廖联明
- 作品数:9 被引量:18H指数:3
- 供职机构:福建医科大学更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金福建省科技厅计划项目福建省教育厅A类人文社科/科技研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学化学工程更多>>
- 人胰岛素样生长因子-l的原核表达和纯化被引量:7
- 2009年
- 目的构建高表达、易纯化的人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程菌。方法采用pET32a(+)质粒构建带羟胺裂解部位的表达载体,转入大肠杆菌DH5α进行诱导表达。表达产物经镍离子-亲和柱色谱分离后进行羟胺裂解。裂解产物纯化后用MALDI-TOF-MS法测定相对分子质量(Mr)。结果重组质粒序列完全正确。工程菌可表达预计Mr的融合蛋白,经Western blot证实有hIGF-1抗原活性。经镍离子-亲和柱色谱分离、羟胺裂解后得到的肽的Mr为7 640,和理论值相符。结论成功构建了表达hIGF-1的工程菌,为开发hIGF-1奠定了基础。
- 廖联明杨渐俞昌喜许盈
- 关键词:胰岛素样生长因子-1融合蛋白
- 重组人胰岛素样生长因子-1的表达载体构建和制备工艺研究
- 胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)是一广谱促生长因子,其化学结构与胰岛素原类似,由70个氨基酸组成。它通过与IGF-1受体(IGF-IR)结合发挥生理作用,并受I...
- 廖联明
- 关键词:胰岛素样生长因子-1基因重组发酵工艺蛋白纯化工程菌
- 文献传递
- 渗透压冲击预处理提高金属螯合亲和色谱纯化IGF-1融合蛋白的效率被引量:2
- 2010年
- 目的采用渗透压冲击预处理细菌以提高重组IGF-1融合蛋白纯化中金属螯合亲和色谱的效率。方法采用20%的蔗糖-EDTA缓冲液预处理经诱导表达的大肠杆菌,然后将表达产物经Ni-NTA-琼脂糖亲和色谱柱进行分离,观察蔗糖溶液处理对纯化效果的影响。结果经蔗糖-EDTA缓冲液预处理后Ni-NTA-琼脂糖色谱柱纯化蛋白的产量可以提高约2倍。结论渗透压冲击预处理可以有效提高金属螯合亲和色谱的效率。
- 廖联明杨渐俞昌喜许盈
- 关键词:重组蛋白
- 乳糖在重组大肠杆菌高密度发酵表达hIGF-1中的应用
- 本发明公开一种乳糖在重组大肠杆菌高密度发酵表达hIGF-1中的应用,尤其是以α-单水化合物形式存在的商品乳糖在重组大肠杆菌高密度发酵表达hIGF-1中的应用。乳糖能够诱导基于乳糖操纵子原理构建的含有外源hIGF-1原核大...
- 俞昌喜杨渐陈理廖联明许盈
- 文献传递
- 钴金属螯合亲和层析在hIGF-1融合蛋白分离纯化中的应用被引量:2
- 2013年
- 为探讨钴金属螯合亲和层析应用于分离纯化制备人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的可行性与纯化条件,以重组工程菌E.coli DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,使用钴亲和层析技术分离纯化其表达产物并与镍亲和层析比较,在此基础上尝试应用钴亲和层析分离纯化制备较大量的hIGF-1融合蛋白。结果显示,钴亲和层析在分离纯化hIGF-1融合蛋白时表现出更好的可操作性与纯化效果,线性放大条件后分离纯化效果稳定,制备hIGF-1融合蛋白产物纯度约为95%,蛋白获得率约为10.78%。研究初步建立了切实可行的钴金属螯合亲和层析分离纯化制备hIGF-1融合蛋白的工艺。
- 杨渐俞昌喜许盈廖联明
- 关键词:人胰岛素样生长因子-1镍离子钴离子
- 乳糖诱导人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中的表达被引量:8
- 2010年
- 目的以含有人源性胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因的大肠杆菌DH5α为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时目的融合蛋白的表达规律。方法利用可表达hIGF-1的工程菌,研究乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌在不同条件下表达目的蛋白的一般规律,并优化表达条件,表达结果借助SDS-PAGE等方法进行分析。结果乳糖可诱导hIGF-1在大肠杆菌中的表达,最优表达条件为37℃下重组菌株生长至OD600值为0.7时加入诱导浓度为0.8%的乳糖继续诱导4h。诱导的目的融合蛋白相对表达量能够达到占总蛋白的40-60%水平,接近IPTG的诱导表达水平。结论乳糖能够代替IPTG作为诱导剂成功诱导hIGF-1在大肠杆菌中的表达。
- 杨渐俞昌喜廖联明廖虹婷
- 关键词:乳糖诱导大肠杆菌
- 乳糖在重组大肠杆菌于5L自控式发酵罐中高密度发酵表达hIGF-1中的应用
- 本发明公开一种乳糖在重组大肠杆菌高密度发酵表达hIGF-1中的应用,尤其是以α-单水化合物形式存在的商品乳糖在重组大肠杆菌高密度发酵表达hIGF-1中的应用。乳糖能够诱导基于乳糖操纵子原理构建的含有外源hIGF-1原核大...
- 俞昌喜杨渐陈理廖联明许盈
- 文献传递
- 重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)融合蛋白的制备方法
- 本发明公开了一种重组人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)融合蛋白的制备方法,属生物技术中的生物医药领域。本发明采用基因工程菌发酵法生产:a.重组人IGF-1融合蛋白相关基因设计和合成;b.构建重组人IGF-1融合蛋白表达...
- 俞昌喜廖联明杨渐许盈
- 文献传递
- 胰岛素样生长因子-1和阿尔茨海默病的关系研究进展被引量:3
- 2010年
- 胰岛素样生长因子-1(IGF-1)是一种与机体组织分化、增殖和成熟有关的重要细胞因子。IGF-1具有保护神经细胞、抑制其凋亡的作用。近年来的研究证明IGF-1和阿尔茨海默病的发生、发展有关,IGF-1有可能作为神经保护剂用于阿尔茨海默病的治疗。
- 廖联明杨渐俞昌喜许盈
- 关键词:胰岛素样生长因子-1阿尔茨海默病