孙晔
- 作品数：17 被引量：93H指数：6
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- 间接竞争酶联免疫分析法测定葛根中葛根素的含量被引量：4
- 2015年
- 目的利用间接竞争酶联免疫分析法（indirect competitive enzyme linked immunosorbent assay,ic-ELISA）测定葛根中葛根素的含量。方法利用抗葛根素单克隆抗体,通过线性关系、精密度、回收率的考察,建立葛根素的ic-ELISA分析方法。结果该方法的线性范围为15.6～500ng/m L,孔间差和板间差均不大于3.5%,平均回收率为101.8%,并且该法检测结果与高效液相色谱法检测结果一致。结论本实验为葛根质量控制以及含葛根药材的中药复方中葛根素的含量测定提供了一种新技术方法。
- 单文超冯会宾赵琰曾文浩贺娜娜赵妍孙晔屈会化
- 关键词：葛根素
- 芍药苷人工抗原的合成与鉴定被引量：5
- 2014年
- 利用高碘酸钠法合成芍药苷免疫抗原PF-BSA和包被抗原PF-OVA,并通过紫外光谱检测芍药苷成功与BSA/OVA偶联。小鼠经PF-BSA免疫后,体内可产生抗芍药苷抗体,酶联免疫分析法分析证明其免疫小鼠所得抗体效价达1∶12 800,半数抑制浓度为0.791 mg·L-1,且与黄芩苷等9种中药小分子交叉反应极低。芍药苷人工抗原的合成及抗体的获得为建立ELISA和研制免疫检测试剂盒奠定了基础。
- 屈会化赵妍苏歆贺娜娜孙晔孔慧赵琰王庆国
- 关键词：芍药苷人工抗原
- 北京地区实验树鼩的饲养管理方法被引量：4
- 2013年
- 树鼩作为低等灵长类动物,在生物学研究中的价值日益引起研究者重视,将其作为实验动物的实验需求越来越多。作为南方亚热带动物,树鼩如何适应北方地区的生活是北方地区将其用作实验动物的前提。本实验室探索出适宜树鼩居住的饲养笼具,确定了饲养环境温度、湿度、光照时间、噪声及通风等条件,制定了规范化的卫生管理标准,建立了北京地区长期人工培育树鼩的饲养管理方法,为今后利用树鼩进行中医药病证结合动物模型的研究奠定了基础。
- 赵琰吴婷婷李翼飞孙晔孙慧胡丽娜屈会化王庆国
- 关键词：树鼩饲养管理方法
- 人参皂苷Rg_1人工抗原的合成及免疫原性鉴定被引量：21
- 2013年
- 目的合成人参皂苷Rg1的人工免疫原和包被原,为后续制备人参皂苷Rg1的单克隆抗体及建立相应的免疫分析方法奠定基础。方法采用NaIO4氧化法分别合成人参皂苷Rg1免疫抗原(Rg1-BSA)和包被抗原(Rg1-PLL);紫外光谱和薄层色谱法鉴定人工抗原偶联是否成功;用间接ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗体效价,用间接竞争ELISA检测抗体特异性。结果经紫外光谱和薄层色谱法检测,人参皂苷Rg1与BSA/PLL偶联成功;免疫小鼠后Rg1-BSA可以使小鼠体内产生抗Rg1抗体;利用合成的偶联物成功建立间接ELISA和间接竞争ELISA方法,测得小鼠血清抗体效价在1∶80 000以上,并且所得抗体能特异性结合人参皂苷Rg1。结论成功合成了人参皂苷Rg1人工免疫原和包被原,可用于下一步的人参皂苷Rg1单克隆抗体制备及建立相应免疫分析方法。
- 刘洋刘洋屈会化任燕吴婷婷薛瑾孙晔赵琰
- 关键词：人参皂苷RG1人工抗原单克隆抗体免疫分析
- 透皮特性结合正交试验优选麻芥平喘巴布剂有效组分的提取工艺被引量：3
- 2013年
- 目的:优选麻芥平喘巴布剂的有效组分提取工艺。方法:以盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷的提取率和透过率为综合评价指标,采用正交试验优选提取工艺,提取物用Franz扩散池法进行体外透皮试验,HPLC测定伪麻黄碱、苦杏仁苷含量。结果:麻芥平喘有效组分的最佳提取工艺为加6倍量80%乙醇回流提取2次,每次1.5 h。结论:结合药效学指标优选的提取工艺符合实际应用需求,为麻芥平喘巴布剂的临床推广提供依据。
- 王晓曈王晓曈王雪茜屈会化孙晔冯会宾赵琰孔慧
- 关键词：伪麻黄碱苦杏仁苷
- 人工虫草制剂百令胶囊治疗慢性肾功能不全肾气虚证48例临床疗效观察
- 慢性肾功能衰竭是由多种慢性疾病造成的肾单位严重损害，肾小球滤过率持久性减低，使机体在排泄代谢废物和调节水、电解质、酸碱平衡紊乱的临床综合征。中医药在该病的治疗上具有一定的优势，尤其在改善患者各种临床症状，提高内生肌酐清除...
