张雪梅 作品数:10 被引量:2 H指数:1 供职机构: 大连大学 更多>> 发文基金: 辽宁省教育厅高等学校科学研究项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 历史地理 更多>>
荧光定量RT-PCR鉴别检测蓝耳病毒株的方法 一种荧光定量RT-PCR鉴别检测蓝耳病毒株的方法,包括以下步骤:1)采集血样,提取RNA,并设计特异性引物;上游引物的核苷酸序列为:CTTCCGACACCATCCGAG,下游引物的核苷酸序列为:TTGGCAGGTTGGT... 王钦富 张雪梅 胡亚萍 王美辰文献传递 猪肺脏巨噬细胞的分离培养 被引量:1 2015年 提取分离猪肺泡巨噬细胞(PAM)、猪肺血管巨噬细胞(PIM)、猪肺间质巨噬细胞(IM)三种细胞并进行体外培养,采用免疫组化和流式细胞术进行细胞的异质性研究。无菌条件下通过支气管肺泡灌洗获取PAM,右心室插管经心脏行肺血管原位灌注的方法分离得到PIM,肺组织机械处理结合酶消化法(胶原酶IA)分离IM。显微镜下观察三种细胞的形态上的不同;免疫组化和流式细胞术检测细胞表型。三种巨噬细胞形态有明显的不同,PAM较大,表面粗糙,PIM和IM较小,并且细胞光滑;PAM细胞大多为CD163阳性,IM和PIM则CD86阳性较多。PAM、PIM、IM在形态和表型上存在异质性。 张岩岩 胡亚萍 张雪梅 刘欢 王鹏 王钦富关键词:猪肺泡巨噬细胞 一种聚酮类化合物及其制备方法 一种聚酮类化合物及其制备方法,本发明属于化合物合成领域。本发明对链格孢属内生真菌Alternariasp.进行固体发酵,使用一系列分离纯化方法从发酵产物中得到了一个结构新颖的聚酮类单体化合物。结构如式(Ⅰ)所示:<Ima... 卢轩 唐小渊 张雪梅 冯宝民 唐川 冯伟星文献传递 猪繁殖与呼吸综合症病毒免疫抑制机制研究进展 猪繁殖与呼吸综合症(PRRS),是猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)引起的病毒性传染病,主要引起母猪厌食、高热、流产、死胎、木乃伊胎及仔猪呼吸道障碍等症状。PRRSV是一种单股正链RNA病毒,有囊膜,归属于冠状病毒科、... 张雪梅 王钦富关键词:猪繁殖与呼吸综合症 免疫系统 疫苗免疫 病毒性传染病 可同时鉴别猪繁殖与呼吸综合症病毒的RT-PCR技术 本发明属于重大动物疫病检疫检测领域,具体涉及到一组用于可同时区别猪繁殖与呼吸综合症野毒株(包括经典毒株、高致病性毒株)和疫苗毒株鉴别诊断的RT-PCR引物、操作方法及其临床应用;设计特异性引物、提取RNA、利用RT-PC... 王钦富 张雪梅 王美辰文献传递 山本常朝与新渡户稻造武士道之生死观分析——以《叶隐闻书》和《武士道》为中心 2013年 武士道作为日本民族的精神支柱和社会道德基石,长期以来一直是国内外学术界研究的热点。目前,综合国内的武士道研究,大都集中在武士道的形成、发展和影响上,而关于武士道的对比研究则尚未充分。为此,试图从武士道的经典著作——《叶隐闻书》和《武士道》出发,从生死观的角度来探讨山本常朝和新渡户稻造武士道思想的异同。希望能使我们进一步理解武士道的精神实质,同时对今后武士道的对比研究也能够提供一些借鉴。 姜明 张雪梅关键词:生死观 增强CpG免疫刺激作用途径的研究进展 被引量:1 2012年 CpG基序(CpG motifs)是指含有非甲基化的胞嘧啶(C)和鸟嘌呤(G)核苷酸核心的寡聚脱氧核苷酸(ODN)序列,又称为免疫刺激序列,一般为6个寡聚核苷酸。 徐娜 张雪梅 王钦富关键词:CPG基序 免疫刺激作用 寡聚脱氧核苷酸 免疫刺激序列 寡聚核苷酸 非甲基化 EID3基因在大肠癌传代细胞mRNA的表达及其克隆 2012年 目的研究新的大肠癌相关性抗原EID3基因的克隆及其诊断价值。方法用SEREX技术筛选睾丸组织cDNA噬菌体表达文库,发现了一类似于肿瘤抑制基因(E1A基因)的EID3基因(NM_001008394.1),构建原核表达载体pET32k-EID3,IPTG诱导重组EID3蛋白质的表达,并利用Ni NTA His Bind树脂纯化该重组蛋白质。用RT-PCR技术研究EID3mRNA在正常组织和大肠癌传代细胞的表达。结果经PCR扩增成功获得1002bp的人EID3基因,测序正确。