徐龙健
- 作品数：4 被引量：21H指数：2
- 供职机构：开滦总医院更多>>
- 发文基金：中国煤炭工业协会科学技术研究指导性计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA-876-3p靶向肽基脯氨酰顺反异构酶A调控胃癌细胞增殖和顺铂耐药性的作用机制研究被引量：2
- 2020年
- 目的研究微小RNA-876-3p(miR-876-3p)通过调控肽基脯氨酰顺反异构酶A(PPIA)对胃癌细胞增殖和顺铂(DDP)耐药性的影响。方法体外培养胃癌细胞MKN28,用低浓度梯度递增方法诱导MKN28细胞形成顺铂耐药性,以构建顺铂耐药细胞株(MKN28/DDP)。MKN28和MKN28/DDP细胞各包含4个实验组:阴性对照组、第1转染组(转染si-PPIA)、第2转染组(转染miR-876-3p mimics)和第3转染组(转染si-PPIA+miR-876-3p inhibitor)。用顺铂1μg·mL^-1处理各组MKN28细胞,用顺铂5μg·mL^-1处理各组MKN28/DDP细胞,培养24 h。以实时荧光定量-PCR法检测各组细胞中miR-876-3p表达水平,蛋白质印迹法检测各组细胞中PPIA蛋白的表达水平,细胞计数试剂盒法检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞细胞凋亡水平。结果miR-876-3p在正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞MKN28和MKN28/DDP中的相对表达量分别为1.01±0.21,0.41±0.15和0.32±0.11,MKN28与GES-1比较,差异有统计学意义(P<0.01);MKN28/DDP与MKN28比较,差异有统计学意义(P<0.05)。在表达miR-876-3p实验中,1μg·mL^-1顺铂处理MKN28,阴性对照组和第3转染组的细胞活力分别为(1.00±0.04)%,(0.65±0.03)%;这2组的细胞凋亡率(41.87±1.65)%,(68.98±4.12)%。5μg·mL^-1顺铂处理MKN28/DDP,阴性对照组和第3转染组的细胞活力分别为(1.01±0.02)%,(0.72±0.05)%;这2组的细胞凋亡率分别为(34.66±0.94)%,(56.71±3.03)%,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-876-3p可靶向结合PPIA。以1μg·mL^-1顺铂处理MKN28细胞,阴性对照组、第1转染组和第3转染组的细胞活性分别为(1.01±0.03)%,(0.58±0.04)%和(0.97±0.02)%;这3组的细胞凋亡率分别为(39.96±2.01)%,(71.12±2.98)%和(45.14±2.47)%。以5μg·mL^-1顺铂处理MKN28/DDP细胞,这3组的细胞活性分别为(1.01±0.04)%,(0.63±0.06)%和(0.94±0.05)%;这3组的细胞凋亡率分别为(31.95±1.31)%,(62.88±5.63)%和(36.84±2.11)%。上述指标:第1转染组与阴性对照组比较,差异均�
- 徐龙健高建超钟轩孙敬国李东坤
- 关键词：胃癌增殖顺铂耐药
- 腹部及盆腔术后并发下肢深静脉血栓形成33例临床分析被引量：2
- 2008年
- 聂姬锋徐龙健黄秋学董会娟
- 关键词：下肢深静脉血栓形成术后并发经膀胱前列腺摘除术盆腔腹腔镜胆囊切除术腹会阴联合切除术
- lncRNA XIST通过调控miR-337-3p/HOXC8轴促进胃癌的发展进程被引量：14
- 2019年
- 目的:探讨lncRNA XIST(XIST)通过调控miR-337-3p/HOXC8分子轴介导胃癌发展进程的分子机制。方法:选取2013年3月至2018年1月河北省唐山市开滦总医院普通外科手术切除的58例胃癌组织和对应的癌旁组织标本,以及人胃癌细胞系AGS、MGC803、HGC27和人胃黏膜细胞GES-1,用qPCR检测胃癌组织和细胞系中XIST和miR-337-3p的表达水平。将XIST敲降载体、miR-337-3p mimics/inhibitor和HOXC8过表达载体转染进AGS细胞,用CCK-8、Transwell实验检测AGS细胞的增殖及侵袭能力,用WB检测HOXC8及上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。用双荧光素酶报告基因验证XIST、miR-337-3p和HOXC8的靶向关系。结果:XIST在胃癌组织和细胞系中高表达(均P<0.01)。敲降XIST显著抑制AGS细胞的增殖、侵袭和EMT(P<0.05或P<0.01)。XIST靶向作用miR-337-3p并下调其表达,HOXC8是miR-337-3p的靶基因。敲降XIST通过靶向上调miR-337-3p对HOXC8表达的抑制作用,从而抑制AGS细胞增殖、侵袭和EMT(P<0.05或P<0.01)。结论:敲降XIST可抑制AGS细胞增殖、侵袭和EMT,其作用机制是通过靶向miR-337-3p并下调HOXC8的表达。
- 徐龙健高建超郑景珍赵志娟钟轩孙敬国李东坤
- 关键词：胃癌AGS细胞增殖上皮间质转化
- 粪便中SFRP2基因甲基化与大肠癌的相关性被引量：3
- 2015年
- 目的探讨粪便中的分泌型卷曲相关蛋白(SFRP)2基因甲基化对大肠癌患者的诊断价值。方法选取2011年12月至2013年12月该院经病理检查确诊的52例大肠癌病人及32例结肠镜阴性的健康者(对照组)。通过亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测大肠癌52例粪便中SFRP2基因启动子两个区域(区域1和区域2)甲基化状态,分析SFRP2基因甲基化与肿瘤临床病理因素的关系。结果大肠癌患者及健康者粪便中广泛甲基化、部分甲基化及无甲基化分别为59.6%(31/52)、84.6%(44/52)、15.4%(8/52)和12.5%(4/32),25.0%(8/32)、75.0%(24/32);广泛和部分SFRP2的甲基化率在大肠癌患者粪便的检出率均明显高于健康体检者(P<0.05);SFRP2基因甲基化与大肠癌患者性别、肿瘤分期、浸润程度无显著关联。结论 SFRP2基因甲基化是大肠癌进展过程中的早期事件,粪便SFRP2基因甲基化有望成为早期无创诊断大肠癌的新途径。
- 贾凤洁孙冬生徐龙健刘宁曹立赢
- 关键词：基因甲基化大肠癌
