNK通路诱导Slfn2的表达。
- 胡迎春方玲周乔丹陈忠民李刚吴德昌霍艳英
- 关键词:多效生长因子白细胞介素-1JNK通路基因表达
- 白细胞介素1在多效生长因子对Schlafen2基因负性调控中的作用被引量:1
- 2008年
- 目的:在多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)在多效生长因子对Schlafen2(Slfn2)基因负性调控中发挥的作用。方法:本研究用Ptn-siRNA B/MEF241细胞的培养液培养对照NC细胞不同时间,通过Northern杂交检测NC细胞中Slfn2表达水平变化;应用RT-PCR和Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50 ng/μl)作用对Ptn沉默细胞内IL-1表达水平的影响;分别使用重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)和IL-1α中和抗体阻断IL-1的作用通路,检测Ptn稳定沉默细胞中Slfn2基因表达变化。结果:Ptn沉默细胞培养液可以诱导对照细胞Slfn2表达;外源性PTN能抑制沉默细胞中IL-1α和IL-1f6的表达;IL-1受体拮抗剂(rhIL-1ra)和IL-1α中和抗体可抑制Ptn沉默细胞中Slfn2表达。结论:Ptn可能部分通过分泌性的细胞因子间接调控Slfn2基因表达,并且鉴定出在此调控过程中IL-1家族是其中一种非常重要的调控因子。
- 方玲胡迎春杨柳刘梦伊刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英
- 关键词:多效生长因子基因沉默白细胞介素1基因表达
- 多效生长因子Pleiotrophin对Schlafen2基因表达的影响及其调控机制的研究
- 目的:在多效生长因子/(Pleiotrophin,Ptn/)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞Ptn-siRNA B//MEF241中,研究Pleiotrophin对Schlafen2/(Slfn2/)基因表达的影响,以及...
- 方玲
- 关键词:多效生长因子基因沉默基因表达IL-1JNK信号通路
- 文献传递
- 白细胞介素1通过JNK信号通路调控Schlafen2基因的表达
- 目的在多效生长因子(pleiotrophin,Ptn)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞 Ptn-siRNA B/MEF241中,研究白细胞介素1(Interleukin-1,IL-1)调控 Schlafen2(Slfn2...
- 胡迎春方玲周乔丹陈忠民李刚吴德昌霍艳英
- 关键词:多效生长因子白细胞介素1JNK通路基因表达
- 文献传递