张述
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂筏对跨膜型TNF-α信号的影响被引量：4
- 2010年
- 目的构建仅定位在脂筏内或外的tmTNF-α突变体,研究脂筏与tmTNF-α生物学功能的关系。方法通过重组PCR,构建C-47A-tmTNF-α-pIRES2-EGFP,cav-tmTNF-α-pIRES2-EGFP重组质粒。采用激光共聚焦观察定位、蔗糖密度梯度离心法提取脂筏、MTT比色法检测胞毒。结果获得了预期突变,且无任何其它点突变,移码及缺失突变的突变体。tmTNF-α部分定位在脂筏内,效应细胞的胞毒与tmTNF-α定位在脂筏内外无关,而破坏靶细胞脂筏结构导致胞毒效应下降,且与ICAM-1相关。结论效应细胞的胞毒与脂筏无关,而靶细胞与脂筏密切相关,该研究有助于进一步认识tmTNF-α介导的生物学功能与脂筏间的关系。
- 刘涛陈克清张述于敏冯玮姜晓丹尹丙姣李卓娅王晶
- 关键词：脂筏信号
- 改进溶液Ⅱ配方可提高质粒DNA提取的质量及得率被引量：5
- 2008年
- 目的通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率。方法取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法,小量提取制备质粒DNA,以凝胶电泳、紫外分光光度计及酶切验证提取效果。结果在NaOH浓度为0.10mol/L下,不可逆变性条带基本得到消除,超螺旋DNA的提取纯度和得率均得到明显提高。结论改变溶液Ⅱ的碱性条件,可以制备高质量的质粒DNA。
- 黄南程熠连欢张述李卓娅
- 关键词：碱裂解法
- 肿瘤坏死因子Ⅰ型受体封闭肽-Fc融合蛋白对肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响
- 目的:探讨特异性阻断肿瘤坏死因子Ⅰ型受体(TNFR1)是否改善高糖高脂饮食引起的胰岛素抵抗。方法:建立稳定表达TNFR1阻断肽(TNFR1BP)和Fc融合蛋白(TNFR1BP-FC)的CHO细胞系,纯化真核细胞表达的融合...
- 梁慧芳黄丽霞朱建华杨林张述李清芬李卓娅
- 文献传递
- 肿瘤坏死因子Ⅰ型受体封闭肽-Fc融合蛋白对大鼠胰岛素抵抗的影响
- 建立稳定转染TNFR1封闭肽-IgG1Fc段的真核分泌型表达载体pIg的细胞株CHO, 收集培养上清并纯化TNFR1封闭肽—IgG1Fc融合蛋白(TNFR1BP:Fc)。体外实验证实该融合蛋白可与L929细胞上的YNFR...
- 梁慧芳黄丽霞朱建华杨林张述李清芬李卓娅
- 文献传递
- TRAF1-DsRed真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的定位被引量：5
- 2007年
- 目的构建融合蛋白TRAF1-DsRed的真核表达载体及观察TRAF1在COS-7细胞中的表达及定位。方法采用RT-PCR技术从外周血单个核细胞中扩增TRAF1cDNA,定向克隆至真核表达载体pDsRedC1,经脂质体转染COS-7细胞并以间接免疫荧光检测其在COS-7中表达。运用罗丹明123染色和激光共聚焦技术观察TRAF-1在COS-7细胞中的定位。结果转染重组子pTRAF1-DsRed的COS-7细胞可见红色荧光蛋白的表达,TRAF1在COS-7细胞中定位于线粒体。结论成功构建pTRAF1-DsRed融合基因并进行真核表达,确定TRAF-1在COS-7细胞中的定位,为进一步研究有关TRAF1的信号传导通路奠定了基础。
- 王妮丹王晶潘玉玲秦娜林庞艳朱建华刘涛张述李卓娅
- 关键词：TRAF1细胞定位线粒体
