常庆
- 作品数:3 被引量:9H指数:1
- 供职机构:上海第二医科大学附属第九人民医院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- hBMP-4瞬时转染对兔骨髓基质干细胞生物学行为的影响被引量:9
- 2003年
- 目的应用兔骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,MSCs)作为基因治疗的靶细胞,体外转染人骨形成蛋白4(humanbonemorphogeneticprotein-4,hBMP-4)基因,观察瞬时转染对兔MSCs生物学行为的影响。方法贴壁法培养兔MSCs,分别在体外转染pEGFP-hBMP-4和pEGFP基因并留置空白对照。检测转染效率及目的基因的转录和表达,观察细胞形态及生长情况,检测碱性磷酸酶、钙结节及骨钙素等成骨细胞表型。结果基因转染效率达到20%~30%,RT-PCR显示MSCs本身有目的基因的少量转录,转染pEGFP-hBMP-4后转录增强。目的基因转染后细胞形态略有变化,生长曲线与对照组相似,碱性磷酸酶阳性染色面积增加(P=0.0016),钙结节增多(P=0.0001),骨钙素表达增强(P=0.03)。结论优化的条件下取得了较高的转染效率,hBMP-4基因转染可以增强目的基因的转录,加速MSCs向成骨细胞表型转化。hBMP-4转染的MSCs可望成为组织工程化骨理想的种子细胞。
- 蒋欣泉张志愿常庆陈建国周晓健陈万涛
- 关键词:骨髓基质干细胞基因治疗骨形成蛋白
- 骨形成蛋白4基因的反转录病毒载体及其应用
- 本发明涉及骨组织基因工程技术领域,具体地说及涉及含骨形成蛋白4基因的重组载体,该载体转化包装的病毒颗粒以及利用病毒颗粒制备组织工程化骨及其应用。本发明选择pLEGFP作为反转录病毒载体,成功构建了pLEGFP-hBMP-...
- 蒋欣泉张志愿陈建国常庆王丽珍潘红芽袁荣涛张秀丽张濒
- 文献传递
- 骨形成蛋白4基因的反转录病毒载体及其应用
- 本发明涉及骨组织基因工程技术领域,具体地说及涉及含骨形成蛋白4基因的重组载体,该载体转化包装的病毒颗粒以及利用病毒颗粒制备组织工程化骨及其应用。本发明选择pLEGFP作为反转录病毒载体,成功构建了pLEGFP-hBMP-...
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