在大肠杆菌中目的蛋白质的表达量占菌体总蛋白质的10%,SDS-PAGE及Western blot分析显示,其相对分子质量为39000KD,纯化后的6xHisEID3纯度可达92%。通过RT-PCR分析发现,EID3基因在43例大肠癌传代细胞株中有39例阳性,阳性率为90.7%。在正常组织中,除睾丸组织不表达或有极低水平转录外,余均不表达。结论 EID3基因克隆、表达及纯化的成功,为其今后的肿瘤诊断和肿瘤多肽疫苗治疗研究奠定了基础。EID3m RNA表达检测用于诊断大肠癌,可能具有高特异性和高敏感性的特点。EID3蛋白在大肠癌患者中能够诱导机体的抗体免疫应答,可能成为一个新的大肠癌相关性抗原分子,其用于诊断大肠癌的可行性,有待进一步深入研究。 王钦富 李志 牟红梅 徐娜 张雪梅 韩慧关键词:大肠癌 克隆 MRNA 妊娠母猪免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗对仔猪免疫功能的影响 2014年 规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)呈持续性感染,给养猪业造成的损失最为严重。部分规模化猪场未实施切实的猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫,呈慢性和潜伏感染,作者现场对妊娠母猪接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HPPRRS)减毒活疫苗(TJM-F92株),旨在从体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫功能角度探讨妊娠母猪接种疫苗后对仔猪免疫功能的影响。选取妊娠60d母猪随机分为A、B 2组,A组母猪接种HP-PRRS减毒活疫苗(TJM-F92株),B组母猪接种等量生理盐水,2组所产仔猪于10、20、30日龄时检测PRRSV、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)母源抗体,以MTT法测定外周血T、B淋巴细胞转化率、以琼脂平板法测定血清溶菌酶含量、以Griess试剂法测定NO含量。试验结果表明,妊娠母猪免疫HP-PRRS减毒活疫苗(TJM-F92株)后,其所产10日龄仔猪PRRSV母源抗体水平显著高于对照组仔猪(P<0.05),仔猪CSFV阻断抗体极显著增高(P<0.01),20日龄仔猪PRV感染抗体显著下降(P<0.05);免疫组和对照组所产仔猪的T、B淋巴细胞转化率及NO、溶菌酶含量均无显著差异(P>0.05)。提示,妊娠母猪免疫HP-PRRS减毒活疫苗(TJM-F92株),对所产仔猪非特异性免疫功能和T、B免疫功能均无免疫抑制作用,仔猪抗PRRSV母源抗体、抗CSFV阻断抗体均显著增高且PRV感染抗体降低。 张雪梅 张岩岩 江颖 郝茂贤 邹民发 王钦富关键词:高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 母源抗体 猪瘟病毒 红景天内生真菌Fusarium sp.HJT-P-2次级代谢产物及其促进植物生长活性的研究 2023年 目的研究长白红景天植物内生真菌Fusarium sp.HJT-P-2次级代谢产物,以期得到结构新颖的先导化合物。方法采用硅胶柱色谱和高效液相色谱等方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物的结构,并对部分化合物进行模式植物拟南芥种子植物生长影响活性研究。结果内生真菌Fusarium sp.HJT-P-2次级代谢产物中分离得到6个化合物:1个新化合物1和5个萘醌类化合物2、3、4、5、6。化合物2、3对拟南芥种子根的生长抑制作用相对较弱,化合物5、6对拟南芥种子根的生长抑制作用相对较强,化合物4在质量浓度为2 mg·L^(-1)时,相对于其前后浓度对根生长的抑制现象出现反常行为促进了根的生长。化合物6在质量浓度为20 mg·L^(-1)时,所有种子均未发芽,浓度过高时出现致死现象。结论为发现新型活性先导化合物提供研究思路,同时为绿色植物激素的开发提供一定的物质基础。 张雪梅 冯伟星 唐小渊 戚竣凯 李艳君 章煜 冯宝民 卢轩关键词:红景天 植物内生真菌 次级代谢产物