张舵舵
- 作品数:23 被引量:60H指数:4
- 供职机构:吉林大学第一医院更多>>
- 发文基金:吉林大学研究生创新基金资助吉林省科技厅发展计划项目吉林省科技厅科技发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- siRNA对骨肉瘤细胞MDM2的表达及细胞增殖的抑制作用被引量:4
- 2008年
- 目的:研究siRNA对人骨肉瘤U20S细胞MDM2基因表达及肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法:构建可表达针对MDM2的siRNA质粒(PGCsilencerTM-MDM2-siRNA)。转染siRNA MDM2(简称siMDM2),阴性对照质粒到U20S,并设只加转染试剂作空白对照组,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法检测siMDM2对MDM2基因和蛋白表达的抑制作用,并用MTT法检测siMDM2对细胞增殖的抑制作用。结果:RT-PCR结果显示,转染siMDM2-1和-2组MDM2的mRNA表达量分别下调到空白对照组的32.61%和39.06%;Western blotting结果显示,转染siMDM2-1和-2组蛋白表达量下调到空白对照组的35.76%和42.20%;转染阴性对照质粒的MDM2基因和蛋白与转染试剂组比较差异均无显著性(P>0.05)。MTT结果显示,转染siMDM2后细胞生长受到明显抑制,与转染试剂组比较差异具有显著性(P<0.05),阴性对照组抑制率与转染试剂组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:siRNA可以有效地抑制U20S细胞中MDM2的表达,并抑制细胞增殖。
- 吕佳音吴丹凯徐春华张舵舵吴丹华高忠礼赵燕颖
- 关键词:SIRNAMDM2骨肉瘤逆转录聚合酶链反应
- 转染和干扰Runx2基因对K7 M2细胞的影响被引量:1
- 2011年
- 目的探讨干扰和转染Runx2基因后对K7M2骨肉瘤细胞体外生物学活性的影响。方法分别将阴性对照质粒、携带Runx2和siRNA Runx2的质粒转染到K7M2细胞中。应用Western blot检测转染和干扰Runx2基因对其蛋白表达的影响,并检测细胞体外的增殖能力(MTT)、侵袭性、迁移性和黏附性的变化,并应用流式细胞仪(FCM)检测相应细胞的凋亡率和细胞周期分布的变化。结果与空白对照组比,转染Runx2和siRunx2组的K7M2细胞中Runx2蛋白表达分别明显增强和减弱,而阴性对照质粒组没有明显改变。转染siRunx2组的细胞,MTT结果显示增殖能力明显下降,迁移性、侵袭性和增殖指数(PI)也明显下降,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05),黏附性和凋亡率却没有明显变化。转染Runx2组K7M2的细胞增殖能力、迁移性、侵袭性和PI明显增高,与空白对照组比差异有统计学意义(P<0.05),黏附性和凋亡率没有明显变化。阴性对照组和空白对照组比上述指标没有明显改变。结论 Runx2可以促进K7M2细胞增殖,增强细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能是和改变细胞周期的分布,使细胞更快的进入G2/M期有关。
- 吴丹凯赵燕颖杨泽成吕佳音张舵舵高忠礼
- 关键词:RUNX2骨肉瘤SIRNA
- 鼠双微粒体-2基因沉默对人肝癌HepG2细胞移植瘤生长的抑制作用被引量:2
- 2013年
- 目的构建鼠双微粒体-2基因(MDM2)靶向小分子干扰RNA(siRNA)质粒,研究其对人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,探讨其在肝癌基因治疗中的可行性。方法构建MDM2的siRNA真核表达载体pSilencer-siRNA-MDM2(siMDM2),建立裸鼠荷瘤模型,分别给予阴性对照质粒和siMDM2质粒处理。监测肿瘤生长变化,RT-PCR、Westernblot方法检测MDM2及p53mRNA和蛋白的表达变化。正态分布数据的组间比较用单因素方差分析及LSD检验。结果裸鼠体内实验结果显示,转染siMDM2-1和siMDM2-2组与对照组相比,肿瘤增长受到明显抑制,抑瘤率分别为60.6%和54.6%。RT-PCR和Westernblot结果示MDM2的mRNA和蛋白质表达下调,而p53的mRNA和蛋白质表达上调。与空白组比较,转染siMDM2-1和siMDM2-2组的MDM2mRNA表达分别下调62.80/0和61.6%,MDM2蛋白表达分别下调60.7%和59.5%;p53mRNA表达分别上调47.1%和45.6%,p53蛋白表达分别上调45.9%和44.3%,差异均具有统计学意义(F值分别为75.099、47.860、17.676和235.770,P值均〈0.01)。结论siRNA沉默MDM2基因能抑制人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤的形成,可能与其在体内有效下调MDM2和上调p53的mRNA及蛋白质表达有关。
- 赵燕颖李亚刚孙远杰刘海鹏杨泽成张舵舵赵春燕
- 关键词:基因沉默小分子干扰基因
- siRNA抑制人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达及细胞增殖被引量:4
- 2009年
- 目的研究siRNA MDM2对人前列腺癌细胞PC3的MDM2表达和细胞增殖的作用。方法构建PGCsilencerTM-MDM2 siRNA,并转染入PC3细胞,分别用RT-PCR和Western blot检测siMDM2对PC3细胞MDM2基因和蛋白表达的抑制作用;用MTT法检测siMDM2对PC3增殖抑制的作用,用流式细胞术检测siMDM2对PC3细胞凋亡的影响。结果PT-PCR和Western blot结果显示siMDM2能显著抑制PC3细胞MDM2基因和蛋白的表达,抑制率最高可达65%;MTT和流式细胞术结果证明siMDM2能显著抑制PC3细胞增殖并诱导细胞凋亡。结论siMDM2能特异有效地抑制MDM2在PC3中的表达,并抑制PC3细胞增殖,促进其凋亡。
- 李然伟赵燕颖杨泽城张舵舵吕佳音刘喜春
- 关键词:SIRNAMDM2前列腺癌RT-PCR
- 溶血磷脂酸对心梗大鼠Cx43及心肌细胞离子通道作用的研究
- 目的:本文以体表心电图为指标,观察心梗模型大鼠心律失常发生率,运用BL-420E+记录仪观察LPA对心梗模型大鼠离体乳头肌收缩力的影响,应用膜片钳技术观察LPA对心梗模型大鼠心室肌细胞L-Ca2+电流的影响,应用West...
