张旭辉
- 作品数:31 被引量:100H指数:5
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 骨髓间质干细胞复合生物陶瓷构建组织工程化人工软骨被引量:19
- 2003年
- 目的 探索以多孔β-磷酸三钙 (β- TCP)生物陶瓷材料为支架 ,经体外诱导的骨髓间质干细胞 (MSCs)为种子细胞 ,构建组织工程化软骨修复羊关节软骨缺损的可行性。方法 将 2 8只中国美利奴绵羊分为三组。实验组 (n=12 ) :分离培养羊自体第 7代 MSCs,经转化生长因子 - β诱导后接种到预制的 β- TCP多孔生物陶瓷材料上 ,细胞 -材料复合体经体外孵育后 ,无菌条件下植入预制的羊单侧肱骨近端关节面缺损处 ;单纯材料组 (n=12 ) :采用单纯β- TCP材料修复羊关节软骨缺损 ;空白对照组 (n=4 ) :制备的羊关节软骨缺损区未做任何修复。术后 12周和 2 4周分别取材 ,进行组织学、组织化学和免疫组织化学分析。结果 实验组术后 12周羊关节软骨缺损处肉眼可见透明软骨样组织形成 ,组织学检查发现 ,材料降解明显 ,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生软骨组织 ,软骨细胞外基质丰富 , 型胶原染色阳性 ;术后 2 4周 ,支架材料几乎完全降解 ,缺损区被新生软骨组织所取代。单纯材料组术后 12周 ,缺损区边缘有新生软骨组织向支架材料内长入 ,支架材料吸收明显 ;术后 2 4周 ,见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生软骨组织逐渐增多 ,但材料的中心部位未发现新生软骨形成。空白对照组至术后 2 4周 。
- 郭希民王常勇薄斌方泽强段翠密赵强王永红张旭辉范明卢建熙
- 关键词:骨髓间质干细胞人工软骨生物陶瓷材料Β-磷酸三钙
- 结核分枝杆菌抗体双抗原夹心ELISA检测方法的建立及初步应用被引量:2
- 2015年
- 目的:建立2种结核分枝杆菌(Mtb)抗体的双抗原夹心ELISA检测方法,并初步评价其在Mtb血清学临床辅助诊断中的应用价值。方法:采用Mtb融合抗原38k D+ESAT6+CFP10作为包被抗原,分别以辣根过氧化物酶(HRP)和生物素(Bio)标记的38k D+ESAT6+CFP10作为标记抗原,建立2种Mtb双抗原夹心ELISA法,即HRP-ELISA法和Bio-ELISA法;采用所建立的2种方法对结核患者和健康对照血清进行检测。结果:经过一系列的反应条件优化,确定HRP-ELISA法和Bio-ELISA法的最佳抗原包被浓度分别为2、0.25μg/m L,最适加样量均为100μL血清原液,最佳标记抗原稀释率分别为1∶500、1∶2000,检测的灵敏度分别为43.66%、52.11%,特异性均为100%。结论:建立了2种Mtb双抗原夹心ELISA法,它们均适用于Mtb血清学的临床辅助诊断。
- 蒋纾芳郭兰芹宗克亮杨锡琴刘志强赵照修冰水段翠密陈堃张旭辉张嵘冯晓燕张贺秋
- 关键词:结核分枝杆菌
- 三阴乳腺癌的异质性及靶向治疗被引量:7
- 2015年
- 三阴乳腺癌指雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)均为阴性的乳腺癌,占乳腺癌的15%~20%,具有侵袭转移率高、总生存率低、预后差等特点。三阴乳腺癌有很强的异质性,根据其基因表达特征,可分为基底细胞样1型、基底细胞样2型、间质型、间质干细胞型等7个亚类。由于其不表达ER、PR和HER-2,因此内分泌治疗和抗HER-2治疗无效,通常以化疗作为主要治疗方法。近年来,对其靶向治疗如EGFR、PARP、SRC等靶向治疗已有大量研究与应用报道,并显示了一定的治疗效果,提示靶向治疗是未来三阴乳腺癌的治疗方向。我们简要综述三阴乳腺癌的异质性、靶向治疗及预后诊断。
- 范雅文张旭辉张嵘张贺秋冯晓燕
- 关键词:三阴乳腺癌靶向治疗
- HCV核心蛋白与细胞转录因子相互作用研究
- 冯晓燕赵璐许立博杨锡琴段翠密张旭辉张贺秋
- 不同种类细胞外基质材料对胰岛细胞活力和功能的影响被引量:5
- 2004年
- 目的 比较在不同细胞外基质材料上培养胰岛细胞对胰岛细胞活力和功能的影响。方法 采用胶原酶Ⅴ型消化法 ,经Fi coll密度梯度离心法纯化获得的胰岛细胞 ,按 10 0 0胰岛当量单位 /ml密度分别在I型胶原、I型和Ⅳ型胶原、Matrigel3种不同细胞外基质材料包被的 2 4孔培养板上培养 ,以不包被组为对照。培养 7天时进行丫啶橙 碘化丙啶 (AO PI)染色。放免法检测培养第 2、4、6、8、10天时胰岛素基础分泌水平及培养 4天时胰岛素刺激分泌水平。结果 AO PI染色显示 :Matrigel包被组和I型与Ⅳ型胶原混合包被组胰岛细胞的活力优于I型胶原包被组和对照组 ,I型胶原包被组的胰岛细胞活力优于对照组 ,Matrigel包被组的胰岛细胞活力最好。糖敏感性和分泌特性检测表明 :Matrigel包被组胰岛细胞的糖敏感性和胰岛素分泌活性最好。Matrigel包被组和I型与Ⅳ型混合胶原包被组中培养的胰岛细胞胰岛素刺激分泌水平优于对照组 (P <0 0 5 ) ,而Ⅰ型胶原包被组和对照组比较差异无统计学意义(P >0 0 5 )。结论 将胰岛细胞在Matrigel和I型与Ⅳ型混合胶原上培养能够改善胰岛细胞的活力和功能。
- 张旭辉王常勇郭希民段翠密孙志杰
- 关键词:胰岛细胞外基质
- 一种高稳定性重组降钙素原、制备方法及用途
- 本发明提供了一种高稳定性重组降钙素原,该蛋白的结构为:PCT氨基多肽‑连接臂1‑降钙素‑连接臂2‑降钙蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明以柔性肽链连接臂替换了PCT中易于降解的58‑59aa,92‑95...
