徐正平
- 作品数:17 被引量:194H指数:8
- 供职机构:中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 利用激光微束照射体外培养Hela细胞筛选叶绿素衍生物光敏剂
- 1991年
- 本文报导了将激光微束照射单细胞技术用于从蔬菜等植物中提取的一些叶素素衍生物(CPD)杀伤Hela肿瘤细胞的光动力效应的研究。实验结果为筛选出药效相似于HPD的CPD提供了依据。
- 王兰岚宋桂英徐正平郭延德梁宏
- 关键词:肿瘤光敏剂HELA细胞
- 将菜豆几丁酶基因导入苹果砧木的研究被引量:34
- 1998年
- 以苹果砧木八楞海棠(Malusmicromalus)为实验材料,用微束激光穿刺法将菜豆几丁酶基因导入苹果叶片,成功地获得了转基因植株。实验结果表明,以苗龄26天的小苗上部刚展开的叶片再生频率可达100%。经高渗缓冲液预处理后用激光微束穿刺导入外源DNA可得到较高的转化频率。在150个再生叶片中经卡那霉素筛选得到25株绿苗,经PCR扩增检测,3株呈阳性结果,表明外源几丁酶基因已整合到苹果的基因组DNA中。
- 赵慧宋桂英张光中刘桂珍李港丽张丽华张丽华徐正平毛勇陈正华
- 关键词:苹果砧木微束激光
- HpD加激光照射预选单细胞的电镜术
- 1990年
- 卟啉类化合物是一种强的光敏剂,利用血卟啉衍生物(HpD)与激光微束相结合照射单细胞,在光学显微镜下对肿瘤细胞的研究已取得了一定的进展。为深入地从超微结构方面研究细胞内的早期病变。
- 邓燕华欧笑兰梁宏徐正平郭延德
- 关键词:HPD激光
- 激光微束切割小冰麦异附加系染色体的研究被引量:2
- 1992年
- 利用激光微束,并选用适当的功率密度可将小冰麦异附加系花粉细胞染色体切割成2~3个片段,这个技术的建立为激光微束应用于染色体片段DNA微克隆及基因定位提供可能。
- 王兰岚宋桂英徐正平陆仲康梁宏
- 关键词:激光微束染色体小冰麦异附加系
- 利用激光微束将外源基因导入高等植物细胞的研究被引量:13
- 1993年
- 本实验室已建立了激光微束向植物细胞导入外源基因的试验程序。用已建立的程序对多种经济作物和林木进行外源基因导入的研究,均得到了GUS基因瞬时表达的结果,正在继续研究GUS基因的整合表达。 广泛地选用了不同科属的植物及不同外植体进行外源基因导入的研究,所用材料如下:在被子植物中选用单子叶无性繁殖的兰科花卉兰花(Dendrobium)小圆球茎为外植体;以双子叶植物中的草本植物锦葵科的棉花(G.hirsulum L.)再生胚状体为外植体;十字花科油菜。
- 王兰岚宋桂英周奕华黄健谷瑞升郭大海陈军徐正平关月兰陈正华
- 关键词:激光外源基因高等植物细胞
- 激光微束切割小冰麦异附加系染色体的研究被引量:24
- 1997年
- 利用微束激光并选用适当的功率密度,可将小冰麦异附加系花粉母细胞染色体切割成2~3段。这个技术的建立,使激光微束应用于染色体片段、DNA。
- 王兰岚宋桂英徐正平陆仲康梁宏
- 关键词:小麦小冰麦异附加系激光微束染色体
- 利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究被引量:21
- 1999年
- 本文以甘蓝型“双低”油菜新品种H165为实验材料,以子叶柄为外植体,研究了微束激光转化系统中的一些关键因素:如取材时间以播种后4—5天为宜;高渗液预处理20—40分钟者最佳;外源DNA浓度以0.05—0.1μg/μl获得转基因植株最有利等等。已建立一种操作简便,重复性好,并能准确定位于靶体细胞的转化体系。并用这个转化体系成功地将菜豆几丁酶基因导入油菜,并获得转基因植株,经PCR扩增检测为阳性,实验结果表明外源菜豆几丁酶基因确已整合到油菜基因组中。
- 杨仲毅王兰岚宋桂英徐正平张丽华刘桂珍陈正华
- 关键词:微束激光油菜几丁质酶基因
- 利用激光微束穿刺法将外源基因导入小麦的研究被引量:59
- 1995年
- 用激光微束穿刺法将携带有新霉素磷酸转移酶(NPT-Ⅱ)基因的质粒pJIT101导入京花1号小麦幼胚细胞。方法是将小麦幼胚细胞进行高渗缓冲液预处理,用微米级的激光微束处理,然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的愈伤组织及绿色小植株。第一年,从150个小麦幼胚中,在卡那霉素培养基上筛选出4株绿苗,取两株进行NPT-Ⅱ酶活性分析,测到了NPT-Ⅱ酶的活性。第二年重复实验,从245个小麦幼胚中,经筛选获得1株绿苗,进行了叶片DNAPCR扩增检测,转化的绿色小苗扩增出所导入的NPT-Ⅱ基因编码的片段。结果表明,外源NPT-Ⅱ基因已导入了小麦,并实现了整合表达。
- 王兰岚傅荣昭宋桂英张健徐正平孙勇如
- 关键词:小麦激光微束外源基因
- 激光微束显微切割植物染色体的研究被引量:19
- 1991年
- 激光微束是六十年代激光技术问世后在生物学和医学领域中出现的一项新技术。该技术利用激光方向性好、光色单一和亮度高等独一无二的特点,把激光束通过光路系统引入显微镜并聚焦成很小的光点对细胞或细胞器进行精细的细胞或亚细胞水平的显微外科术。染色体是细胞核里一种极重要的结构。每一种真核生物都有一定数目的染色体;每条染色体上都有排列次序一定的基因。任何染色体数目的变化和染色体上基因排列次序的变化,都会引起生物遗传性的变异。激光微束遗传操作真核生物染色体是激光生物学中重要和活跃的研究课题。Berns等以两栖类和哺乳动物细胞为材料进行了激光显微照射染色体及其子细胞遗传分析的大量研究。梁宏等用氩离子激光显微切割长鼻(鼠菐)培养细胞有丝分裂染色体或使受照染色体区域DNA失活都取得了成功。Monajembashi和Cremer建立了用激光微束显微切割人淋巴细胞染色体的技术。本文报道用激光微束切割高等植物染色体的实验结果,其目的是建立起对农作物染色体进行激光遗传操作的有效技术方法。
- 王兰岚陈仲康黄力全宋桂英徐正平梁宏
- 关键词:激光植物
- 将外源物质大量导入活细胞的方法
- 本发明属于生物技术领域。用高渗缓冲液浸泡细胞,使细胞内部部分水分外流,然后将细胞转入含有外源物质的普通培养液中,以形成细胞渗透压内高外低的梯度,用物理方法造成细胞膜穿孔,外源物质就大量进入细胞。用本方法可以改良动植物的遗...
- 郭延德王兰岚宋桂英徐正平张健田文忠
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