- 张舵舵
- 关键词:溶血磷脂酸心律失常离子通道连接蛋白43
- 文献传递
- 大豆异黄酮的抗肿瘤研究被引量:15
- 2006年
- 张义赵春燕孙亚芹马丽娟张舵舵
- 关键词:抑瘤率染料木素
- 非酒精性脂肪肝病与代谢综合征相关性被引量:7
- 2008年
- 程晔张舵舵
- 关键词:非酒精性脂肪肝病代谢综合征胰岛素抵抗患病率
- siRNA抑制人胶质瘤细胞MDM2的表达及细胞增殖被引量:1
- 2011年
- 目的研究siRNA对人胶质瘤U251细胞MDM2基因表达的抑制作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法体外合成2对针对MDM2基因的siRNA,经脂质体转染导入U251细胞;用半定量RT-PCR检测siRNA MDM2对MDM2基因表达的抑制作用;并用MTT法检测siRNA MDM2对细胞增殖抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果转染siRNA MDM2的细胞的MDM2基因表达分别下调到对照组的31.61%和40.18%;转染阴性对照质粒的MDM2基因没有明显改变。MTT结果表明转染siRNA MDM2后细胞生长受到抑制,与对照组比差异具有显著性(P<0.5);同时细胞发生凋亡和细胞周期阻滞,转染siRNA MDM2-1,2的凋亡率分别为49.9%和40.0%,转染阴性对照质粒和对照组未检测出明显的增殖抑制和凋亡改变。结论 siRNA MDM2可以有效抑制U251细胞株中MDM2的表达,并抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡。
- 张舵舵赵燕颖张妍刘玲高振平
- 关键词:SIRNAMDM2胶质瘤逆转录聚合酶链反应
- RNA干扰沉默mdm2治疗骨肉瘤的实验研究被引量:2
- 2008年
- 目的 观察靶向mdm2的小干扰RNA(siRNA)对骨肉瘤生长的影响。方法构建PGCsilencer^TM-mdm2 siRNA,转染至骨肉瘤细胞U20S。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测siRNA对mdm2的沉默效果,采用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法检测siRNA对细胞增殖的影响,应用流式细胞术检测诱导细胞凋亡的情况。通过裸鼠移植瘤模型观察siRNA对骨肉瘤体内治疗效果。结果成功构建simdm2质粒。在转染simdm2的U20S细胞中,simdm2.1组和simdm2-2组的mdm2mRNA表达量分别下降至空白对照组的35.6%和42.1%(P〈0.05),mdm2蛋白表达分别降低至空白对照组的34.0%和47.2%(P〈0.05),而且增殖能力显著降低,发生明显凋亡,simdm2—1组和simdm2-2组的细胞凋亡率分别为29.9%和20.9%。阴性对照组和空白对照组的差异无统计学意义。裸鼠移植瘤实验结果显示,simdm2转染组的肿瘤受到抑制,而且mdm2基因和蛋白表达明显下调。结论simdm2能有效的抑制骨肉瘤生长,并抑制mdm2基因和蛋白的表达。
- 吕佳音高忠礼王金成吴丹凯赵东旭张舵舵赵燕颖
- 关键词:SIRNA骨肉瘤MDM2凋亡
- siRNA对骨肉瘤U2OS细胞株MDM2-mRNA表达的抑制作用被引量:2
- 2007年
- 目的研究载体介导的siRNA(small interfere RNA)技术对骨肉瘤细胞株U2OS中MDM2-mRNA表达的抑制作用。方法依据设计siRNA的原则,以MDM2为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆到载体PGCsilencerTM中构建重组体(PGCsilencerTM-MDM2 siRNA)。实验分转染重组质粒组,转染阴性对照质粒组和只加脂质体的空白组;RT-PCR法观察U2OS细胞中MDM2-mRNA表达改变。结果成功构建发卡样MDM2siRNA真核表达载体(PGCsilencer TM-MDM2 siRNA);PGCsilencer TM-MDM2 siRNA转染到U2OS细胞后,MDM2-mRNA表达较空白组显著下降(P<0.05),转染阴性对照质粒组与空白组无显著差异(P>0.05)。结论成功构建PGCsilencerTM-MDM2 siRNA重组体,并能有效抑制U2OS细胞中MDM2-mRNA表达。
- 吕佳音吴丹凯张舵舵秦中国吴丹华赵燕颖
- 关键词:RNA干扰MDM2