- 修冰水张贺秋阙海萍王晓丹冯晓燕杨锡琴张旭辉刘志强段翠密
- 文献传递
- 曲古菌素A诱导前列腺癌DU-145细胞有丝分裂的灾变被引量:1
- 2007年
- 目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi)曲古菌素(trichostatina A,TSA)对前列腺癌DU145细胞有丝分裂的影响,探讨HDACi杀伤肿瘤细胞的新机制。方法:将前列腺癌DC-145细胞分成不加药对照组和不同剂量(100、200、300、400nmol/L)TSA加药组,药物作用一定时间后,MTT法检测TSA对DU145细胞的杀伤效应,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态的变化,流式细胞术分析细胞周期的改变,免疫荧光染色观察DU145细胞异常的有丝分裂现象,Western blotting检测TSA处理对DU145细胞某些调控蛋白表达的影响。结果:TSA处理诱导DU145细胞发生有丝分裂,TSA处理24h后多核细胞数目由0.24%增加至1.21%。细胞周期计数结果显示,TSA处理后有丝分裂各期细胞比例发生明显改变,表现为有丝分裂前中期细胞所占比例增加,后末期细胞所占比例减少。免疫荧光染色显示,细胞出现多极纺锤体、染色体分离滞后等异常有丝分裂现象。TSA作用于DU145细胞后,能明显抑制Survivin蛋白的表达,增强细胞骨架蛋白Tubulin的乙酰化,并诱导P21蛋白高表达。结论:TSA能够诱使DU145细胞发生有丝分裂灾变,其机制可能与TSA降低Survivin蛋白的表达以及增强微管蛋白的乙酰化有关。
- 张旭辉于晓妉赵名易欣杜芝燕徐元基
- 关键词:组蛋白去乙酰化酶曲古菌素A前列腺癌细胞有丝分裂灾变
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂-FK228对人非小细胞肺癌A549细胞纺锤体检查点的影响被引量:1
- 2013年
- HDACi-FK228是一种新型抗肿瘤药物,但其作用机制研究的尚未十分明确,为进一步阐明FK228杀伤肿瘤细胞的机制,该文应用流式细胞术检测FK228对非小细胞肺癌A549细胞周期的影响;应用免疫荧光染色和免疫印迹检测FK228对检查点蛋白Bub1及BubR1定位和表达的影响;采用纺锤体检查点功能实验检测FK228对细胞检查点功能的影响。结果提示,FK228处理24 h后,G2/M期细胞比例由6.35%增至19.91%;FK228能够抑制检查点蛋白Bub1及BubR1着丝粒定位并上调两种蛋白表达;纺锤体检查点功能实验提示对照组经Nocodazole或Taxol处理后G2/M期细胞比例最高分别达35.74%及29.24%,而FK228处理组经上述两种药物处理后各时间点G2/M期细胞所占比例皆明显减少(最高所占比例分别仅为7.13%及6.03%),失去了随时相点的动态变化,提示FK228抑制了A549细胞纺锤体检查点在监测张力和黏附上的功能。该研究证实FK228能够通过影响纺锤体检查点蛋白着丝粒定位以及抑制纺锤体检查点的功能,进而干涉肿瘤细胞有丝分裂过程,有助于阐明HDACi杀伤肿瘤细胞的新机制。
- 张旭辉赵名陈国柱成祥于晓妉
- 关键词:组蛋白去乙酰化酶抑制剂肿瘤细胞
- 抗原修复在陈旧石蜡切片乳腺珠蛋白免疫组化检测中的应用被引量:2
- 2014年
- 目的探索一种简便有效的抗原修复方法,用于陈旧切片的人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,h MAM)免疫组化检测。方法将乳腺癌患者陈旧乳腺组织石蜡切片脱蜡至水,按常规免疫组化步骤进行检测。其中,实验组直接将切片浸入p H 3.5的柠檬酸盐缓冲液中室温修复10~15 min;同时以微波和高压加热修复法处理相应患者石蜡切片作为对照,最后以SP检测系统检测抗原修复及与抗体反应的效果。结果实验组与高压组和微波组比较,修复效果较好,且无组织脱片与折损现象。结论建立了一种利用陈旧组织切片检测乳腺珠蛋白的简便、有效的抗原修复方法,并能很好地防止脱片现象发生。
- 段翠密杨锡琴修冰水刘志强张旭辉戴振华阙海萍冯晓燕张贺秋
- 关键词:抗原修复人乳腺珠蛋白石蜡显微切片术
- 大鼠胰岛和睾丸支持细胞共移植治疗糖尿病的实验研究
- 该研究首先摸索和掌握了胰岛和SC体外分离、培养的关键技术,其次针对SC对共移植的胰岛在体内发挥的免疫豁免作用进行了相关的实验研究.在此基础上,应用旋转式细胞培养系统体外共培养胰岛和SC,使二者形成了支持细胞-胰岛共聚物,...
- 张旭辉
- 关键词:胰岛睾丸支持细胞共移植
- 文献传递