张赫
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金辽宁省高校创新团队支持计划辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SD大鼠肋软骨细胞的原代培养和去分化现象的观察被引量：2
- 2009年
- 目的建立大鼠肋软骨细胞(RCC)分离、培养的方法,探讨其传代过程中细胞外基质及其形态的变化。方法采用胰酶和Ⅱ型胶原酶两步消化法结合机械吹打获得分散的单个RCC,观察单层培养的不同代数RCC的细胞形态变化;采用免疫细胞化学方法检测不同代数RCC蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达。结果大鼠肋软骨经两步消化后,可获得高纯度的软骨细胞,经免疫组化及甲苯胺蓝染色呈阳性结果,同时观察到RCC在传代过程中细胞发生了去分化现象。结论软骨细胞可以通过传代培养获得扩增,但仅限于四代以内细胞。
- 袁亚江梅晰凡高蔚然张赫
- 关键词：软骨细胞去分化
- 共培养条件下大脑皮层神经元诱导肌源性干细胞成神经元样细胞
- 2011年
- 目的：研究使用共培养系统将肌源性干细胞（MDSCs）诱导为神经元样细胞的可行性及机制.方法：分离新生SD大鼠的MDSCs及皮层神经元,以叔丁基过氧化氢（终浓度为200μmol/L）损伤神经元,构建氧化应激损伤的神经元模型.当MDSCs差速贴壁至第5代时,将其随机分为MDSCs和损伤的神经元置于共培养系统中培养（损伤组）、MDSCs和正常神经元共培养（未损伤组）以及MDSCs置于共培养系统中单独培养（MDSCs组）,培养7d后用神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学法鉴定诱导的结果,并用大鼠脑源性神经营养因子（BDNF） ELISA试剂盒检测不同时间点各组培养液中该因子的分泌情况.结果：共培养7d后检测到损伤组与未损伤组均有部分MDSCs分化为表达NSE的神经元样细胞,前者分化率高于后者,MDSCs组未见有细胞分化为神经元样细胞.第2天损伤组BDNF的分泌量高于未损伤组,同时,损伤组第2天BDNF的分泌量高于第4天和第6天的分泌量.在不同时间点损伤组与未损伤组培养液中BDNF的分泌量均高于MDSCs组.结论：在共培养条件下,大鼠皮层神经元可诱导MDSCs为神经元样细胞,这与神经元分泌的BDNF有着重要联系,MDSCs也可分泌BDNF.
- 刘世琼梅晰凡任甫刘畅张赫
- 关键词：肌源性干细胞神经元神经元样细胞脑源性神经营养因子
- Detla1基因在肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的：研究Detla1基因在大鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达。方法：大鼠乳鼠骨骼肌体外培养增殖,分为对照组完全培养基培养，实验组加入诱导剂培养。通过RT-PCR、免疫荧光和免疫印迹法观察Detla1基因在诱导组和对照组的表达差异。结果：对照组Detla1基因表达强阳性，实验组基本不表达。结论：大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Detla1基因表达减低。
- 郭占鹏梅晰凡袁亚江张赫李全双
- 关键词：肌源性干细胞神经样细胞
- 大鼠乳鼠肌源性干细胞体外诱导分化为神经样细胞被引量：4
- 2010年
- 目的：探讨神经生长因子（NGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导大鼠乳鼠肌源性干细胞（MDSCs）分化为神经样细胞的可行性.方法：取SD大鼠乳鼠骨骼肌,差速贴壁至第5代时培养液中加入诱导培养基培养,行神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学鉴定和RT-PCR分析.结果：分化后细胞NSE染色阳性,RT-PCR结果显示,诱导后MDSCs样品中检测到NSE、GFAP特异性条带.结论：在一定条件下NGF和bFGF联合诱导法可以诱导MDSCs分化为神经样细胞.
- 郭占鹏梅晰凡李全双袁亚江王岩松张赫刘世琼
- 关键词：肌源性干细胞神经样细胞碱性成纤维细胞生长因子神经生长因子
- Jagged1蛋白在肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中的表达差异被引量：1
- 2009年
- 目的Jagged1蛋白在大鼠肌源性干细胞(MDSCs)体外增殖分化为神经样细胞过程中的表达差异研究。方法大鼠乳鼠骨骼肌消化后体外培养增殖,第5代传代后细胞分为2组:对照组完全培养基培养,诱导组加入诱导剂诱导。6 d后观察2组细胞的形态变化,并进行NSE免疫细胞化学鉴定。然后通过免疫荧光观察Jagged1蛋白的表达差异。结果诱导组细胞NSE染色阳性,免疫荧光结果显示对照组Jagged1蛋白表达阳性,实验组基本不表达。结论大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Jagged1蛋白表达存在明显差异。
- 郭占鹏梅晰凡李全双王滢丽张赫刘世琼
- 关键词：肌源性干细胞神经样细胞
- 大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Hes1蛋白的表达差异被引量：1
- 2010年
- 目的:研究Hes1蛋白在大鼠肌源性干细胞(MDSCs)体外诱导分化为神经样细胞过程中的表达差异。方法:大鼠乳鼠骨骼肌消化后体外培养增殖,第5代传代后细胞分为两组:对照组完全培养基培养,实验组加入诱导剂培养。6d后观察两组细胞的形态变化,并进行神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)免疫细胞化学鉴定。然后通过免疫荧光和Western Blot技术观察Hes1蛋白的表达差异。结果:实验组细胞呈NSE染色阳性,对照组基本不表达;免疫荧光和Western Blot结果显示,与对照组比较,实验组Hes1蛋白表达较强(P<0.05)。结论:在体外,大鼠肌源性干细胞分化为神经样细胞过程中Hes1蛋白表达降低。
- 张赫梅晰凡郭占鹏李全双袁亚江刘世琼
- 关键词：肌源性干细胞神经样细胞
- 透明质酸凝胶中肌源性干细胞与透明软骨联合培养的实验研究
- 2011年
- 目的探讨肌源性干细胞与软骨细胞混和培养体外成软骨的可行性。方法分离培养、扩增传代兔MDSCs及关节软骨细胞,二者按一定比例混和,6×1010/L密度接种于5%浓度的透明质酸凝胶为共培养组,以相同密度的单纯MDSCs和单纯软骨细胞作为阴性与阳性对照。倒置相差显微镜下观察,10 d后行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学检测,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果 5 d后镜下见共培养组MDSCs形态由梭形向多边多角形转化,10 d后细胞甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学检测与阳性对照组相同,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。阴性对照组在体外培养过程中未分化为软骨细胞。结论软骨微环境在MDSCs成软骨分化过程中具有重要作用,软骨细胞能有效地诱导MDSCs向软骨样细胞分化,透明质酸凝胶可以作为软骨组织工程的良好载体。
- 沈兆亮梅晰凡袁亚江李全双郭占鹏张赫
- 关键词：肌源性干细胞软骨样细胞透明质酸凝胶