- 孙晔
- 关键词：冬虫夏草肾功能不全百令胶囊肾气虚
- 文献传递
- 三草降压汤不同组分含药血清对H_2O_2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型细胞活性的影响被引量：7
- 2013年
- 目的:观察三草降压汤(SCD)不同组分对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤模型的形态和活性影响,研究SCD不同组分对HUVEC氧化应激损伤的保护作用,探讨其降压作用的有效组分。方法:采用大孔树脂富集纯化技术,制备SCD的4种组分(分别为SCD-DW、SCD-10ET、SCD-50ET、SCD-95ET),用血清药理学方法分别制备不同组分的含药血清,以5%、10%、15%的含药血清浓度作用于H2O2损伤的HUVEC,于倒置显微镜下观察细胞形态,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力。结果:SCD各组分均能提高氧化损伤HUVEC的细胞活性,其中SCD-95ET较正常对照组有显著性差异(P<0.05)。结论:SCD的4种组分对H2O2损伤HUVEC均具有不同程度的保护作用,其中SCD-95ET可以作为SCD抗氧化损伤的有效组分进一步深入研究。
- 薛瑾王庆国李翼飞孙晔胡丽娜赵琰屈会化王雪茜
- 关键词：三草降压汤含药血清人脐静脉内皮细胞四甲基偶氮唑盐法
- HPLC-ECD法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质的含量被引量：5
- 2014年
- 目的：建立测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质含量的方法。方法：采用高效液相色谱-电化学法，以2，5-二羟基苯甲酸为内标，测定大鼠大脑皮层、小脑、海马组织、下丘脑、嗅球中以去甲肾上腺素（NE）和5-羟色胺（5-HT）为代表的单胺类神经递质的含量。色谱柱为DIKMA C18,流动相为缓冲盐溶液（醋酸钠、庚烷磺酸钠、乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸）-甲醇（梯度洗脱），流速为1．0ml／min，工作电压为＋0．7V。结果：NE、5-HT的检测质量浓度线性范围分别为O．084-4．2μg／ml（r=0．9999）和0．005-0．25μg／ml（r=0．9991），平均加样回收率分别为98．85％（RSD=2．89％，n=3）和101．5％（RSD=2．41％，n=3），日内（n=5）和日间（n=3）RSD均不大于3％；NE在小脑中的含量最低[（0．343±0．14）mg／g]，在下丘脑中含量最高[（3．062±1．51）mg／g]；5-HT在小脑中的含量最低[（0．059±0．04）mg／g]，在大脑皮层中含量最高[（0．383±0．21）mg／g]。结论：本方法灵敏、简便、快速，可用于大鼠脑组织中NE、5-HT含量的测定。
- 韦姗姗陆雪萍彭玲芳屈会化孙晔王庆国
- 关键词：高效液相色谱-电化学法单胺类神经递质去甲肾上腺素5-羟色胺脑组织
- 猪去氧胆酸人工抗原的合成及鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的合成并鉴定猪去氧胆酸(hyodeoxycholic acid,HDCA)人工抗原,为进一步制备其特异性抗体,建立相应的免疫分析方法,并为其应用到药理药效的研究中奠定基础。方法采用混合酸酐法合成HDCA人工抗原(HDCA-牛血清白蛋白),包被原(HDCA-鸡卵清白蛋白);应用硅胶薄层色谱法鉴定人工抗原、包被原合成是否成功;应用人工抗原与弗氏佐剂的乳化液背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠4次后,尾尖取血,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定免疫小鼠抗血清的效价和特异性。结果薄层色谱法检测结果表明,HDCA与牛血清白蛋白(BSA)偶联成功;小鼠抗血清效价大于1∶8 000,竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与HDCA产生特异性结合。抗血清和甘草酸、黄芩苷、栀子苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应,但与胆酸交叉反应率为90%。结论成功合成了HDCA-BSA,并可诱发小鼠产生相应特异性抗体。为进一步制备抗HDCA单克隆抗体及HDCA药理作用靶点的研究奠定了基础。
- 赵妍屈会化张越冯会宾孙晔孔慧赵琰王庆国
- 关键词：猪去氧胆酸人工抗原薄层色谱酶联免疫吸附测定
- 人参皂苷Rh_1人工抗原的合成及免疫原性分析被引量：7
- 2014年
- 目的：合成人参皂苷Rh1（GsRh1）的人工抗原,为获得其单克隆抗体奠定基础。方法：采用高碘酸钠氧化法分别合成GsRh1免疫抗原（GsRh1-BSA）和包被抗原（GsRh1-OVA）;用紫外光谱法和薄层色谱法鉴定人工抗原的合成是否成功;利用GsRh1-BSA免疫小鼠制备血清多抗;通过优化封闭液和包被原工作浓度,建立酶联免疫吸附分析法（ELISA）的最佳工作条件,并检测血清中抗体效价及特异性。结果：紫外光谱和薄层色谱法鉴定结果表明,GsRh1与BSA/OVA偶联成功,免疫后小鼠血清中产生了能特异性地与GsRh1结合的抗体,效价达到1∶32000,线性范围为10～10000 ng·mL-1,经分析确定ELISA的最佳包被浓度为1∶4000,最佳封闭液为10 mg·mL-1的明胶溶液。结论：成功合成了GsRh1人工抗原,并诱发小鼠产生了抗GsRh1的抗体,可用于下一步单克隆抗体的制备。
- 王艳屈会化赛佳洋张越孙晔孔慧赵琰王庆国
- 关键词：人参皂苷RH1人工抗原免疫原性紫外光谱法
